FRG3在抗番茄枯萎病过程中的功能研究以及番茄枯萎病病原菌的快速检测
发布时间：2021-10-12 11:17
尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporum）是一类既可以侵染宿主植物又可以在土壤内生存的兼性寄生真菌,存在种下分化,具有多种专化型。尖孢镰)刀菌的寄主范围非常广泛,可引起茄科、豆科、瓜类等100多种植物枯萎病的发生。尖孢镰刀菌番茄专化型（Fusarium oxysporf.sp.Lycopersici,FOL,FGSC 9935）导致的番茄枯萎病给全球农业生产造成巨大的经济损失。目前对于番茄抗枯萎病的研究主要集中在抗性品种的培育等方面,从寄主抗性相关基因的功能方面的探索番茄抗尖孢镰刀菌分子机理的研究还处于初期阶段。1 FRG3在抗番茄枯萎病过程中的功能研究NBS-LRR（Nucleotide-binding site-Leucine-reach repeats）类蛋白是植物抗性基因（R）编码的R蛋白,是植物机体内数量最多的一类R蛋白家族。本论文以NBS-LRR类抗性基因FRG3为研究对象,分析其在抗番茄枯萎病过程中的功能。（1）本研究利用番茄枯萎病病原菌尖孢镰刀菌番茄专化型（FOL）,对具有相似遗传背景的番茄抗病品系Motelle（Mot）和感病品系Moneymaker（MM）进行...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１：植物与病原菌互作模式［３２］??
提取根部总ＲＮＡ，对ｓｌｍｉＲ４８２家族的七个成员进行ｍｉＲＮＡＮｏｒｔｈｅｍ?Ｂｌｏｔ分析。ｓＲＮＡ??ＮｏｒｔｈｅｍＢｌｏｔ结果显示，ＦＯＬ侵染后，ｓｌｍｉＲ４８２家族的七个成员在两个番茄品种中都存在??差异表达，这与之前的ｓＲＮＡ－ｓｅｑ结果不同（图２－１Ａ）。在ＦＯＬ侵染条件下，ｓｌｍｉＲ４８２ａ，??ｓｌｍｉＲ４８２ｃ?和?ｓｌｍｉＲ４８２ｅ－５ｐ?在?ＭＭ?和?Ｍｏｔ?中均是下调表达；ｓｌｍｉＲ４８２ｂ，?ｓｌｍｉＲ４８２ｄ－３ｐ?和??ｓｌｍｉＲ４８２ｅ－３ｐ在Ｍｏｔ中下调表达，在ＭＭ中上调表达。然而，ｓＩｍｉＲ４８２ｄ－５ｐ呈现出的趋势??是，在ＦＯＬ侵染后，在ＭＭ中下调表达，在Ｍｏｔ中上调表达（图２－１Ｂ）。这些数据结果??表明，ｓＩｍｉＲ４８２家族成员在防御番煎枯萎病过程中起着不同的作用。??基于ｓＲＮＡ－ｓｅｑ和ｓＲＮＡＮｏｒｔｈｅｒｎ?Ｂｌｏｔ的结果分析，确定的是在病原菌ＦＯＬ侵染后，??
ｓｌｍｉＲ４８２家族的每个成员，都预测到了几个靶基因。有趣的是，Ｓ〇ｌｙｃｌ２ｇ０９９０６０是??ｓｌｍｉＲ４８２ｄ－３ｐ和ｓｌｍｉＲ４８２ｅ－３ｐ的共同预测到的一个靶基因，但在结合位点上存在２－ｎｔ的位??移（图２－２Ａ）。通过对蛋白结构域的分析表明，Ｓｏｌｙｃｌ２ｇ０９９０６０蛋白是由６９９－ｎｔ组成，一??个含有卷曲螺旋（ＣＣ）和Ｐ环结构域的２３３氨基酸的ＮＢＳ类抗性蛋白。并且预测到这两??个ｍｉＲＮＡ的靶向位点在Ｐ环结构域上（图２－２Ｂ）。??ｓｌｍｉＲ４８２ｆ?－?ＣＣＡＵＡＣＣＣＵＣＣＵＣＡＱＣＣＵＵＵＣＵ?－５＾?２２??ＦＲＧ３?５ｆ－?ＧＧＴＡＴＧＧＧＡＧＧＡＴＴＡＧＧＣＡＡＡＡ?－３，?２２??－ｋ－ｋ＇ｋ－ｋ＇ｋ＇ｋ－ｋ－ｋ＇ｋ－ｋ－ｋ－ｋ?＊?＊?＊?＊?￣ｋ?－ｋ?－ｋ??Ｅ??Ｉ??０?〇?２??ＦＲＧ３?—?＝｜?１?■??ｉ?：＿：．ｉ．．．．．．．．??ｉ?１?１?１??１?５０?１００?１５０?２００?２３３?ａａ??图２－２ｓｌｍｉＲＮＡ靶基因预测和蛋白质结构域分析。??Ａ：?ｍＲＮＡ靶序列和觀向位点的预测；红色表示ｍＲＮＡ与相应的ｍｉＲＮＡ的碱基错配；Ｂ：蛋白结构域??的预测；红色箭头表示ｍｉＲＮＡ在Ｐ环区域的结合位点??为了阐明／２家族和Ｓｏｌｙｃｌ２ｇ０９９０６０之间的遗传同源性，从己知的醋栗番茄的显性基??因１２基因座中分离出６个同源物刚，包括仏／２Ｃ－７，?／２Ｃ－２，?／２Ｃ－３，?／２Ｃ４和７２匸－５［４０］和??本课题组之前报道的４个ＮＢＳ－ＬＲＲ抗性基因Ｓｏｌｙｃ０８ｇ０７５６３０
【参考文献】：
期刊论文
[1]论四种番茄病害防治方法[J]. 苏春华. 农民致富之友. 2017(06)
[2]小小番茄功效大[J]. 王延群. 食品与健康. 2016 (07)
[3]番茄的药用价值和食用价值[J]. 北方园艺. 2016(05)
[4]酱用番茄三种主要病害及其防治[J]. 陈远灶. 农村科技. 2016(01)
[5]植物与尖孢镰刀菌的互作机制研究现状[J]. 梁丽琴,李健强,杨宇红,凌键,谢丙炎. 中国农学通报. 2014(21)
[6]miR482介导的植物生物胁迫响应[J]. 肖裕,栾雨时. 植物生理学报. 2014(06)
[7]中国不同地理来源稻曲病菌rDNA-IGS的初步分析[J]. 王永强,樊荣辉,刘兵,李绍慧,郑大伟,张敬泽,胡东维. 植物病理学报. 2010(02)
[8]番茄显性复花序性状的遗传分析[J]. 欧阳主才,周满生,乐素菊,林明宝,汪国平,方青. 安徽农业科学. 2008(06)
[9]充分发挥我国番茄加工的资源优势 促进番茄加工行业的健康发展[J]. 庾莉萍. 中国农业信息. 2007(08)
[10]新疆加工番茄产业现状及发展前景[J]. 庞胜群,王祯丽,张润,崔金霞. 中国蔬菜. 2005(02)
博士论文
[1]番茄基因组多样性和演化的遗传学基础[D]. 林涛.中国农业大学 2016
[2]番茄抗晚疫病基因Ph-3的克隆及其效应子的筛选[D]. 张春芝.中国农业科学院 2014
[3]作物枯萎病生防细菌的研究[D]. 郝晓娟.浙江大学 2006
本文编号：3432474
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１：植物与病原菌互作模式［３２］??
提取根部总ＲＮＡ，对ｓｌｍｉＲ４８２家族的七个成员进行ｍｉＲＮＡＮｏｒｔｈｅｍ?Ｂｌｏｔ分析。ｓＲＮＡ??ＮｏｒｔｈｅｍＢｌｏｔ结果显示，ＦＯＬ侵染后，ｓｌｍｉＲ４８２家族的七个成员在两个番茄品种中都存在??差异表达，这与之前的ｓＲＮＡ－ｓｅｑ结果不同（图２－１Ａ）。在ＦＯＬ侵染条件下，ｓｌｍｉＲ４８２ａ，??ｓｌｍｉＲ４８２ｃ?和?ｓｌｍｉＲ４８２ｅ－５ｐ?在?ＭＭ?和?Ｍｏｔ?中均是下调表达；ｓｌｍｉＲ４８２ｂ，?ｓｌｍｉＲ４８２ｄ－３ｐ?和??ｓｌｍｉＲ４８２ｅ－３ｐ在Ｍｏｔ中下调表达，在ＭＭ中上调表达。然而，ｓＩｍｉＲ４８２ｄ－５ｐ呈现出的趋势??是，在ＦＯＬ侵染后，在ＭＭ中下调表达，在Ｍｏｔ中上调表达（图２－１Ｂ）。这些数据结果??表明，ｓＩｍｉＲ４８２家族成员在防御番煎枯萎病过程中起着不同的作用。??基于ｓＲＮＡ－ｓｅｑ和ｓＲＮＡＮｏｒｔｈｅｒｎ?Ｂｌｏｔ的结果分析，确定的是在病原菌ＦＯＬ侵染后，??
ｓｌｍｉＲ４８２家族的每个成员，都预测到了几个靶基因。有趣的是，Ｓ〇ｌｙｃｌ２ｇ０９９０６０是??ｓｌｍｉＲ４８２ｄ－３ｐ和ｓｌｍｉＲ４８２ｅ－３ｐ的共同预测到的一个靶基因，但在结合位点上存在２－ｎｔ的位??移（图２－２Ａ）。通过对蛋白结构域的分析表明，Ｓｏｌｙｃｌ２ｇ０９９０６０蛋白是由６９９－ｎｔ组成，一??个含有卷曲螺旋（ＣＣ）和Ｐ环结构域的２３３氨基酸的ＮＢＳ类抗性蛋白。并且预测到这两??个ｍｉＲＮＡ的靶向位点在Ｐ环结构域上（图２－２Ｂ）。??ｓｌｍｉＲ４８２ｆ?－?ＣＣＡＵＡＣＣＣＵＣＣＵＣＡＱＣＣＵＵＵＣＵ?－５＾?２２??ＦＲＧ３?５ｆ－?ＧＧＴＡＴＧＧＧＡＧＧＡＴＴＡＧＧＣＡＡＡＡ?－３，?２２??－ｋ－ｋ＇ｋ－ｋ＇ｋ＇ｋ－ｋ－ｋ＇ｋ－ｋ－ｋ－ｋ?＊?＊?＊?＊?￣ｋ?－ｋ?－ｋ??Ｅ??Ｉ??０?〇?２??ＦＲＧ３?—?＝｜?１?■??ｉ?：＿：．ｉ．．．．．．．．??ｉ?１?１?１??１?５０?１００?１５０?２００?２３３?ａａ??图２－２ｓｌｍｉＲＮＡ靶基因预测和蛋白质结构域分析。??Ａ：?ｍＲＮＡ靶序列和觀向位点的预测；红色表示ｍＲＮＡ与相应的ｍｉＲＮＡ的碱基错配；Ｂ：蛋白结构域??的预测；红色箭头表示ｍｉＲＮＡ在Ｐ环区域的结合位点??为了阐明／２家族和Ｓｏｌｙｃｌ２ｇ０９９０６０之间的遗传同源性，从己知的醋栗番茄的显性基??因１２基因座中分离出６个同源物刚，包括仏／２Ｃ－７，?／２Ｃ－２，?／２Ｃ－３，?／２Ｃ４和７２匸－５［４０］和??本课题组之前报道的４个ＮＢＳ－ＬＲＲ抗性基因Ｓｏｌｙｃ０８ｇ０７５６３０
【参考文献】：
期刊论文
[1]论四种番茄病害防治方法[J]. 苏春华. 农民致富之友. 2017(06)
[2]小小番茄功效大[J]. 王延群. 食品与健康. 2016 (07)
[3]番茄的药用价值和食用价值[J]. 北方园艺. 2016(05)
[4]酱用番茄三种主要病害及其防治[J]. 陈远灶. 农村科技. 2016(01)
[5]植物与尖孢镰刀菌的互作机制研究现状[J]. 梁丽琴,李健强,杨宇红,凌键,谢丙炎. 中国农学通报. 2014(21)
[6]miR482介导的植物生物胁迫响应[J]. 肖裕,栾雨时. 植物生理学报. 2014(06)
[7]中国不同地理来源稻曲病菌rDNA-IGS的初步分析[J]. 王永强,樊荣辉,刘兵,李绍慧,郑大伟,张敬泽,胡东维. 植物病理学报. 2010(02)
[8]番茄显性复花序性状的遗传分析[J]. 欧阳主才,周满生,乐素菊,林明宝,汪国平,方青. 安徽农业科学. 2008(06)
[9]充分发挥我国番茄加工的资源优势 促进番茄加工行业的健康发展[J]. 庾莉萍. 中国农业信息. 2007(08)
[10]新疆加工番茄产业现状及发展前景[J]. 庞胜群,王祯丽,张润,崔金霞. 中国蔬菜. 2005(02)
博士论文
[1]番茄基因组多样性和演化的遗传学基础[D]. 林涛.中国农业大学 2016
[2]番茄抗晚疫病基因Ph-3的克隆及其效应子的筛选[D]. 张春芝.中国农业科学院 2014
[3]作物枯萎病生防细菌的研究[D]. 郝晓娟.浙江大学 2006
本文编号：3432474
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