转dsAsFAR抗中黑盲蝽棉花对南方小花蝽的安全性评价
发布时间：2021-08-03 03:40
传统转Bt抗虫棉花的大量种植,不仅有效的控制了棉铃虫等重要鳞翅目害虫,而且有效减少了化学农药的使用,降低了环境污染,改进了田间生态环境。但随着种植棉花过程中农药使用的减少,多种次要害虫逐渐上升为主要害虫,如半翅目的盲蝽类、烟粉虱等。由于对半翅目昆虫抗杀效果较强的Bt蛋白资源缺乏,并且盲蝽类害虫活动敏捷,化学防控效果有限,以植物介导RNAi的转基因棉花作为新型防控手段备受期待,与此同时,此类转基因棉花的安全性评估也成为重点研究的问题。南方小花蝽（Orius similis）是棉田中一种优势天敌昆虫,可作为一种重要的非靶标安全性评价生物。本研究以表达中黑盲蝽（Adelphocoris suturalis）fatty acyl-CoA reductase（FAR）基因dsRNA（dsAsFAR）的转基因棉花为研究对象,以南方小花蝽为非靶标评价生物,评估转dsAsFAR棉花对南方小花蝽的安全性,研究结果如下:1.利用南方小花蝽的转录组获得FAR（OsFAR）基因序列,全长1852bp,开放阅读框共编码517个氨基酸。系统发育分析表明OsFAR与AsFAR亲缘关系最接近,其次为桃蚜、白蜡虫等。比...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
种半翅目昆虫FAR基因进化树
24图 2 南方小花蝽与其近缘物种 FAR 氨基酸序列对比omparison of FAR amino acids sequences between the O. similis and 南方小花蝽 FAR 氨基酸；AsFAR 中黑盲蝽 FAF 氨基酸；EpFAR 白蜡虫 FAR蚜 FAR 氨基酸R is FAR amino acids of O. similis; AsFAR is FAR amino acids of Adelphocoris sutamino acids of Ericerus pela; MpFAR is FAR amino acids of Myzus persica
华中农业大学 2019 届硕士研究生学位论文3.2 基因克隆及 dsRNA 的合成3.2.1 目的基因 PCR 扩增结果利用 Primer Blast 软件设计特异性引物，对 OsFAR 和 AsFAR 进行 PCR 扩增，将 PCR 反应产物以 DL2000 Marker 为对照进行琼脂糖凝胶电泳检测，结果如图 4，扩增产物条带大小与预测大小相符，再结合公司测序结果对比说明成功克隆目标基因，最后通过质粒提取获得含有目标基因质粒。
【参考文献】：
期刊论文
[1]RNAi技术在作物中的应用及安全评价研究[J]. 焦悦,付伟,翟勇. 作物杂志. 2018(01)
[2]转基因作物种植对土壤生态系统影响的研究进展[J]. 梁晋刚,张正光. 作物杂志. 2017(04)
[3]中国转基因棉花研发应用二十年[J]. 郭三堆,王远,孙国清,金石桥,周焘,孟志刚,张锐. 中国农业科学. 2015(17)
[4]转基因棉的应用现状及风险评价综述[J]. 杨晓怀,阮兆英,李永红,陈红娜,汪洪忠. 安徽农学通报. 2015(15)
[5]RNAi生物技术作物环境风险评估研究进展[J]. 何康来,王振营,沈萍. 生物安全学报. 2014(04)
[6]转基因食品安全性评价研究进展[J]. 宋欢,王坤立,许文涛,贺晓云,罗云波,黄昆仑. 食品科学. 2014(15)
[7]转基因棉花的研发现状与发展策略[J]. 刘晨曦,吴孔明. 植物保护. 2011(06)
[8]Risk Assessment and Ecological Effects of Transgenic Bacillus thuringiensis Crops on Non-Target Organisms[J]. Hui-Lin Yu,Yun-He Li and Kong-Ming Wu~* State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests,Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China. Journal of Integrative Plant Biology. 2011(07)
[9]转基因棉花在生产应用上的风险与安全控制[J]. 李秀珍,储甲松,彭华升,何团结. 江西棉花. 2010(04)
[10]绿盲蝽和中黑盲蝽对不同抗性和虫害处理棉花的选择趋性[J]. 吴敌,林凤敏,陆宴辉,刘勇,张永军,吴孔明,郭予元. 昆虫学报. 2010(06)
博士论文
[1]转Bt基因抗虫水稻对褐飞虱主要天敌的潜在风险评价[D]. 韩宇.华中农业大学 2015
[2]南方小花蝽大量繁殖关键技术及其田间释放生态学基础研究[D]. 周兴苗.华中农业大学 2008
[3]RNAi介导的Lcy基因沉默对番茄果实中番茄红素含量的影响[D]. 万群.西南大学 2007
硕士论文
[1]南方小花蝽人工扩繁饲养的研究[D]. 张瑜红.华中农业大学 2015
[2]利用宿主介导RNAi进行蚜虫防治的研究[D]. 唐平华.重庆大学 2012
[3]Maasr1基因RNAi植物表达载体的构建及有效性鉴定[D]. 杨超.华南热带农业大学 2006
[4]转Bt基因棉对棉田非靶标生物及次要害虫的影响研究[D]. 马海芹.南京农业大学 2003
本文编号：3318852
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
种半翅目昆虫FAR基因进化树
24图 2 南方小花蝽与其近缘物种 FAR 氨基酸序列对比omparison of FAR amino acids sequences between the O. similis and 南方小花蝽 FAR 氨基酸；AsFAR 中黑盲蝽 FAF 氨基酸；EpFAR 白蜡虫 FAR蚜 FAR 氨基酸R is FAR amino acids of O. similis; AsFAR is FAR amino acids of Adelphocoris sutamino acids of Ericerus pela; MpFAR is FAR amino acids of Myzus persica
华中农业大学 2019 届硕士研究生学位论文3.2 基因克隆及 dsRNA 的合成3.2.1 目的基因 PCR 扩增结果利用 Primer Blast 软件设计特异性引物，对 OsFAR 和 AsFAR 进行 PCR 扩增，将 PCR 反应产物以 DL2000 Marker 为对照进行琼脂糖凝胶电泳检测，结果如图 4，扩增产物条带大小与预测大小相符，再结合公司测序结果对比说明成功克隆目标基因，最后通过质粒提取获得含有目标基因质粒。
【参考文献】：
期刊论文
[1]RNAi技术在作物中的应用及安全评价研究[J]. 焦悦,付伟,翟勇. 作物杂志. 2018(01)
[2]转基因作物种植对土壤生态系统影响的研究进展[J]. 梁晋刚,张正光. 作物杂志. 2017(04)
[3]中国转基因棉花研发应用二十年[J]. 郭三堆,王远,孙国清,金石桥,周焘,孟志刚,张锐. 中国农业科学. 2015(17)
[4]转基因棉的应用现状及风险评价综述[J]. 杨晓怀,阮兆英,李永红,陈红娜,汪洪忠. 安徽农学通报. 2015(15)
[5]RNAi生物技术作物环境风险评估研究进展[J]. 何康来,王振营,沈萍. 生物安全学报. 2014(04)
[6]转基因食品安全性评价研究进展[J]. 宋欢,王坤立,许文涛,贺晓云,罗云波,黄昆仑. 食品科学. 2014(15)
[7]转基因棉花的研发现状与发展策略[J]. 刘晨曦,吴孔明. 植物保护. 2011(06)
[8]Risk Assessment and Ecological Effects of Transgenic Bacillus thuringiensis Crops on Non-Target Organisms[J]. Hui-Lin Yu,Yun-He Li and Kong-Ming Wu~* State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests,Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China. Journal of Integrative Plant Biology. 2011(07)
[9]转基因棉花在生产应用上的风险与安全控制[J]. 李秀珍,储甲松,彭华升,何团结. 江西棉花. 2010(04)
[10]绿盲蝽和中黑盲蝽对不同抗性和虫害处理棉花的选择趋性[J]. 吴敌,林凤敏,陆宴辉,刘勇,张永军,吴孔明,郭予元. 昆虫学报. 2010(06)
博士论文
[1]转Bt基因抗虫水稻对褐飞虱主要天敌的潜在风险评价[D]. 韩宇.华中农业大学 2015
[2]南方小花蝽大量繁殖关键技术及其田间释放生态学基础研究[D]. 周兴苗.华中农业大学 2008
[3]RNAi介导的Lcy基因沉默对番茄果实中番茄红素含量的影响[D]. 万群.西南大学 2007
硕士论文
[1]南方小花蝽人工扩繁饲养的研究[D]. 张瑜红.华中农业大学 2015
[2]利用宿主介导RNAi进行蚜虫防治的研究[D]. 唐平华.重庆大学 2012
[3]Maasr1基因RNAi植物表达载体的构建及有效性鉴定[D]. 杨超.华南热带农业大学 2006
[4]转Bt基因棉对棉田非靶标生物及次要害虫的影响研究[D]. 马海芹.南京农业大学 2003
本文编号：3318852
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