斜纹夜蛾飞行肌蛋白flightin基因的克

发布时间：2021-08-26 23:04

　　斜纹夜蛾Spodoptera litura F.是我国粮、棉、烟草、蔬菜等作物的重要害虫,其成灾因子主要是繁殖力高,爆食性、杂食性,世代重叠以及迁飞性。斜纹夜蛾具远距离迁飞能力,这是其异地爆发成灾的主要原因,也是目前斜纹夜蛾防治的制约因素。本研究旨在通过斜纹夜蛾飞行肌蛋白flightin基因的研究,探索斜纹夜蛾飞行的分子机制,为斜纹夜蛾防治研究提供思路。本研究通过PCR及RACE技术,获得了斜纹夜蛾flightin全长mRNA序列,该序列全长805bp,其开放阅读框（ORF）483bp,可编码一个有160个氨基酸残基的蛋白。斜纹夜蛾flightin与冬尺蠖蛾等鳞翅目昆虫的flightin具有较高的同源性（>75%）,但与鞘翅目,双翅目等昆虫的flightin的同源性较低（<40%）。通过实时荧光定量技术检测了flightin在斜纹夜蛾各个发育阶段的相对表达量,结果显示flightin在斜纹夜蛾中自幼虫至成虫期均有表达,在幼虫期表达量低,蛹期开始激增,在刚羽化成虫中表达量达到了最高值。雌虫flightin相对表达量比雄虫高。进一步检测了flightin在雌雄成虫羽化后0d、1... 

【文章来源】：云南大学云南省 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１斜纹夜蛾（Ｓ＇．?的生活周期??Ｆｉｇ．１．１?Ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?Ｓ．?ｌｉｔｕｒａ??

飞行肌的生理活性，飞行肌是昆虫飞行动力来源，昆虫通过扭曲间接飞行肌??（Ｉｎｄｉｒｅｃｔ?ｆｌｉｇｈｔ?ｍｕｓｃｌｅｓ，ＩＦＭ）产生动力，从而产生翅膀飞行。昆虫的间接飞行肌（ＩＦＭ）??的是一种肌丝状晶格结构（图１．４），飞行肌都由肌细胞组成，肌细胞又称肌原纤维，??在偏光显微镜下可见明暗相间的结构，明带（Ｉ带）与暗带（Ｚ盘）相间构成，相??连薄膜间就是肌节，在电镜下可见肌原纤维由粗肌丝和细肌丝组成［３°］。??１．２．２昆虫肌丝简介??与脊椎动物一样，昆虫的肌肉也是由交互有序重叠的粗肌丝和细肌丝组成，??粗肌丝又称肌球蛋白丝，主要包括肌球蛋白、小幅肌球蛋白、ｆｌｉｇｈｔｉｎ、ｍｙｏｆｉｌｉｎ。??８??

ＤＬ５０００）??通过上述经验证的部分序列设计特异引物（５＇和３＇各两条）进行ＲＡＣＥ扩增。??５＾?ＲＡＣＥ得到两条５００ｂｐ左右条带（图２．２Ａ），?３＇－?ＲＡＣＥ电泳图可见５００ｂｐ和２５０ｂｐ??之间有两个条带（图２．２Ｂ）。??Ｉ—?２５０ｂｐ??（Ａ）?（Ｂ）??图?２．２?５＇－ＲＡＣＥ?（Ａ）、３ｆ－ＲＡＣＥ?（Ｂ）电泳图（图中?Ｍａｋｅｒ?为?ＤＬ５０００）??Ｆｉｇ．?２．２?５’－ＲＡＣＥ?（Ａ）、３’－ＲＡＣＥ?（Ｂ）?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?Ｃｈａｒｔ?（ＤＬ５０００Ｍａｋｅｒ）??测序所得中间段序列和３’端、５’端序列，通过ＤＮＡ?ＭＡＮ进行碱基序列拼接，??拼接所得全长ｍＲＮＡ为８０５ｂｐ，预测斜纹夜蛾ｆｌｉｇｈｔｉｎ开放阅读框（ＯＲＦ）共４８３ｂｐ，??２４??


本文编号：3365131