防治棉花黄萎病生防菌的筛选及其一个新病原菌的发现
发布时间：2021-10-01 22:28
棉花黄萎病是一种土传病害,在我国主要是由大丽轮枝菌（Verticillium dahliaeKleb.）引起的。病害广泛分布于棉花产区,常造成严重的经济损失,已成为棉花产业发展的主要障碍。大丽轮枝菌在土壤中主要以微菌核形式存在,可在土壤中存活多年,是生产上最难防治的病害之一。棉花生产上迄今缺乏高抗棉花黄萎病的抗病品种,病害防治长期依赖于化学农药。随着人们对化学农药残留对环境和人类负面影响的深入了解,病害的生物防治日益受到重视。因此,本研究试图从土壤中筛选出防治棉花黄萎病的高效生防菌株,通过形态和分子序列鉴定,并测定其防治效果,明确其生物学特性,为生防菌株的应用奠定基础。另外,在分离棉花黄萎病菌的过程中,经常分离到帚霉属的一个真菌。该菌形态学上不属于已知的帚霉属的种类,也不包含在已知棉花内生菌的名单中。为此,通过形态学与分子系统学方法鉴定了该真菌,并测定了其致病力,明确了其与棉花黄萎病病原菌协同致病力作用。1、棉花黄萎病生防菌的筛选1)通过双层平板法初筛获得5个对大丽轮枝菌具有抑制效果的菌株,经进一步琼脂扩散法试验,获得抑制效果最好的1个菌株SX-3。形态学特征结合16S序列分析以及脂肪...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１?ＳＸ－３菌体及芽孢形态
藏号为?ＣＧＭＣＣ?１１６３８。??２３菌株ＳＸ－３生长最适条件??最适温度生长曲线显示（图２．２?Ａ），该菌株在２０－３７°Ｃ下均能生长，最适生长??温度为３７°Ｃ，在１０°Ｃ和４５°Ｃ条件下该菌株不能生长。??最适ｐＨ生长曲线显示（图２．２?Ｂ），只有ｐＨ为７时，菌株可正常生长，ｐＨ＜５??或ｐＨ＞９均抑制了该菌株的繁殖。??ＯＤ６００??１．６?肩?ＯＤ６０Ｃ??１．４?１８?产??？？?■?１０’Ｃ?１．６?Ｚ??！?／?／＂一＂一＾?—?２０．Ｃ?１４?，?＋ＰＨ：３??／?＋３〇ＩＣ?１２?／??／?／?ＵＸ：?１０?；?ＰＨ＝７??０６?！?／?？?４ＳＣ?０８?／?．?ＰＨ＝９??０４?」？?／?■?５５＇Ｃ?０６?／?■?ＰＨ＝１１??：；?ｙ??２?４?６?ｇ?ｌ〇?１２?１４?坩赛的阳】，?０?Ｉ—喜麝—基?▲?基?龜?Ｉ?Ａ?廉?Ｊ＊？ＦＢｊｒ？）／ｈ??０１２３４５６?７８９??Ａ?Ｂ??图２．２菌株ＳＸ－３生长温度、ｐＨ生长曲线。Ａ：温度生长曲线；丨丨生长曲线??Ｆｉｇ．?２．２?Ｇｒｏｗ?ｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＳＸ－３?ｓｔｒａｉｎ．?Ａ：?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；?Ｂ：?（ｉｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ??ｍ??２．４芽孢形成最适条件??２．４．１芽孢形成最适培养基??通过对比不同培养基对多粘类芽孢杆菌ＳＸ－３芽孢形成的影响，结果显承：??在ＮＢ和ＬＢ培养基中，菌体仅进行营养细胞的大量生长，培养２４ｈ后仍无芽孢??形成（图２．３Ａ）。在ＫＢ
?第二章棉花黄萎病拮抗微生物的筛选??后有芽孢形成，但营养细胞较少，且培养液中有大量肉眼可见碎片产生（图２．３?Ｂ）。??虽然在ＮＢ培养基中不能形成芽孢，但在分别添加葡萄糖和蔗糖改良的ＮＢ??培养基中，均有大量芽孢形成，只不过初期芽孢形态有一定差异。添加葡萄糖的??ＮＢＧ与添加蔗糖的ＮＢＳ相比，在培养１８ｈ后，ＮＢＳ中有中生芽孢形成（图２．３Ｃ，??绿色的为芽孢，红色的为营养细胞），ＮＢＧ中仅有端生芽孢形成（细胞一端细胞核??被染成绿色）（图２．３Ｄ），培养２４ｈ后，ＮＢＳ中有大量芽孢和营养细胞，ＮＢＧ中??有大量芽孢，但无营养细胞，仅有大量红色碎片。??此外，在ＤＳＭ培养基中营养细胞生长状况差，但添加葡萄糖和蔗糖改良的??ＤＳＭ培养基中
【参考文献】：
期刊论文
[1]浙江棉花黄萎病菌致病型菌株的鉴定及高温抑制病害的表征分析[J]. 孙晓婷,鹿秀云,张敬泽,祝水金. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2016(06)
[2]棉花黄萎病的发生规律与防治技术探析[J]. 李明桃. 园艺与种苗. 2014(09)
[3]大丽轮枝菌侵染抗感棉种的组织学过程观察[J]. 肖红利,孔志强,包郁明,赵凤轩,柳少燕,李蕾,陈捷胤,戴小枫. 植物病理学报. 2014(03)
[4]我国棉花生产现状与发展趋势[J]. 喻树迅. 中国工程科学. 2013(04)
[5]4种熏蒸剂对土壤微生物特性的影响[J]. 张腾,燕平梅,李园,郭美霞,曹坳程. 中国农学通报. 2013(03)
[6]不同金属离子对丁酸梭状芽孢杆菌Z—10菌体及芽孢的影响[J]. 金华,赵建新,陈卫,杭锋,王婉卿. 食品工业科技. 2009(06)
[7]棉花黄萎病及抗病育种研究进展[J]. 李成伟,丁锦平,刘冬梅,周瑞阳,李付广. 棉花学报. 2008(05)
[8]金属离子浓度对枯草芽孢杆菌芽孢率的影响[J]. 姚露燕,张水华,曹昱,王永华. 现代食品科技. 2008(08)
[9]“根正”防治棉花苗病及黄枯萎病试验报告[J]. 史俊东,杨苏龙,陈艳英,张卫民,石跃进. 中国棉花. 2007(11)
[10]不同灌水方式对棉花黄萎病发病的影响[J]. 张丽萍,李国英,刘政. 石河子大学学报(自然科学版). 2006(02)
博士论文
[1]多粘类芽孢杆菌SQR-21芽孢形成、萌发特征研究[D]. 霍振华.南京农业大学 2010
本文编号：3417453
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１?ＳＸ－３菌体及芽孢形态
藏号为?ＣＧＭＣＣ?１１６３８。??２３菌株ＳＸ－３生长最适条件??最适温度生长曲线显示（图２．２?Ａ），该菌株在２０－３７°Ｃ下均能生长，最适生长??温度为３７°Ｃ，在１０°Ｃ和４５°Ｃ条件下该菌株不能生长。??最适ｐＨ生长曲线显示（图２．２?Ｂ），只有ｐＨ为７时，菌株可正常生长，ｐＨ＜５??或ｐＨ＞９均抑制了该菌株的繁殖。??ＯＤ６００??１．６?肩?ＯＤ６０Ｃ??１．４?１８?产??？？?■?１０’Ｃ?１．６?Ｚ??！?／?／＂一＂一＾?—?２０．Ｃ?１４?，?＋ＰＨ：３??／?＋３〇ＩＣ?１２?／??／?／?ＵＸ：?１０?；?ＰＨ＝７??０６?！?／?？?４ＳＣ?０８?／?．?ＰＨ＝９??０４?」？?／?■?５５＇Ｃ?０６?／?■?ＰＨ＝１１??：；?ｙ??２?４?６?ｇ?ｌ〇?１２?１４?坩赛的阳】，?０?Ｉ—喜麝—基?▲?基?龜?Ｉ?Ａ?廉?Ｊ＊？ＦＢｊｒ？）／ｈ??０１２３４５６?７８９??Ａ?Ｂ??图２．２菌株ＳＸ－３生长温度、ｐＨ生长曲线。Ａ：温度生长曲线；丨丨生长曲线??Ｆｉｇ．?２．２?Ｇｒｏｗ?ｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＳＸ－３?ｓｔｒａｉｎ．?Ａ：?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；?Ｂ：?（ｉｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ??ｍ??２．４芽孢形成最适条件??２．４．１芽孢形成最适培养基??通过对比不同培养基对多粘类芽孢杆菌ＳＸ－３芽孢形成的影响，结果显承：??在ＮＢ和ＬＢ培养基中，菌体仅进行营养细胞的大量生长，培养２４ｈ后仍无芽孢??形成（图２．３Ａ）。在ＫＢ
?第二章棉花黄萎病拮抗微生物的筛选??后有芽孢形成，但营养细胞较少，且培养液中有大量肉眼可见碎片产生（图２．３?Ｂ）。??虽然在ＮＢ培养基中不能形成芽孢，但在分别添加葡萄糖和蔗糖改良的ＮＢ??培养基中，均有大量芽孢形成，只不过初期芽孢形态有一定差异。添加葡萄糖的??ＮＢＧ与添加蔗糖的ＮＢＳ相比，在培养１８ｈ后，ＮＢＳ中有中生芽孢形成（图２．３Ｃ，??绿色的为芽孢，红色的为营养细胞），ＮＢＧ中仅有端生芽孢形成（细胞一端细胞核??被染成绿色）（图２．３Ｄ），培养２４ｈ后，ＮＢＳ中有大量芽孢和营养细胞，ＮＢＧ中??有大量芽孢，但无营养细胞，仅有大量红色碎片。??此外，在ＤＳＭ培养基中营养细胞生长状况差，但添加葡萄糖和蔗糖改良的??ＤＳＭ培养基中
【参考文献】：
期刊论文
[1]浙江棉花黄萎病菌致病型菌株的鉴定及高温抑制病害的表征分析[J]. 孙晓婷,鹿秀云,张敬泽,祝水金. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2016(06)
[2]棉花黄萎病的发生规律与防治技术探析[J]. 李明桃. 园艺与种苗. 2014(09)
[3]大丽轮枝菌侵染抗感棉种的组织学过程观察[J]. 肖红利,孔志强,包郁明,赵凤轩,柳少燕,李蕾,陈捷胤,戴小枫. 植物病理学报. 2014(03)
[4]我国棉花生产现状与发展趋势[J]. 喻树迅. 中国工程科学. 2013(04)
[5]4种熏蒸剂对土壤微生物特性的影响[J]. 张腾,燕平梅,李园,郭美霞,曹坳程. 中国农学通报. 2013(03)
[6]不同金属离子对丁酸梭状芽孢杆菌Z—10菌体及芽孢的影响[J]. 金华,赵建新,陈卫,杭锋,王婉卿. 食品工业科技. 2009(06)
[7]棉花黄萎病及抗病育种研究进展[J]. 李成伟,丁锦平,刘冬梅,周瑞阳,李付广. 棉花学报. 2008(05)
[8]金属离子浓度对枯草芽孢杆菌芽孢率的影响[J]. 姚露燕,张水华,曹昱,王永华. 现代食品科技. 2008(08)
[9]“根正”防治棉花苗病及黄枯萎病试验报告[J]. 史俊东,杨苏龙,陈艳英,张卫民,石跃进. 中国棉花. 2007(11)
[10]不同灌水方式对棉花黄萎病发病的影响[J]. 张丽萍,李国英,刘政. 石河子大学学报(自然科学版). 2006(02)
博士论文
[1]多粘类芽孢杆菌SQR-21芽孢形成、萌发特征研究[D]. 霍振华.南京农业大学 2010
本文编号：3417453
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