镉胁迫对拟环纹豹蛛毒腺和脑神经节基因表达及其功能的影响
发布时间：2021-07-07 12:47
本文探讨了重金属镉在拟环纹豹蛛体内的富集规律,并通过RNA-seq技术来分析镉胁迫下拟环纹豹蛛毒腺和脑神经节基因表达及功能的影响,主要的研究结果为:1.用浓度1.00mg/L氯化镉配制培养基饲养果蝇,饲养7天时,果蝇体内镉富集量达峰值;用饲养7天左右的果蝇喂养拟环纹豹蛛,拟环纹豹蛛体内镉富集量随饲养时间的延长而递增,至30天时,拟环纹豹蛛体内镉富集量达峰值（7.25μg/g）,随后稍有下降并维持一个较为稳定的水平。因此,本研究取富集重金属镉30天的蜘蛛做转录组分析。2.对拟环纹豹蛛毒腺进行转录组测序,拼接得到92778条平均长度1103.9bp的Unigene。基因表达分析显示,镉胁迫蜘蛛毒腺中相对于正常蜘蛛毒腺有237条基因显著差异表达（FDR≤0.01,绝对值Log2foldchange>2）,其中上调107条,下调130条。对差异基因进行GO富集分析,发现上调差异基因主要富集在酶活性（金属蛋白酶活性、泛素-蛋白转移酶活性等）、离子通道方面（钙离子通道）,表明镉对拟环纹豹蛛细胞周期和离子稳态造成影响;下调基因主要富集在类胆固醇激素方面,表明镉可能影响拟环纹豹蛛生殖功能。对差异...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
高通量测序流程
取消解管若干根，用硝酸浸泡过夜，使用时用自来水清洗干净，再用蒸馏水润洗三次过后，放入恒温干燥箱内烘干。每个样称取对应动物样品 0.3 g~0.5 g，在 50ml 消解管中用 1 %的硝酸对动物样品进行浸泡一夜（12h），分别进行标记，记录。再加入盐酸 1.5 mL，硝酸 4.5 mL，放入消解仪上，90℃消解 1 h，随后升温到 120℃消解 2 h，待反应液完全变澄清后，150℃跑酸，待溶液剩余约为 1 mL 左右，取出，冷却后用容量瓶定容到 50 mL，过滤后，使用电感耦合等离子光谱仪（ICP）在 228.3 nm 测定重金属镉含量。2.2.5 数据分析采用 Excel2003 软件、SPSS17.0 软件和 Origin2006 软件对实验数据进行处理、统计学分析及作图。2.3 结果2.3.1 红眼果蝇体内重金属镉富集情况
图 2-2:不同浓度下红眼果蝇体内镉富集量情况Figure 2-2：Enrichment of cadmium in Drosophila melanogaster at different concentrations从图 2-2 可知，在同一天数，红眼果蝇体内的重金属镉富集情况随着浓度的增加而增加，0.05mg/L 浓度下红眼果蝇重金属镉富集情况与 0.10mg/L 和 0.50mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L 和 10.00mg/L 浓度下红眼果蝇体内重金属富集量均存在显著性差异（P<0.05），并且后一浓度红眼果蝇体内的镉富集量与前一浓度比较均具显著性差异（P<0.05）。2.3.2 拟环纹豹蛛体内重金属镉富集情况从图 2-3 可知，拟环纹豹蛛雌成蛛体内重金属镉富集量随饲养时间的延长逐渐增加，30 天达到最高值，之后随之减少。可知 30 天的拟环纹豹蛛体中重金属镉富集量最高。0 天时的拟环纹豹蛛体内重金属镉富集量相对其他八个浓度都存在显著性差异（P<0.05），5 天时拟环纹豹蛛体内重金属镉富集量相对 0 天、25 天、30 天存在显著
【参考文献】：
期刊论文
[1]镉胁迫对大型溞的毒性效应[J]. 李爽,徐镜波. 北华大学学报(自然科学版). 2017(01)
[2]镉诱导细胞自噬的分子机制研究进展[J]. 史美琳,周阳,刘海涛,徐荣发,施海峰. 生物学杂志. 2016(05)
[3]镉在拟环纹豹蛛体内的积累动态[J]. 崔喜勤,林君锋. 福建农林大学学报(自然科学版). 2016(04)
[4]镉胁迫对昆虫的毒性效应及昆虫防御机制的研究进展[J]. 付伟利,杜移珍,张敏. 中国药理学与毒理学杂志. 2015(06)
[5]镉胁迫对苗期曼陀罗生长及镉富集的影响[J]. 杨海涛,张彪,杨素勤,位高生,师振亚. 江苏农业科学. 2015(10)
[6]土壤镉污染对农作物的危害研究进展[J]. 肖光辉,卢红玲,彭新德. 湖南农业科学. 2015(09)
[7]马缨丹对镉的生长响应及其富集、转运和亚细胞分布特点研究[J]. 方继宇,贾永霞,张春梅,张世熔,徐小逊,蒲玉琳,李婷,李云. 生态环境学报. 2014(10)
[8]重金属镉胁迫对日本蟳抗氧化酶活力、丙二醛含量及组织蓄积的影响[J]. 许星鸿,阎斌伦,徐加涛,潘乃路,唐瑶,杜丹丹,张雁秋. 水产科学. 2014(09)
[9]镉金属类雌激素作用及其机制研究进展[J]. 叶斯阳,余日安. 中国职业医学. 2014(04)
[10]转录组学在果蔬采后衰老生物学中的研究进展[J]. 王金花,郜海燕,许晴晴,穆宏磊,葛林梅,宋丽丽. 浙江农业科学. 2014(07)
博士论文
[1]马鹿（Cervus elaphus）鹿茸角顶端茸皮与软骨组织转录组研究[D]. 杨晓光.东北林业大学 2015
[2]棉纤维发育相关基因转录组学、表达谱分析研究[D]. 陈全家.中国农业大学 2014
[3]小麦条锈菌中国鉴别寄主尤皮Ⅱ号抗条锈病基因的精细定位[D]. 王步云.中国农业科学院 2014
[4]镉对大鼠大脑皮质神经细胞毒性损伤的机制[D]. 袁燕.扬州大学 2012
[5]泥蚶高通量转录组分析及生长相关基因的克隆与表达研究[D]. 董迎辉.中国海洋大学 2012
硕士论文
[1]花椒皮刺分化转录组测序及数据分析[D]. 蒋弘刚.西北农林科技大学 2014
[2]重金属镉胁迫细胞氧化毒理分子机制研究[D]. 陈忠翔.东华大学 2014
[3]镉低积累蔬菜品种筛选及其镉积累与生理生化特性研究[D]. 黄志亮.华中农业大学 2012
[4]日本三角涡虫转录组、再生表达谱及小RNA谱的鉴定与分析[D]. 秦云飞.郑州大学 2012
[5]重金属镉对睾丸间质细胞的毒理作用分子机制研究[D]. 邹萍.暨南大学 2011
[6]钙离子在镉致体外培养大鼠大脑皮质神经细胞凋亡中的作用[D]. 孙娅.扬州大学 2011
[7]水稻对镉、苄嘧磺隆及其复合污染的基因应答[D]. 张小丽.扬州大学 2010
[8]水稻对重金属镉和铅的吸收和运转及栽培环境的影响研究[D]. 刘旭.扬州大学 2007
[9]亚慢性镉中毒对公鸡生殖毒理及硒拮抗效应的研究[D]. 高睿.东北农业大学 2002
本文编号：3269659
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
高通量测序流程
取消解管若干根，用硝酸浸泡过夜，使用时用自来水清洗干净，再用蒸馏水润洗三次过后，放入恒温干燥箱内烘干。每个样称取对应动物样品 0.3 g~0.5 g，在 50ml 消解管中用 1 %的硝酸对动物样品进行浸泡一夜（12h），分别进行标记，记录。再加入盐酸 1.5 mL，硝酸 4.5 mL，放入消解仪上，90℃消解 1 h，随后升温到 120℃消解 2 h，待反应液完全变澄清后，150℃跑酸，待溶液剩余约为 1 mL 左右，取出，冷却后用容量瓶定容到 50 mL，过滤后，使用电感耦合等离子光谱仪（ICP）在 228.3 nm 测定重金属镉含量。2.2.5 数据分析采用 Excel2003 软件、SPSS17.0 软件和 Origin2006 软件对实验数据进行处理、统计学分析及作图。2.3 结果2.3.1 红眼果蝇体内重金属镉富集情况
图 2-2:不同浓度下红眼果蝇体内镉富集量情况Figure 2-2：Enrichment of cadmium in Drosophila melanogaster at different concentrations从图 2-2 可知，在同一天数，红眼果蝇体内的重金属镉富集情况随着浓度的增加而增加，0.05mg/L 浓度下红眼果蝇重金属镉富集情况与 0.10mg/L 和 0.50mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L 和 10.00mg/L 浓度下红眼果蝇体内重金属富集量均存在显著性差异（P<0.05），并且后一浓度红眼果蝇体内的镉富集量与前一浓度比较均具显著性差异（P<0.05）。2.3.2 拟环纹豹蛛体内重金属镉富集情况从图 2-3 可知，拟环纹豹蛛雌成蛛体内重金属镉富集量随饲养时间的延长逐渐增加，30 天达到最高值，之后随之减少。可知 30 天的拟环纹豹蛛体中重金属镉富集量最高。0 天时的拟环纹豹蛛体内重金属镉富集量相对其他八个浓度都存在显著性差异（P<0.05），5 天时拟环纹豹蛛体内重金属镉富集量相对 0 天、25 天、30 天存在显著
【参考文献】：
期刊论文
[1]镉胁迫对大型溞的毒性效应[J]. 李爽,徐镜波. 北华大学学报(自然科学版). 2017(01)
[2]镉诱导细胞自噬的分子机制研究进展[J]. 史美琳,周阳,刘海涛,徐荣发,施海峰. 生物学杂志. 2016(05)
[3]镉在拟环纹豹蛛体内的积累动态[J]. 崔喜勤,林君锋. 福建农林大学学报(自然科学版). 2016(04)
[4]镉胁迫对昆虫的毒性效应及昆虫防御机制的研究进展[J]. 付伟利,杜移珍,张敏. 中国药理学与毒理学杂志. 2015(06)
[5]镉胁迫对苗期曼陀罗生长及镉富集的影响[J]. 杨海涛,张彪,杨素勤,位高生,师振亚. 江苏农业科学. 2015(10)
[6]土壤镉污染对农作物的危害研究进展[J]. 肖光辉,卢红玲,彭新德. 湖南农业科学. 2015(09)
[7]马缨丹对镉的生长响应及其富集、转运和亚细胞分布特点研究[J]. 方继宇,贾永霞,张春梅,张世熔,徐小逊,蒲玉琳,李婷,李云. 生态环境学报. 2014(10)
[8]重金属镉胁迫对日本蟳抗氧化酶活力、丙二醛含量及组织蓄积的影响[J]. 许星鸿,阎斌伦,徐加涛,潘乃路,唐瑶,杜丹丹,张雁秋. 水产科学. 2014(09)
[9]镉金属类雌激素作用及其机制研究进展[J]. 叶斯阳,余日安. 中国职业医学. 2014(04)
[10]转录组学在果蔬采后衰老生物学中的研究进展[J]. 王金花,郜海燕,许晴晴,穆宏磊,葛林梅,宋丽丽. 浙江农业科学. 2014(07)
博士论文
[1]马鹿（Cervus elaphus）鹿茸角顶端茸皮与软骨组织转录组研究[D]. 杨晓光.东北林业大学 2015
[2]棉纤维发育相关基因转录组学、表达谱分析研究[D]. 陈全家.中国农业大学 2014
[3]小麦条锈菌中国鉴别寄主尤皮Ⅱ号抗条锈病基因的精细定位[D]. 王步云.中国农业科学院 2014
[4]镉对大鼠大脑皮质神经细胞毒性损伤的机制[D]. 袁燕.扬州大学 2012
[5]泥蚶高通量转录组分析及生长相关基因的克隆与表达研究[D]. 董迎辉.中国海洋大学 2012
硕士论文
[1]花椒皮刺分化转录组测序及数据分析[D]. 蒋弘刚.西北农林科技大学 2014
[2]重金属镉胁迫细胞氧化毒理分子机制研究[D]. 陈忠翔.东华大学 2014
[3]镉低积累蔬菜品种筛选及其镉积累与生理生化特性研究[D]. 黄志亮.华中农业大学 2012
[4]日本三角涡虫转录组、再生表达谱及小RNA谱的鉴定与分析[D]. 秦云飞.郑州大学 2012
[5]重金属镉对睾丸间质细胞的毒理作用分子机制研究[D]. 邹萍.暨南大学 2011
[6]钙离子在镉致体外培养大鼠大脑皮质神经细胞凋亡中的作用[D]. 孙娅.扬州大学 2011
[7]水稻对镉、苄嘧磺隆及其复合污染的基因应答[D]. 张小丽.扬州大学 2010
[8]水稻对重金属镉和铅的吸收和运转及栽培环境的影响研究[D]. 刘旭.扬州大学 2007
[9]亚慢性镉中毒对公鸡生殖毒理及硒拮抗效应的研究[D]. 高睿.东北农业大学 2002
本文编号：3269659
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