斑蝥素衍生物对油菜菌核病菌的抑菌机理研究
发布时间：2021-08-28 19:16
核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum（Lib.）de Bary）是一种危害作物的重要真菌,可以侵染很多单子叶和双子叶植物。生产上主要依赖各种化学农药来防治菌核病,但农药的滥用导致核盘菌抗药性增强,农药残留又会对环境造成污染,破坏生态系统,因此开发天然生物农药迫在眉睫。寻找并开发新型先导化合物是研制生物农药的途径之一。实验室前期研究表明,初筛浓度50 mg/L的各卤苯基芳香胺取代去甲斑蝥素系列化合物对核盘菌具有较好的抑制活性。在此基础上,皿内测定了5种卤苯基芳香胺取代去甲斑蝥素（7-0、12-0、15-0、18-0、21-0）对核盘菌的菌丝和菌核的影响,检测了在油菜离体叶片上对菌核病的防效;并通过测定菌丝形态、菌体相对电导率、菌体丙二醛含量、还原糖含量、可溶性蛋白含量、DNA含量、几丁质酶活性及草酸含量等分析斑蝥素衍生物的抑菌机理,为进一步开发和利用生物源杀菌剂提供了理论基础。本研究主要取得以下结果:1、5种斑蝥素衍生物对核盘菌有较好的皿内抑制作用。衍生物7-0、12-0、15-0、18-0、21-0的EC50值分别为37.64、8.78、6.4...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
斑蝥素的结构式
西北农林科技大学硕士学位论文6图1-2去甲斑蝥素（A）和斑蝥酸钠（B）的结构式Fig.1-2Structuresofnorcantharidin(A)andsodiumcantharidate(B)1.2.3斑蝥素的应用斑蝥素在临床中应用已有2000余年，对治疗癌症和一些疑难杂症方面展示出独特的能力，具有发泡、利尿、抗菌等作用（张志勇等1996），斑蝥素具有较强的抗肿瘤活性，能够刺激骨髓产生白细胞，在医学上有很大的研究意义（曾文南等2006）。何太平等（2005）报道斑蝥素能显著抑制抗高转移卵巢癌HO-8910PM细胞的增殖，并呈现一定的剂量效应（P＜0.01），斑蝥素能抑制NF-κB（P65）及Smad3蛋白表达，减少NF-κB（P65）mRNA表达，得出斑蝥素抗HO-8910PM细胞侵袭、转移与抑制NF-κB（P65）、Smad3蛋白及NF-κB（P65）mRNA表达相关；HsiaTC等（2015）表明H460细胞经斑蝥素处理后，1基因下调大于4倍，14个基因下调大于3-4倍，150个基因下调大于2-3倍，这些基因的差异性表达与人肺癌H460细胞的细胞周期进展、DNA损伤和凋亡细胞死亡有关；SunY等（2017）研究表明含血清复合斑蝥素胶囊（CCCs）能激活p38和JNK蛋白激酶通路参与抑制胃癌细胞增殖，促进凋亡，从而显著抑制人胃癌细胞生长。斑蝥素在农业上的应用研究相对于医学上来说要晚的多。在1937年Goernitz发现微克量级的斑蝥素可以杀死模毒蛾（Lymantyiamornachl）、发丽金龟（Phylloperthahorticola）等（王志军2013）；CarrelJE等人（1974）在1974年发现芫菁昆虫在遭到惊乱时，关节处分泌出的斑蝥素能够对蚂蚁产生忌避作用；张志勇（1998）报道了斑蝥素的杀虫活性，对小菜蛾PlutellaxylostellaL.有胃毒、拒食和触杀作用，胃毒致死中量为12.464μg/g体重，拒食中浓度为250.22μmol/L，触杀致死中量为63.85μg/g体重，试虫中毒后活动能力下降，
西北农林科技大学硕士学位论文14图2-15种斑蝥素衍生物对核盘菌的抑制作用Fig.2-1InhibitoryeffectoffivekindsofcantharidinderivativesagainstSclerotiniasclerotiorum表2-2化合物对核盘菌菌丝生长的抑制毒力Table2-2AntifungalvirulenceofcantharidinderivativesagainstmycelialgrowthofSclerotiniasclerotiorum编号DrugNo.毒力回归方程Virulenceregressionequation相关系数R2EC50(μg/mL)95%置信区间95%CI7-0Y=0.5531+2.8223X0.868337.637332.6907-43.332312-0Y=3.8177+1.2533X0.96238.77694.9705-15.498015-0Y=3.9524+1.2945X0.92076.44583.3665-12.341518-0Y=3.7231+1.1734X0.992512.25177.5074-19.994221-0Y=1.8734+1.8364X0.811250.414942.3864-59.96402.3.2斑蝥素衍生物处理菌丝干重的测定斑蝥素衍生物处理核盘菌5d后，菌体的菌丝生长受到明显抑制，5种斑蝥素衍生物对菌丝总干重的作用结果表明（图2-2），12-0、15-0和18-0在12.5μg/mL时即可明显抑制菌丝体干重的增加，而7-0与21-0则在浓度为50μg/mL时才能明显抑制菌丝
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用TRV-HIGS技术鉴定核盘菌致病相关的分泌蛋白基因[J]. 远俊虎,丁一娟,杨文静,闫宝琴,柴亚茹,梅家琴,钱伟. 中国农业科学. 2019(23)
[2]芥菜乙醇提取物对西瓜枯萎病菌的抑菌机制[J]. 刘琳,王强,袁仁文,张蕊,王静,范淑英. 植物保护学报. 2019(04)
[3]油菜与核盘菌互作分子机理研究进展[J]. 吴健,周永明,王幼平. 中国油料作物学报. 2018(05)
[4]核盘菌致病机理研究进展[J]. 羊国根,程家森. 生物技术通报. 2018(04)
[5]几种典型扫描电镜生物样本制备[J]. 胡春辉,徐青,孙璇,于浩,袁玉清. 湖北农业科学. 2016(20)
[6]盾壳霉可湿性粉剂防治油菜菌核病田间药效试验[J]. 孙光忠,刘元明,邓劲松,袁浩. 农药科学与管理. 2015(10)
[7]油菜菌核病研究进展[J]. 汪雷,刘瑶,丁一娟,王雨,万华方,梅家琴,钱伟. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2015(10)
[8]油菜抗菌核病机制研究进展[J]. 李慧,文李,刘凯,官春云. 作物研究. 2015(01)
[9]Ca2+信号通路对本氏烟叶位介导的核盘菌抗性的影响[J]. 吕琳慧,徐幼平,任至玄,康冬,王继鹏,蔡新忠. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2014(06)
[10]草酸对植物体内Ca2+浓度及信号传导途径的影响[J]. 李阳,赵媛,徐幼平,王继鹏,蔡新忠. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2014(02)
硕士论文
[1]极长链霉菌（Streptomyces longissimus）SL01代谢产物及斑蝥素衍生物抑菌活性的研究[D]. 查顺清.西北农林科技大学 2016
[2]白僵菌和绿僵菌对几种植物病原真菌的拮抗作用研究[D]. 夏龙荪.安徽农业大学 2013
[3]斑蝥素及其衍生物杀虫技术研究[D]. 王志军.西北农林科技大学 2013
本文编号：3369093
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
斑蝥素的结构式
西北农林科技大学硕士学位论文6图1-2去甲斑蝥素（A）和斑蝥酸钠（B）的结构式Fig.1-2Structuresofnorcantharidin(A)andsodiumcantharidate(B)1.2.3斑蝥素的应用斑蝥素在临床中应用已有2000余年，对治疗癌症和一些疑难杂症方面展示出独特的能力，具有发泡、利尿、抗菌等作用（张志勇等1996），斑蝥素具有较强的抗肿瘤活性，能够刺激骨髓产生白细胞，在医学上有很大的研究意义（曾文南等2006）。何太平等（2005）报道斑蝥素能显著抑制抗高转移卵巢癌HO-8910PM细胞的增殖，并呈现一定的剂量效应（P＜0.01），斑蝥素能抑制NF-κB（P65）及Smad3蛋白表达，减少NF-κB（P65）mRNA表达，得出斑蝥素抗HO-8910PM细胞侵袭、转移与抑制NF-κB（P65）、Smad3蛋白及NF-κB（P65）mRNA表达相关；HsiaTC等（2015）表明H460细胞经斑蝥素处理后，1基因下调大于4倍，14个基因下调大于3-4倍，150个基因下调大于2-3倍，这些基因的差异性表达与人肺癌H460细胞的细胞周期进展、DNA损伤和凋亡细胞死亡有关；SunY等（2017）研究表明含血清复合斑蝥素胶囊（CCCs）能激活p38和JNK蛋白激酶通路参与抑制胃癌细胞增殖，促进凋亡，从而显著抑制人胃癌细胞生长。斑蝥素在农业上的应用研究相对于医学上来说要晚的多。在1937年Goernitz发现微克量级的斑蝥素可以杀死模毒蛾（Lymantyiamornachl）、发丽金龟（Phylloperthahorticola）等（王志军2013）；CarrelJE等人（1974）在1974年发现芫菁昆虫在遭到惊乱时，关节处分泌出的斑蝥素能够对蚂蚁产生忌避作用；张志勇（1998）报道了斑蝥素的杀虫活性，对小菜蛾PlutellaxylostellaL.有胃毒、拒食和触杀作用，胃毒致死中量为12.464μg/g体重，拒食中浓度为250.22μmol/L，触杀致死中量为63.85μg/g体重，试虫中毒后活动能力下降，
西北农林科技大学硕士学位论文14图2-15种斑蝥素衍生物对核盘菌的抑制作用Fig.2-1InhibitoryeffectoffivekindsofcantharidinderivativesagainstSclerotiniasclerotiorum表2-2化合物对核盘菌菌丝生长的抑制毒力Table2-2AntifungalvirulenceofcantharidinderivativesagainstmycelialgrowthofSclerotiniasclerotiorum编号DrugNo.毒力回归方程Virulenceregressionequation相关系数R2EC50(μg/mL)95%置信区间95%CI7-0Y=0.5531+2.8223X0.868337.637332.6907-43.332312-0Y=3.8177+1.2533X0.96238.77694.9705-15.498015-0Y=3.9524+1.2945X0.92076.44583.3665-12.341518-0Y=3.7231+1.1734X0.992512.25177.5074-19.994221-0Y=1.8734+1.8364X0.811250.414942.3864-59.96402.3.2斑蝥素衍生物处理菌丝干重的测定斑蝥素衍生物处理核盘菌5d后，菌体的菌丝生长受到明显抑制，5种斑蝥素衍生物对菌丝总干重的作用结果表明（图2-2），12-0、15-0和18-0在12.5μg/mL时即可明显抑制菌丝体干重的增加，而7-0与21-0则在浓度为50μg/mL时才能明显抑制菌丝
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用TRV-HIGS技术鉴定核盘菌致病相关的分泌蛋白基因[J]. 远俊虎,丁一娟,杨文静,闫宝琴,柴亚茹,梅家琴,钱伟. 中国农业科学. 2019(23)
[2]芥菜乙醇提取物对西瓜枯萎病菌的抑菌机制[J]. 刘琳,王强,袁仁文,张蕊,王静,范淑英. 植物保护学报. 2019(04)
[3]油菜与核盘菌互作分子机理研究进展[J]. 吴健,周永明,王幼平. 中国油料作物学报. 2018(05)
[4]核盘菌致病机理研究进展[J]. 羊国根,程家森. 生物技术通报. 2018(04)
[5]几种典型扫描电镜生物样本制备[J]. 胡春辉,徐青,孙璇,于浩,袁玉清. 湖北农业科学. 2016(20)
[6]盾壳霉可湿性粉剂防治油菜菌核病田间药效试验[J]. 孙光忠,刘元明,邓劲松,袁浩. 农药科学与管理. 2015(10)
[7]油菜菌核病研究进展[J]. 汪雷,刘瑶,丁一娟,王雨,万华方,梅家琴,钱伟. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2015(10)
[8]油菜抗菌核病机制研究进展[J]. 李慧,文李,刘凯,官春云. 作物研究. 2015(01)
[9]Ca2+信号通路对本氏烟叶位介导的核盘菌抗性的影响[J]. 吕琳慧,徐幼平,任至玄,康冬,王继鹏,蔡新忠. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2014(06)
[10]草酸对植物体内Ca2+浓度及信号传导途径的影响[J]. 李阳,赵媛,徐幼平,王继鹏,蔡新忠. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2014(02)
硕士论文
[1]极长链霉菌（Streptomyces longissimus）SL01代谢产物及斑蝥素衍生物抑菌活性的研究[D]. 查顺清.西北农林科技大学 2016
[2]白僵菌和绿僵菌对几种植物病原真菌的拮抗作用研究[D]. 夏龙荪.安徽农业大学 2013
[3]斑蝥素及其衍生物杀虫技术研究[D]. 王志军.西北农林科技大学 2013
本文编号：3369093
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