带毒灰飞虱唾液腺差异表达蛋白在介体传毒中的功能研究
发布时间：2021-10-15 03:33
灰飞虱Laodelphax striatelus,属于半翅目飞虱科,是水稻条纹病毒（Rice stripe virus,RSV）的主要传播媒介。RSV是纤细病毒属的代表成员,主要由灰飞虱以循回增殖的方式进行传播。RSV在灰飞虱体内增殖后,必须跨越唾液腺屏障,在介体取食时随分泌的唾液传播至健康植株。然而RSV克服唾液腺屏障的机制尚不明确。前期研究发现了 6个在带毒灰飞虱唾液腺中上调表达的蛋白:α-亚基-ATP合酶ATP synthase subunit alpha（LsATP）、线粒体内膜移位酶 Mitochondrial import inner membrane translocase（LsMIT）、苹果酸脱氢酶 NADP-dependent malic enzyme（LsNADP）、微管蛋白-α-2 Tubulin alpha-2（LsTUB）、泛素-60s 核糖体 L40 前体 Ubiquitin-60S ribosomal protein L40 precursor（LsUBI）以及电压依赖型阴离子通道蛋白 Voltage-dependent anion-selective c...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３水稻呼肠孤病毒在介体内的侵染路径［１９］??
２结果与分析??２．１灰飞虱各组织解剖示意图??利用显微镊在电子显微镜下解剖灰飞虱的唾液腺、中肠、卵巢、血淋巴，如图３－１。??唾液腺是昆虫消化系统的重要组成部分，由主唾液腺和副唾液腺组成，在显微镜下的形态??是一团类似于葡萄球的白色多细胞腺体（图３－１Ａ）。而消化道是由食道、前憩室、中肠和??后肠构成，中肠和后肠的交界处着生有马氏管（图３－１Ｂ）。卵巢是雌性生殖系统，由卵巢??管和侧输卵管构成的（图３－１Ｃ）。，血淋巴是昆虫免疫系统的重要组织，是昆虫体内免疫防??御及物质代谢的重要场所。本实验通过切除灰飞虱后足，挤压腹部的血淋巴，使其溶于生??理盐水并用毛细管吸至１．５?ｍＬ离心管中，短暂离心后取上清液，得到灰飞虱的血淋巴（图??３－１Ｄ）。??图３－１灰飞虱各组织显微观察??Ａ唾液腺解剖图示；Ｂ中肠解剖图示；Ｃ卵巢解剖图示；Ｄ血淋巴解剖图示??
ｋＪＴ／Ｓ的相对表达量（以唾液腺为对照）分别为３．２８５±０．０４７、３．５２９±０．０６８，显著高于唾液??腺（１．００３±０．０５５）和血淋巴（２．５９１±０．１５０）中的相对表达量（Ｆ＝１５９．９，?ｄＰ３，ｌｌ，Ｐ＝０．０００１）。??血淋巴中ｈＪＩ／５基因的相对表达量较唾液腺提高了?１５８．３％?（图３－２Ａ）。灰飞虱体内ＬｓＣ／５／??基因在中肠和卵巢中的相对表达量显著高于唾液腺和血淋巴中该基因的相对表达量，分别??是唾液腺的３．７和３．４倍。血淋巴中靶标基因的相对表达量是唾液腺的２．７倍，且与??唾液腺有显著差异（图３－２Ｂ）。而灰飞虱中肠和卵巢中两个靶标基因的相对表达量均无显??著差异。该结果表明在灰飞虱初羽化雌成虫唾液腺中和基因含量较少。??＂Ｉｎ?ＩＩＩ??〇．〇?—???：＿：??＾?ｍｌｌｉＳＳ?——??ｓａｌｉｖａｒｙ?ｇｌａｎｄ?ｍｉｄｇｕｔ?ｏｖａｒｉａｎ?ｉｉｅｉｎｏｌｙｎｉｐｈ??Ｂ?４Ｓ?”??ｔＥ：?「１?＿?＊??Ｓ?ｍｍ??Ｉ２＇０＇?■?ｐｉ?Ｉ??：ｒ１?＿?Ｉｆ??０．０???——Ｌ?—??」?＾??ｓａｌｉｖａｒｙ?ｇｌａｎｄ?ｍｉｄｇｕｔ?ｏｖａｒｉａｎ?ｈｃｍｏｌｙｍｐｈ??图３－２Ｌｓ２Ｔ／５?（Ａ）、（Ｂ）在灰飞虱各组织中的相对表达量??Ａｈ７Ｉ／５在带毒灰飞虱唾液腺、中肠、卵巢和血淋巴中的相对表达量；Ｂｈｔ／Ｂ／在带??毒灰飞虱唾液腺、中肠、卵巢和血淋巴中的相对表达量??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Genetic variability and evolution of rice stripe virus[J]. Ling-zhe HUANG,Li-xia RAO,Xue-ping ZHOU,Jian-xiang WU. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2013(10)
[2]中国水稻条纹叶枯病研究进展[J]. 周益军,李硕,程兆榜,周彤,范永坚. 江苏农业学报. 2012(05)
[3]苹果酸脱氢酶的结构及功能[J]. 汪新颖,王波,侯松涛,朱国萍. 生物学杂志. 2009(04)
[4]Suppressor of RNA silencing encoded by Rice gall dwarf virus genome segment 11[J]. LIU FuXiu1,2,ZHAO Qin1,RUAN XiaoLei1,HE YunWei1 & LI HuaPing1 1Laboratory of Plant Virology,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China;2Post-Entry Quarantine Station for Tropical Plant,Hainan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Haikou 570206,China. Chinese Science Bulletin. 2008(03)
[5]超量表达苹果酸脱氢酶基因提高苜蓿对铝毒的耐受性[J]. 罗小英,崔衍波,邓伟,李德谋,裴炎. 分子植物育种. 2004(05)
[6]水稻条纹叶枯病的研究 Ⅱ.病害的分布和损失[J]. 林奇英,谢联辉,周仲驹,谢莉妍,吴祖建. 福建农学院学报. 1990(04)
[7]江南稻区新发生的几种稻病[J]. 朱凤美,肖庆璞,王法明,陈毓苓. 植物保护. 1964(03)
硕士论文
[1]带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异表达蛋白对介体取食行为和传毒率的影响[D]. 黄丽君.扬州大学 2016
[2]灰飞虱唾液腺中与水稻条纹叶枯病毒（RSV）传播相关蛋白的研究[D]. 陈艳.扬州大学 2015
本文编号：3437348
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３水稻呼肠孤病毒在介体内的侵染路径［１９］??
２结果与分析??２．１灰飞虱各组织解剖示意图??利用显微镊在电子显微镜下解剖灰飞虱的唾液腺、中肠、卵巢、血淋巴，如图３－１。??唾液腺是昆虫消化系统的重要组成部分，由主唾液腺和副唾液腺组成，在显微镜下的形态??是一团类似于葡萄球的白色多细胞腺体（图３－１Ａ）。而消化道是由食道、前憩室、中肠和??后肠构成，中肠和后肠的交界处着生有马氏管（图３－１Ｂ）。卵巢是雌性生殖系统，由卵巢??管和侧输卵管构成的（图３－１Ｃ）。，血淋巴是昆虫免疫系统的重要组织，是昆虫体内免疫防??御及物质代谢的重要场所。本实验通过切除灰飞虱后足，挤压腹部的血淋巴，使其溶于生??理盐水并用毛细管吸至１．５?ｍＬ离心管中，短暂离心后取上清液，得到灰飞虱的血淋巴（图??３－１Ｄ）。??图３－１灰飞虱各组织显微观察??Ａ唾液腺解剖图示；Ｂ中肠解剖图示；Ｃ卵巢解剖图示；Ｄ血淋巴解剖图示??
ｋＪＴ／Ｓ的相对表达量（以唾液腺为对照）分别为３．２８５±０．０４７、３．５２９±０．０６８，显著高于唾液??腺（１．００３±０．０５５）和血淋巴（２．５９１±０．１５０）中的相对表达量（Ｆ＝１５９．９，?ｄＰ３，ｌｌ，Ｐ＝０．０００１）。??血淋巴中ｈＪＩ／５基因的相对表达量较唾液腺提高了?１５８．３％?（图３－２Ａ）。灰飞虱体内ＬｓＣ／５／??基因在中肠和卵巢中的相对表达量显著高于唾液腺和血淋巴中该基因的相对表达量，分别??是唾液腺的３．７和３．４倍。血淋巴中靶标基因的相对表达量是唾液腺的２．７倍，且与??唾液腺有显著差异（图３－２Ｂ）。而灰飞虱中肠和卵巢中两个靶标基因的相对表达量均无显??著差异。该结果表明在灰飞虱初羽化雌成虫唾液腺中和基因含量较少。??＂Ｉｎ?ＩＩＩ??〇．〇?—???：＿：??＾?ｍｌｌｉＳＳ?——??ｓａｌｉｖａｒｙ?ｇｌａｎｄ?ｍｉｄｇｕｔ?ｏｖａｒｉａｎ?ｉｉｅｉｎｏｌｙｎｉｐｈ??Ｂ?４Ｓ?”??ｔＥ：?「１?＿?＊??Ｓ?ｍｍ??Ｉ２＇０＇?■?ｐｉ?Ｉ??：ｒ１?＿?Ｉｆ??０．０???——Ｌ?—??」?＾??ｓａｌｉｖａｒｙ?ｇｌａｎｄ?ｍｉｄｇｕｔ?ｏｖａｒｉａｎ?ｈｃｍｏｌｙｍｐｈ??图３－２Ｌｓ２Ｔ／５?（Ａ）、（Ｂ）在灰飞虱各组织中的相对表达量??Ａｈ７Ｉ／５在带毒灰飞虱唾液腺、中肠、卵巢和血淋巴中的相对表达量；Ｂｈｔ／Ｂ／在带??毒灰飞虱唾液腺、中肠、卵巢和血淋巴中的相对表达量??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Genetic variability and evolution of rice stripe virus[J]. Ling-zhe HUANG,Li-xia RAO,Xue-ping ZHOU,Jian-xiang WU. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2013(10)
[2]中国水稻条纹叶枯病研究进展[J]. 周益军,李硕,程兆榜,周彤,范永坚. 江苏农业学报. 2012(05)
[3]苹果酸脱氢酶的结构及功能[J]. 汪新颖,王波,侯松涛,朱国萍. 生物学杂志. 2009(04)
[4]Suppressor of RNA silencing encoded by Rice gall dwarf virus genome segment 11[J]. LIU FuXiu1,2,ZHAO Qin1,RUAN XiaoLei1,HE YunWei1 & LI HuaPing1 1Laboratory of Plant Virology,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China;2Post-Entry Quarantine Station for Tropical Plant,Hainan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Haikou 570206,China. Chinese Science Bulletin. 2008(03)
[5]超量表达苹果酸脱氢酶基因提高苜蓿对铝毒的耐受性[J]. 罗小英,崔衍波,邓伟,李德谋,裴炎. 分子植物育种. 2004(05)
[6]水稻条纹叶枯病的研究 Ⅱ.病害的分布和损失[J]. 林奇英,谢联辉,周仲驹,谢莉妍,吴祖建. 福建农学院学报. 1990(04)
[7]江南稻区新发生的几种稻病[J]. 朱凤美,肖庆璞,王法明,陈毓苓. 植物保护. 1964(03)
硕士论文
[1]带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异表达蛋白对介体取食行为和传毒率的影响[D]. 黄丽君.扬州大学 2016
[2]灰飞虱唾液腺中与水稻条纹叶枯病毒（RSV）传播相关蛋白的研究[D]. 陈艳.扬州大学 2015
本文编号：3437348
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