肠道细菌对小菜蛾Bt敏感性的影响
发布时间：2021-10-08 14:51
小菜蛾是抗药性极强的世界性害虫,不仅对多种化学杀虫剂产生抗性,也是第一个报道对Bacillus thuringiensis（Bt）产生田间抗性的昆虫,其高抗性给小菜蛾的防治带来了很大的压力。近年来的研究表明一些昆虫的肠道微生物与宿主的Bt抗性有关。我们前期研究已经发现小菜蛾的肠道微生物与宿主的生长发育密切相关,但关于小菜蛾肠道微生物与宿主Bt抗性之间的关系还不清楚。本研究在前期工作的基础上,进一步深入分析肠道微生物介导小菜蛾Bt抗性的效应,为小菜蛾的生物防治提供新的视角和思路。主要研究结果如下:1、肠道细菌介导小菜蛾对Bt敏感性的变化。实验发现,无肠道菌3龄小菜蛾幼虫回复全部肠道细菌（常规饲养小菜蛾肠道内容物经LB培养基富集培养后的混合菌株）能够降低Bt8010的杀虫活性,且单菌株回复结果表明,不同肠道细菌介导小菜蛾Bt敏感性变化的效应不同。粘质沙雷氏菌Serratia marcescens-IAE6（Sm PXG6）与Bt8010菌株共同作用可以提高Bt8010的杀虫速率,其与Bt8010存在协同效应,而肠杆菌Enterobacter sp.IAE5（Eb PXG5）则降低了小菜蛾对...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
防腐剂平板抑菌测试Fig.2-1BacteriostaticeffcetofantisepticondifferentbacteriaA：Bt8010strain；B：肠杆菌Enterobactersp.IAE5；C：肠球菌Enterococcussp.；D：粘质沙雷氏菌Serratiamarcescens-IAE6数字代表防腐剂浓度，由小到大依次为0%、0.025%、0.05%、0.1%、0.2%、0.4%Thenumberrepresentsthepreservativeconcentration,fromsmalltolargeis0%、0.025%、0.05%、
第二章肠道细菌对小菜蛾Bt敏感性的影响效应图2-2小菜蛾肠道菌检测Fig.2-2DetectionofgutbacteriainP.xylostellaA：LB培养基LBmedium；B：M：DNAmarkerDL2000；1：阴性对照Negativecontrol；2：第三次漂洗卵的水Waterforthethirdtimetorinsetheeggs；3：卵研磨液Egggrindingfluid；4：阳性对照Positivecontrol；C：M：DNAmarkerDL10000；1-3：SLss肠道内容物SLssgutcontents；4：FZss肠道内容物FZssgutcontents2.3.3肠道富集菌群及单一EbPXG5菌株降低小菜蛾的Bt敏感性与取食无菌饲料的对照相比，取食含全部肠道细菌Gutbacteria（常规饲养小菜蛾肠道内容物经LB培养基富集培养后的混合菌株）和含EbPXG5菌株的饲料对小菜蛾幼虫存活率没有影响（表2-1），且取食含Bt8010+EbPXG5菌株和含Bt8010+全部肠道细菌（Bt8010+Gutbacteria）饲料的小菜蛾幼虫在24h、36h、48h和60h四个检测点的存活率显著高于单一取食含Bt8010菌株饲料的小菜蛾（表2-1），肠道细菌延长了小菜蛾幼虫的生存时间。有意思地是，取食含Bt8010+EbPXG5饲料的小菜蛾幼虫在36h、60h和72h三个检测点的存活率分别为90%、25%和18%，均高于取食含Bt8010+Gutbacteria饲料的小菜蛾幼虫同时刻监测点的存活率82%、13%和3%（表2-1），回复单一肠道细菌EbPXG5的效果比回复全部肠道细菌的效果好，表明小菜蛾肠道细菌EbPXG5菌株在影响宿主Bt敏感性的过程中发挥重要作用。18
肠道细菌对小菜蛾Bt敏感性的影响2.3.7肠道细菌对Bt8010的体外抑制效应利用牛津杯实验分析发现，除阳性对照Kna外，其余样品处理均未见抑菌圈，实验所用24株肠道细菌包括EbPXG5菌株（图2-7A）对Bt8010菌株的生长均无抑制作用。图2-7小菜蛾肠道细菌对Bt8010菌株的对抗培养分析Fig.2-7AnalysisontheresistanceofP.xylostellagutbacteriatoBt8010strainA：1：CK（Kna）；2：SmPXG6；3：EbPXG5；4：Cedeceasp.；5：Pseudomonasfulva；6：Lysinibacillusmacroides；7：Enterococcussp.B：1：CK（Kna）；2：Corynebacteriumpollutisoli；3：Enterobactergallinarum；4：Corynebacteriumxerosis；5：Kocuriapalustris；6：Carnobacteriummaltaromaticum；7：MicrobacteriumarborescensC：1：CK（Kna）；2：Pantoeaagglomerans；3：Enterobacteraerogenes；4：Raoultellaornithinolytica；5：Enterobactercancerogenus；6：Arthrobactersp.；7：EnterobacterasburiaeD：1：CK（Kna）；2：Brachybacteriumsp.；3：Staphylococcussp.；4：Carnobacteriumgallinarum；5：Enterobactersoli；6：Enterobacterludwigii；7：Lysinibacillussp.23
【参考文献】：
期刊论文
[1]白蚁肠道共生微生物的作用:酵母,一个“隐身”的特别菌群（英文）[J]. Sameh Samir Ali,Rania Al-Tohamy,孙建中,吴建,黄淼. 微生物学报. 2018(06)
[2]抗生素和肠道细菌对小菜蛾适合度的影响[J]. 沈金红,王倩,夏晓峰,尤民生. 微生物学报. 2018(06)
[3]斜纹夜蛾幼虫肠道细菌分离鉴定及其功能初步分析[J]. 孙博通,蓝波妙,王倩,夏晓峰,尤民生. 生物资源. 2017(04)
[4]苏云金芽胞杆菌V4菌株cry杀虫基因的鉴定、表达及杀虫活性分析[J]. 何宝楠,李海涛,刘荣梅,王博,高继国. 生物技术通报. 2014(09)
[5]小菜蛾幼虫中肠细菌的分离鉴定[J]. 夏晓峰,郑丹丹,林海兰,尤民生. 应用昆虫学报. 2013(03)
[6]电转化法将luxAB基因导入毒死蜱降解菌β菌株的研究[J]. 王昀璐,花日茂,唐欣昀,李瑞雪,张君,王道胜. 环境科学学报. 2011(01)
[7]苏云金芽孢杆菌杀虫机理及害虫对其抗性机制的研究进展[J]. 李怡萍,梁革梅,仵均祥,陈豪,马康生,吴孔明,郭予元. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2010(09)
[8]几种蜡样芽胞杆菌群微生物的选择性培养基比较[J]. 周帼萍,胡晓敏,窦建琳,袁志明. 武汉工业学院学报. 2009(04)
[9]昆虫对Bt杀虫蛋白的抗性机制及治理策略[J]. 徐艳聆,王振营,何康来,白树雄. 植物保护学报. 2006(04)
[10]转Bt基因玉米对亚洲玉米螟的抗性评价[J]. 何康来,王振营,文丽萍,白树雄,周大荣. 中国农学通报. 2004(06)
博士论文
[1]小菜蛾中肠微生物多样性及其功能研究[D]. 夏晓峰.福建农林大学 2014
[2]苏云金杆菌Cry毒素对褐飞虱无毒原因分析及对褐飞虱有效新型Bt Cry毒素的改造[D]. 邵恩斯.福建农林大学 2013
硕士论文
[1]小菜蛾肠道细菌的来源及传播途径[D]. 艾倩倩.福建农林大学 2018
[2]小菜蛾肠道菌群对宿主生长发育的影响[D]. 林美玲.福建农林大学 2014
本文编号：3424383
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
防腐剂平板抑菌测试Fig.2-1BacteriostaticeffcetofantisepticondifferentbacteriaA：Bt8010strain；B：肠杆菌Enterobactersp.IAE5；C：肠球菌Enterococcussp.；D：粘质沙雷氏菌Serratiamarcescens-IAE6数字代表防腐剂浓度，由小到大依次为0%、0.025%、0.05%、0.1%、0.2%、0.4%Thenumberrepresentsthepreservativeconcentration,fromsmalltolargeis0%、0.025%、0.05%、
第二章肠道细菌对小菜蛾Bt敏感性的影响效应图2-2小菜蛾肠道菌检测Fig.2-2DetectionofgutbacteriainP.xylostellaA：LB培养基LBmedium；B：M：DNAmarkerDL2000；1：阴性对照Negativecontrol；2：第三次漂洗卵的水Waterforthethirdtimetorinsetheeggs；3：卵研磨液Egggrindingfluid；4：阳性对照Positivecontrol；C：M：DNAmarkerDL10000；1-3：SLss肠道内容物SLssgutcontents；4：FZss肠道内容物FZssgutcontents2.3.3肠道富集菌群及单一EbPXG5菌株降低小菜蛾的Bt敏感性与取食无菌饲料的对照相比，取食含全部肠道细菌Gutbacteria（常规饲养小菜蛾肠道内容物经LB培养基富集培养后的混合菌株）和含EbPXG5菌株的饲料对小菜蛾幼虫存活率没有影响（表2-1），且取食含Bt8010+EbPXG5菌株和含Bt8010+全部肠道细菌（Bt8010+Gutbacteria）饲料的小菜蛾幼虫在24h、36h、48h和60h四个检测点的存活率显著高于单一取食含Bt8010菌株饲料的小菜蛾（表2-1），肠道细菌延长了小菜蛾幼虫的生存时间。有意思地是，取食含Bt8010+EbPXG5饲料的小菜蛾幼虫在36h、60h和72h三个检测点的存活率分别为90%、25%和18%，均高于取食含Bt8010+Gutbacteria饲料的小菜蛾幼虫同时刻监测点的存活率82%、13%和3%（表2-1），回复单一肠道细菌EbPXG5的效果比回复全部肠道细菌的效果好，表明小菜蛾肠道细菌EbPXG5菌株在影响宿主Bt敏感性的过程中发挥重要作用。18
肠道细菌对小菜蛾Bt敏感性的影响2.3.7肠道细菌对Bt8010的体外抑制效应利用牛津杯实验分析发现，除阳性对照Kna外，其余样品处理均未见抑菌圈，实验所用24株肠道细菌包括EbPXG5菌株（图2-7A）对Bt8010菌株的生长均无抑制作用。图2-7小菜蛾肠道细菌对Bt8010菌株的对抗培养分析Fig.2-7AnalysisontheresistanceofP.xylostellagutbacteriatoBt8010strainA：1：CK（Kna）；2：SmPXG6；3：EbPXG5；4：Cedeceasp.；5：Pseudomonasfulva；6：Lysinibacillusmacroides；7：Enterococcussp.B：1：CK（Kna）；2：Corynebacteriumpollutisoli；3：Enterobactergallinarum；4：Corynebacteriumxerosis；5：Kocuriapalustris；6：Carnobacteriummaltaromaticum；7：MicrobacteriumarborescensC：1：CK（Kna）；2：Pantoeaagglomerans；3：Enterobacteraerogenes；4：Raoultellaornithinolytica；5：Enterobactercancerogenus；6：Arthrobactersp.；7：EnterobacterasburiaeD：1：CK（Kna）；2：Brachybacteriumsp.；3：Staphylococcussp.；4：Carnobacteriumgallinarum；5：Enterobactersoli；6：Enterobacterludwigii；7：Lysinibacillussp.23
【参考文献】：
期刊论文
[1]白蚁肠道共生微生物的作用:酵母,一个“隐身”的特别菌群（英文）[J]. Sameh Samir Ali,Rania Al-Tohamy,孙建中,吴建,黄淼. 微生物学报. 2018(06)
[2]抗生素和肠道细菌对小菜蛾适合度的影响[J]. 沈金红,王倩,夏晓峰,尤民生. 微生物学报. 2018(06)
[3]斜纹夜蛾幼虫肠道细菌分离鉴定及其功能初步分析[J]. 孙博通,蓝波妙,王倩,夏晓峰,尤民生. 生物资源. 2017(04)
[4]苏云金芽胞杆菌V4菌株cry杀虫基因的鉴定、表达及杀虫活性分析[J]. 何宝楠,李海涛,刘荣梅,王博,高继国. 生物技术通报. 2014(09)
[5]小菜蛾幼虫中肠细菌的分离鉴定[J]. 夏晓峰,郑丹丹,林海兰,尤民生. 应用昆虫学报. 2013(03)
[6]电转化法将luxAB基因导入毒死蜱降解菌β菌株的研究[J]. 王昀璐,花日茂,唐欣昀,李瑞雪,张君,王道胜. 环境科学学报. 2011(01)
[7]苏云金芽孢杆菌杀虫机理及害虫对其抗性机制的研究进展[J]. 李怡萍,梁革梅,仵均祥,陈豪,马康生,吴孔明,郭予元. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2010(09)
[8]几种蜡样芽胞杆菌群微生物的选择性培养基比较[J]. 周帼萍,胡晓敏,窦建琳,袁志明. 武汉工业学院学报. 2009(04)
[9]昆虫对Bt杀虫蛋白的抗性机制及治理策略[J]. 徐艳聆,王振营,何康来,白树雄. 植物保护学报. 2006(04)
[10]转Bt基因玉米对亚洲玉米螟的抗性评价[J]. 何康来,王振营,文丽萍,白树雄,周大荣. 中国农学通报. 2004(06)
博士论文
[1]小菜蛾中肠微生物多样性及其功能研究[D]. 夏晓峰.福建农林大学 2014
[2]苏云金杆菌Cry毒素对褐飞虱无毒原因分析及对褐飞虱有效新型Bt Cry毒素的改造[D]. 邵恩斯.福建农林大学 2013
硕士论文
[1]小菜蛾肠道细菌的来源及传播途径[D]. 艾倩倩.福建农林大学 2018
[2]小菜蛾肠道菌群对宿主生长发育的影响[D]. 林美玲.福建农林大学 2014
本文编号：3424383
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