抗白粉病的黑麦6RL微小染色体结构简析
发布时间：2021-08-02 13:26
小麦是我国乃至世界人类的主要食物来源,小麦白粉病是目前小麦生产上的重要病害之一。黑麦6R染色体带有白粉病抗性基因,目前仍具有抗性。本研究在前期获得的抗白粉病黑麦6RL微小染色体附加系基础之上,利用ND-FISH技术和分子生物学技术,对附加系中微小染色体的结构及减数分裂行为进行了初步分析。对6RL微小染色体附加系的辐射后代进行了大量的分子细胞学鉴定。同时对材料进行了田间白粉病抗性鉴定。获得了以下结果:1、利用SLAF-seq技术,开发1086对引物,从这些引物中,获得黑麦Kustro来源的6RL微小染色体特异的分子标记19对。2、对其中16对标记的扩增产物进行克隆、测序,成功获得16条序列,这16条序列长度在200-464 bp之间。利用GrainGenes数据库中的BLAST工具,将这16条序列与黑麦基因组的Scaffold序列进行比对分析,有8条序列分别与数据库中已登录的5条黑麦6R Scaffolds序列有98%以上的相似度。3、这5条Scaffolds分别为Lo7v2scaffold453717 6R、Lo7
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
引物PCR扩增结果
图 3. 将 19 对特异引物定位在黑麦 6RL 微小染色体上A：6R 染色体、6RL 染色体臂和 6RL 微小染色体的剪切图。红色方框所示为 6RL 微小染色体区段，该区段携带有白粉病抗性基因。B：19 对 6RL 微小染色体特异引物在 MTA6RLku上的定位图。绿色表示 Oligo-pSc119.2-1 在 6RL 上的信号位点，红色表示 Oligo-pSc200 和 Oligo-pSc250 在6RL 上的信号位点。Fig3. Localization of 19 specific molecular markers on rye 6RL minichromosomeA:Shear maps of 6R chromosome, 6RL chromosome arm and 6RL minichromosome. The red boxshows the 6RL minichromosome segment, which carries the powdery mildew resistance gene. B:Mapping of 19 6RL minichromosome-specific primers on 6RL arm. The green line indicates thesignaling site of Oligo-pSc119.2-1 on 6RL arm, and the red line indicates the signaling site ofOligo-pSc200 and Oligo-pSc250 on 6RL arm.3.2 黑麦 6RL 微小染色体特异序列克隆测序及 scaffold 序列比对分析
图 4. 6RL 微小染色体特异片段的克隆及鉴定 微小染色体特异分子标记 6RL-M8 的 PCR 扩增产物，箭头所指为目的条带，arker；MY11：绵阳 11；CS：中国春；MTA6RLKu：小麦-黑麦 6RL 单端体附MA7RKu：小麦-黑麦 1R 到 7R 的全套单体附加系；6RL 微小染色体：小麦-黑染色体附加系。B：菌液 PCR 鉴定，1-5 为白斑转化菌，Marker：DNAMarkFig4. Cloning and identification of 6RL minichromosome specific fragmentamplification product of 6RL minichromosomal specific molecular marker 6RL-Med by the arrow as the target band.Marker, DNA Marker; MY11, Mianyang11; CSTA6RLKu, Wheat-rye 6RL monotelosomic addition line; MA1RKu-MA7RKu,nosomic addition line; 6RL minichromosome, Wheat-rye 6RL minichromosome B: Identification of bacterial fluid by PCR. Marker: DNAMarker.
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物材料减数分裂染色体标本的快速制作[J]. 丁海燕. 植物研究. 2017(05)
[2]利用SLAF-seq技术开发新寡核苷酸探针鉴定小麦背景中的黑麦染色体[J]. 刘洪坤,唐宗祥. 四川农业大学学报. 2016(04)
[3]小麦白粉病及其抗性研究进展[J]. 杨美娟,黄坤艳,韩庆典. 分子植物育种. 2016(05)
[4]黑麦属优异基因在小麦改良中的研究与应用[J]. 曹新有,陈雪燕,陈朝辉,王灿国,吉万全,刘建军. 农业生物技术学报. 2014(08)
[5]小麦改良的可利用资源:黑麦抗病基因[J]. 孙媛媛,杜秉昊,汪慧,束永俊,郭长虹,郭东林. 植物遗传资源学报. 2014(02)
[6]新型小麦-黑麦6R附加系的创制及其白粉病抗性基因向小麦中的渗进[J]. 李方安,唐宗祥,符书兰. 麦类作物学报. 2014(01)
[7]抗条锈病的小麦-非洲黑麦异代换系的分子细胞学鉴定[J]. 雷孟平,李光蓉,刘成,杨足君. 农业生物技术学报. 2013(03)
[8]基于SLAF-seq技术开发长穗偃麦草染色体特异分子标记[J]. 陈士强,秦树文,黄泽峰,戴毅,张璐璐,高营营,高勇,陈建民. 作物学报. 2013(04)
[9]小麦-黑麦附加系的创制及5R抗白粉病新基因的发现[J]. 符书兰,唐宗祥,任正隆. 遗传. 2011(11)
[10]小黑麦研究进展[J]. 朱铁霞,高凯,王国成. 内蒙古民族大学学报(自然科学版). 2011(04)
博士论文
[1]小麦远缘杂种染色体行为及相关基因研究[D]. 郝明.四川农业大学 2015
硕士论文
[1]小麦抗白粉病基因Pm16的SSR标记定位以及多基因累加体的分子标记辅助选择[D]. 罗瑛皓.四川农业大学 2003
本文编号：3317645
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
引物PCR扩增结果
图 3. 将 19 对特异引物定位在黑麦 6RL 微小染色体上A：6R 染色体、6RL 染色体臂和 6RL 微小染色体的剪切图。红色方框所示为 6RL 微小染色体区段，该区段携带有白粉病抗性基因。B：19 对 6RL 微小染色体特异引物在 MTA6RLku上的定位图。绿色表示 Oligo-pSc119.2-1 在 6RL 上的信号位点，红色表示 Oligo-pSc200 和 Oligo-pSc250 在6RL 上的信号位点。Fig3. Localization of 19 specific molecular markers on rye 6RL minichromosomeA:Shear maps of 6R chromosome, 6RL chromosome arm and 6RL minichromosome. The red boxshows the 6RL minichromosome segment, which carries the powdery mildew resistance gene. B:Mapping of 19 6RL minichromosome-specific primers on 6RL arm. The green line indicates thesignaling site of Oligo-pSc119.2-1 on 6RL arm, and the red line indicates the signaling site ofOligo-pSc200 and Oligo-pSc250 on 6RL arm.3.2 黑麦 6RL 微小染色体特异序列克隆测序及 scaffold 序列比对分析
图 4. 6RL 微小染色体特异片段的克隆及鉴定 微小染色体特异分子标记 6RL-M8 的 PCR 扩增产物，箭头所指为目的条带，arker；MY11：绵阳 11；CS：中国春；MTA6RLKu：小麦-黑麦 6RL 单端体附MA7RKu：小麦-黑麦 1R 到 7R 的全套单体附加系；6RL 微小染色体：小麦-黑染色体附加系。B：菌液 PCR 鉴定，1-5 为白斑转化菌，Marker：DNAMarkFig4. Cloning and identification of 6RL minichromosome specific fragmentamplification product of 6RL minichromosomal specific molecular marker 6RL-Med by the arrow as the target band.Marker, DNA Marker; MY11, Mianyang11; CSTA6RLKu, Wheat-rye 6RL monotelosomic addition line; MA1RKu-MA7RKu,nosomic addition line; 6RL minichromosome, Wheat-rye 6RL minichromosome B: Identification of bacterial fluid by PCR. Marker: DNAMarker.
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物材料减数分裂染色体标本的快速制作[J]. 丁海燕. 植物研究. 2017(05)
[2]利用SLAF-seq技术开发新寡核苷酸探针鉴定小麦背景中的黑麦染色体[J]. 刘洪坤,唐宗祥. 四川农业大学学报. 2016(04)
[3]小麦白粉病及其抗性研究进展[J]. 杨美娟,黄坤艳,韩庆典. 分子植物育种. 2016(05)
[4]黑麦属优异基因在小麦改良中的研究与应用[J]. 曹新有,陈雪燕,陈朝辉,王灿国,吉万全,刘建军. 农业生物技术学报. 2014(08)
[5]小麦改良的可利用资源:黑麦抗病基因[J]. 孙媛媛,杜秉昊,汪慧,束永俊,郭长虹,郭东林. 植物遗传资源学报. 2014(02)
[6]新型小麦-黑麦6R附加系的创制及其白粉病抗性基因向小麦中的渗进[J]. 李方安,唐宗祥,符书兰. 麦类作物学报. 2014(01)
[7]抗条锈病的小麦-非洲黑麦异代换系的分子细胞学鉴定[J]. 雷孟平,李光蓉,刘成,杨足君. 农业生物技术学报. 2013(03)
[8]基于SLAF-seq技术开发长穗偃麦草染色体特异分子标记[J]. 陈士强,秦树文,黄泽峰,戴毅,张璐璐,高营营,高勇,陈建民. 作物学报. 2013(04)
[9]小麦-黑麦附加系的创制及5R抗白粉病新基因的发现[J]. 符书兰,唐宗祥,任正隆. 遗传. 2011(11)
[10]小黑麦研究进展[J]. 朱铁霞,高凯,王国成. 内蒙古民族大学学报(自然科学版). 2011(04)
博士论文
[1]小麦远缘杂种染色体行为及相关基因研究[D]. 郝明.四川农业大学 2015
硕士论文
[1]小麦抗白粉病基因Pm16的SSR标记定位以及多基因累加体的分子标记辅助选择[D]. 罗瑛皓.四川农业大学 2003
本文编号：3317645
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