甘蓝抗枯萎病基因FOC1的功能分析与抗病材料的快速创制

发布时间：2021-08-25 00:43

　　结球甘蓝（Brassica oleracea var.capitata L.）是世界范围内广泛栽培的一种重要的十字花科蔬菜作物。甘蓝枯萎病是一种典型的土传病害,严重影响着甘蓝的产量和品质,并难以通过药剂等措施来防治,培育抗病品种是应对甘蓝枯萎病最为行之有效的方法。本研究采用农杆菌介导转化的方法将甘蓝抗枯萎病基因FOC1导入高感枯萎病的甘蓝自交系材料,以期转化后的感病材料获得枯萎病抗性,验证FOC1基因的抗病功能;利用亚细胞定位实验明确FOC1编码蛋白的性质,并利用生物信息学软件对目的蛋白的组成、结构及可能的生物学功能和参与的生物学途径进行预测分析,为探明抗病基因的抗病机理提供理论依据;综合运用小孢子培养、全基因组背景选择和抗性特异分子标记辅助选择对骨干亲本01-20进行枯萎病抗性转育,以期快速获得优良抗病育种材料。主要研究结果如下:1、通过对本课题11份高感枯萎病甘蓝自交系材料的筛选,其中由XW自交系获得的外植体材料褐化程度最低,分化出芽率最高,是用于遗传转化的优良受体材料。将抗枯萎病基因FOC1通过农杆菌介导法转入甘蓝自交系材料XW,共获得6株阳性植株,对阳性植株进行PCR检测,有4... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

经测序验证序列无误后转入农杆菌菌株EHA105

2103962.5 50 203828225 30 254SiLiuSheng30 20 355Minicole82.5 82.5 06XiaJie97.5 60 107LvQiu92.5 37.5 258CB20137.5 75 5987-53465 25 32.5002-1295 87.5 01XW90 10 45综合种子芽率、外植体褐化情况和外植体分化出芽情况我们发现 11 份材料中，XW 品种蓝材料在播种后 5d 种子出芽整齐且芽率较高，达到 90%；外植体褐化程度低，只有 10%；成苗能力最强，达到 45%。因此，本研究选用 XW 品种的甘蓝自交系材料作为抗枯萎病基C1 转化的受体材料。3.2 转抗枯萎病基因甘蓝植株的获得本研究以高感枯萎病的甘蓝自交系材料 XW 为转化受体通过农杆菌介导转化的方法，共获潮霉素抗性的转基因植株，转化各阶段情况如图 2-2 所示

图 2-3 转化植株的 PCR 检测。左图：引物 FOC1-P 扩增结果；右图：引物 HYG 扩增结果；CK：载体对照；A：转基因植株 A；B：转基因植株 B；C：转基因植株 C；D：转基因植株 D；E：转基因植株 E；F：转基因植


本文编号：3361041