菜粉蝶颗粒体病毒（PrGV）基因组转录与蛋白表达分析
发布时间：2021-06-25 01:46
菜粉蝶颗粒体病毒（Pieris rapae Granulovirus,PrGV）属于杆状病毒科、颗粒体病毒属,是一类特异感染菜粉蝶幼虫的GV病毒。本论文通过基因组测序解析了 PrGV基因组结构,对其编码的120个蛋白进行了预测。同时,利用现代分子生物学方法对PrGV 一些基因进行表达模式分析和定位研究,并结合基因组、转录组和蛋白组等数据探讨了 PrGV与宿主的相互关系。所取得的主要结论如下:1)PrGV基因组大小为108,592bp,编码120个ORF,有62个ORF在其它GV基因组中均有同源基因,可能是GV核心基因;有5个ORF与其它GV基因同源性很低,可能是PrGV特有的。PrGV与ErelGV亲缘关系最近,基因组ORFs共线性程度也很高;与HearGV亲缘关系较远,共线性程度次之;与AcMNPV基因组无明显的共线性关系。2)利用高通量测序技术建立了菜青虫感染PrGV后的转录组数据库（包括未感毒对照、感毒6h组和感毒72h组的转录组数据库）,共鉴定到103个PrGV基因的表达。通过比较宿主基因在各转录组之间的表达水平变化,分别筛选到1,224个（未感毒:感毒6h）、1,638个（未...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１杆状病毒的包涵体形态（ｖａｎＯｅｒｓｅｔａｌ．，２００７）??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｈｅ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ?ｖｉｒｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ?（ｖａｎ?Ｏｅｒｓ?ｅｔ?ａｌ．，ａｎｄ??Ｖｌａｋ，?２００７）??
?第二章颗粒体病毒（ＧＶ）基因组比较分析??其囊膜含有一个或者多个核衣壳（图１．２），ＯＤＶ表面被多角体或颗粒体蛋白包??裹，能够通过其它昆虫取食从而侵染下一个宿主。??两种时相的杆状病毒粒子外层均有囊膜包被，但它们的来源不尽相同。ＢＶ粒??子的核衣壳在穿越核膜的时候获得一层脂囊膜，但这层膜在随后病毒粒子穿越细??胞质的时候消失，病毒粒子在继续穿越细胞质膜的时候再次获得囊膜，这层囊膜??使ＢＶ粒子更容易吸附其它易感细胞，从而引发二次感染。杆状病毒在第二时相??期间，其病毒粒子直接被包埋进核内新装配的囊膜中，含有囊膜的病毒粒子随后??被包埋进多角体（或颗粒体）的蛋白基质中，从而形成多角体（或颗粒体）。包??被ＢＶ和ＯＤＶ的囊膜性质和功能亦存在差异
ＰｒＧＶ感染初期（３－４天），菜青虫生长状态较差，无法正常蛻皮，影响??昆虫的正常生长；６天以后，昆虫的取食量下降，行动迟缓；感毒后第９－１２天，??菜青虫最终死亡，整个虫体开始液化（图１．３）。??自上世纪五十年代起，国外就开展了对ＰｒＧＶ的研究；七十年代，前苏联即??开始利用ＰｒＧＶ防控菜青虫。我国对ＰｒＧＶ的研究起步较晚，于１９７２年在广州??第一次分离到此病毒（全国蔬菜害虫病毒科研协作组，１９８２）。目前，先后由２０多??个省、市、自治区利用ＰｒＧＶ防治农业害虫。??４?ｉ?一??图１．３感染ＰｒＧＶ后的菜青虫形态（王晓锋等，２０１１）??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｔｈｅ?ｓｙｍｐｔｏｍ?ｏｆ?Ｐ．?ｒａｐａｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＰｒＧＶ?（Ｗａｎｇ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１１）??－７－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]杆状病毒-昆虫细胞技术在人用重组蛋白疫苗生产中的应用[J]. 王伟善,吴浩飞,申硕,杨晓明. 中国生物制品学杂志. 2013(12)
[2]细胞凋亡研究进展[J]. 阎海. 中山大学研究生学刊（自然科学.医学版）. 2012(03)
[3]水稻齿叶矮缩病毒的研究进展[J]. 郑璐平,谢荔岩,连玲丽,谢联辉. 中国农业科技导报. 2008(05)
[4]线粒体——抗病毒感染的重要细胞器[J]. 侯宁波,钟辉,马清钧. 生物技术通讯. 2008(05)
[5]果蝇热激蛋白的研究进展[J]. 王秋香,李宗芸,谢艳,曹慧. 昆虫知识. 2008(05)
[6]柞蚕NPV多角体膜蛋白类似基因的克隆和序列分析[J]. 王利群,沈卫德,李兵. 蚕业科学. 2006(04)
[7]缺失p10基因的重组棉铃虫病毒导致多角体囊膜包装不完整[J]. 董春升,邓菲,袁丽,潘小玉,王华林,胡志红. Virologica Sinica. 2006(06)
[8]昆虫杆状病毒杀虫剂研制与应用进展[J]. 刘永平,王方海,苏志坚,李广宏. 中国生物防治. 2006(01)
[9]小菜粉蝶颗粒体病毒颗粒体蛋白基因的序列测定及在大肠杆菌中的表达[J]. 陈可,张珈敏,胡远扬,刘传凤. 中国病毒学. 2004(05)
[10]昆虫杆状病毒表达系统的研究与应用进展[J]. 刘高强,章克昌,王晓玲,魏美才. 中国生物工程杂志. 2004(07)
博士论文
[1]家蚕表皮蛋白基因的表达谱分析及表皮蛋白BmorCPT1的功能研究[D]. 梁九波.西南大学 2012
[2]菜粉蝶颗粒体病毒基因组和ODV蛋白组研究[D]. 王晓锋.浙江大学 2012
[3]家蚕感染质型多角体病毒差异表达基因研究[D]. 吴萍.中国农业科学院 2010
[4]东方粘虫颗粒体病毒和斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ基因组全序列分析[D]. 李轶女.中国农业科学院 2008
[5]菜粉蝶颗粒体病毒的分子生物学研究[D]. 温荣辉.广西大学 2007
[6]BmNPV三个杆状病毒核心基因分析[D]. 徐海君.浙江大学 2006
硕士论文
[1]家蚕杆状病毒IAP蛋白功能的研究[D]. 陈滨.浙江理工大学 2015
[2]杆状病毒诱导的斜纹蛾细胞凋亡及其机制的初步研究[D]. 杜昌升.华中师范大学 2002
本文编号：3248246
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１杆状病毒的包涵体形态（ｖａｎＯｅｒｓｅｔａｌ．，２００７）??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｈｅ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ?ｖｉｒｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ?（ｖａｎ?Ｏｅｒｓ?ｅｔ?ａｌ．，ａｎｄ??Ｖｌａｋ，?２００７）??
?第二章颗粒体病毒（ＧＶ）基因组比较分析??其囊膜含有一个或者多个核衣壳（图１．２），ＯＤＶ表面被多角体或颗粒体蛋白包??裹，能够通过其它昆虫取食从而侵染下一个宿主。??两种时相的杆状病毒粒子外层均有囊膜包被，但它们的来源不尽相同。ＢＶ粒??子的核衣壳在穿越核膜的时候获得一层脂囊膜，但这层膜在随后病毒粒子穿越细??胞质的时候消失，病毒粒子在继续穿越细胞质膜的时候再次获得囊膜，这层囊膜??使ＢＶ粒子更容易吸附其它易感细胞，从而引发二次感染。杆状病毒在第二时相??期间，其病毒粒子直接被包埋进核内新装配的囊膜中，含有囊膜的病毒粒子随后??被包埋进多角体（或颗粒体）的蛋白基质中，从而形成多角体（或颗粒体）。包??被ＢＶ和ＯＤＶ的囊膜性质和功能亦存在差异
ＰｒＧＶ感染初期（３－４天），菜青虫生长状态较差，无法正常蛻皮，影响??昆虫的正常生长；６天以后，昆虫的取食量下降，行动迟缓；感毒后第９－１２天，??菜青虫最终死亡，整个虫体开始液化（图１．３）。??自上世纪五十年代起，国外就开展了对ＰｒＧＶ的研究；七十年代，前苏联即??开始利用ＰｒＧＶ防控菜青虫。我国对ＰｒＧＶ的研究起步较晚，于１９７２年在广州??第一次分离到此病毒（全国蔬菜害虫病毒科研协作组，１９８２）。目前，先后由２０多??个省、市、自治区利用ＰｒＧＶ防治农业害虫。??４?ｉ?一??图１．３感染ＰｒＧＶ后的菜青虫形态（王晓锋等，２０１１）??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｔｈｅ?ｓｙｍｐｔｏｍ?ｏｆ?Ｐ．?ｒａｐａｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＰｒＧＶ?（Ｗａｎｇ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１１）??－７－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]杆状病毒-昆虫细胞技术在人用重组蛋白疫苗生产中的应用[J]. 王伟善,吴浩飞,申硕,杨晓明. 中国生物制品学杂志. 2013(12)
[2]细胞凋亡研究进展[J]. 阎海. 中山大学研究生学刊（自然科学.医学版）. 2012(03)
[3]水稻齿叶矮缩病毒的研究进展[J]. 郑璐平,谢荔岩,连玲丽,谢联辉. 中国农业科技导报. 2008(05)
[4]线粒体——抗病毒感染的重要细胞器[J]. 侯宁波,钟辉,马清钧. 生物技术通讯. 2008(05)
[5]果蝇热激蛋白的研究进展[J]. 王秋香,李宗芸,谢艳,曹慧. 昆虫知识. 2008(05)
[6]柞蚕NPV多角体膜蛋白类似基因的克隆和序列分析[J]. 王利群,沈卫德,李兵. 蚕业科学. 2006(04)
[7]缺失p10基因的重组棉铃虫病毒导致多角体囊膜包装不完整[J]. 董春升,邓菲,袁丽,潘小玉,王华林,胡志红. Virologica Sinica. 2006(06)
[8]昆虫杆状病毒杀虫剂研制与应用进展[J]. 刘永平,王方海,苏志坚,李广宏. 中国生物防治. 2006(01)
[9]小菜粉蝶颗粒体病毒颗粒体蛋白基因的序列测定及在大肠杆菌中的表达[J]. 陈可,张珈敏,胡远扬,刘传凤. 中国病毒学. 2004(05)
[10]昆虫杆状病毒表达系统的研究与应用进展[J]. 刘高强,章克昌,王晓玲,魏美才. 中国生物工程杂志. 2004(07)
博士论文
[1]家蚕表皮蛋白基因的表达谱分析及表皮蛋白BmorCPT1的功能研究[D]. 梁九波.西南大学 2012
[2]菜粉蝶颗粒体病毒基因组和ODV蛋白组研究[D]. 王晓锋.浙江大学 2012
[3]家蚕感染质型多角体病毒差异表达基因研究[D]. 吴萍.中国农业科学院 2010
[4]东方粘虫颗粒体病毒和斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ基因组全序列分析[D]. 李轶女.中国农业科学院 2008
[5]菜粉蝶颗粒体病毒的分子生物学研究[D]. 温荣辉.广西大学 2007
[6]BmNPV三个杆状病毒核心基因分析[D]. 徐海君.浙江大学 2006
硕士论文
[1]家蚕杆状病毒IAP蛋白功能的研究[D]. 陈滨.浙江理工大学 2015
[2]杆状病毒诱导的斜纹蛾细胞凋亡及其机制的初步研究[D]. 杜昌升.华中师范大学 2002
本文编号：3248246
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