逆境胁迫对突光假单胞菌SN15-2耐热性的影响及氧化胁迫适应后的差异表达蛋白分析

发布时间：2021-10-26 00:41

　　荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）是一种具有巨大应用潜力的植物病害生防细菌和植物根际促生菌,它们分布广泛并且能够适应多种生态环境。但是,荧光假单胞菌在制剂生产加工过程中不耐高温,极易失活,产业化难度大且其制剂的货架期短。这限制了荧光假单胞菌的制剂生产和有效应用。因此,研究提高荧光假单胞菌耐热性的方法及其机理探索对于荧光假单胞菌未来的商业化应用具有重要的理论价值和重大的产业化意义。用短时的逆环境胁迫来提高生物防治细菌的生防能力和抗逆性的方法已有报道,但未见针对荧光假单胞菌的研究。由我们实验室分离、筛选的荧光假单胞菌SN15-2展现出了良好的生防能力,其代谢产物对青枯劳尔氏菌等多种病原菌具有良好的抑制效果。为了提高荧光假单胞菌SN15-2的抗逆性,我们在荧光假单胞菌SN15-2生长到稳定期时用酸胁迫,氧化胁迫和盐胁迫对其进行短时间的刺激,观察测定不同处理方式对荧光假单胞菌SN15-2的影响。结果发现,用300 mM NaCl,25 mM H2O2分别胁迫45 min和30 min后能够不同程度的提高荧光假单胞菌SN15-2的耐热性,而酸胁迫不能提高荧光假单胞菌S... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２?ＴＭＴ技术流程图??Ｆｉｇ．?１．２?ＴＭＴ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ??

?１２?１６?２０?２４?２８?３２?３６??Ｔｉｍｅ?（ｈ）??图２．１荧光假单胞菌ＳＮ１５－２在不同的培养温度下的生长曲线??Ｆｉｇ．?２．１?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｐ．?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ＳＮ１５－２?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ??２．２．２盐胁迫对荧光假单胞菌ＳＮ１５－２生长的影响??盐胁迫对荧光假单胞菌ＳＮ１５－２生长的影响如图２．２所示。对照组的菌含量为??４．５７ｘｌ〇１３ｃｆＷｍＬ，随着ＮａＣｌ浓度的增加，荧光假单胞菌ＳＮ１５－２的菌含量有所下降，在??ＮａＣｌ?浓度为?１７０ｍＭ?时，菌含量为?６．４３＞＜ｌ〇１２ｃｆＵ／ｍＬ、３１０ｍＭ?时，菌含量为?４．７３＞＜１０１Ｑ??ｃｆｉｉ／ｍＬ、当ＮａＣｌ浓度达到４５０?ｍＭ时，菌含量下降到５．３９ｘ１０９?ｃｆｌｉ／ｍＬ。随着培养时间??的延长，菌含量有轻微降低，但是比较各个时间点下ＮａＣｌ胁迫适应后的菌含量基本保??持不变，可以看到逆环境适应的时间长短对菌含量的影响不大。??Ｈ〇ｍＭ?Ｓｌ７０ｍＭ?皿?２４０ｍＭ?Ｓ?３１?ＯｍＭ?Ｂ３８０ｍＭ?０?４５ＯｍＭ??２ｓ?１６?－１?ａ?ａ??？ｉｂＡ＾?ｊｉ＾ｂｃ?ｉｉＴｂｂｃ?ｊｘ＾ｂ??１１?ｉ?ｉ??１５?３０?４５?６０??Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）??图２．２盐胁迫下荧光假单胞菌ＳＮ１５－２菌含量变化??Ｆｉｇ．?２．２?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?Ｐ．?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ＳＮ１５－２?ｕｎｄｅｒ?ｓａｌｔ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｄａ

Ｆｉｇ．?２．４?Ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ＳＮ１５－２?ｕｎｄｅｒ?ａｃｉｄ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｄａｐｔａｔｉｏｎ??２．２．５盐胁迫适应对荧光假单胞菌ＳＮ１５－２耐热性的影响??不同浓度的盐胁迫适应对荧光假单胞菌ＳＮ１５－２耐热性的影响如图２．５所示。可以??看到，在加入２４０ｍＭ及更大浓度的ＮａＣｌ时，荧光假单胞菌ＳＮ１５－２的损伤指数（ＤＩ）更??小，例如在胁迫适应时间为３０ｍｉｎ时，对照组的ＤＩ值为３．５９、盐浓度为１７０ｍＭ的ＤＩ??值为３．１８、加入３１〇１１＾灿（：１时〇１值为１．９１、当盐浓度达到４５〇１１＾时０１值则为２．５３。??说明经过盐胁迫适应的荧光假单胞菌ＳＮ１５－２的耐热性有所提高，其中加入３１０ｍＭＮａＣｌ??胁迫适应４５?ｍｉｎ后损伤指数值最低，效果最明显。??ＨＯｍＭ?Ｂ１７０ｍＭ?Ｅ２４０ｍＭ?目３１０ｍＭ?Ｂ３８０ｍＭ?Ｂ４５０ｍＭ??４?－ｉ??ａ?ａ?ａ?ａ??５?＊ｂ?Ｉ?ｉ?ｃ?Ｉ??ｉｎ?ｌｉｉｌ?１１?ｌｉ??１５?３０?４５?６０??Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）??图２．５盐胁迫适应后荧光假单胞菌的损伤指数??Ｆｉｇ．?２．５?Ｄａｍａｇｅ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ?Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ?ａｆｔｅｒ?ｓａｌｔ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｄａｐｔａｔｉｏｎ??

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本文编号：3458485