基于单克隆抗体的南方菜豆花叶病毒血清学检测技术

发布时间：2021-11-25 13:35

　　为建立南方菜豆花叶病毒（southern bean mosaic virus,SBMV）的快速、简便、高通量检测技术,加强该病毒的口岸检验检疫,以提纯的SBMV粒子为免疫原免疫BALB/C小鼠,利用杂交瘤技术获得3株杂交瘤细胞株19C3、19H9和20G4,其分泌的SBMV腹水单抗效价均达到10-7,且3个单抗与感染SBMV大豆叶片组织粗提液有强烈的特异性免疫反应,而不与感染南方豇豆花叶病毒（southern cowpea mosaic virus,SCPMV）的豇豆、健康的大豆、毛豆、豌豆、蚕豆和菜豆叶片组织粗提液发生免疫反应。以制备的单抗为核心,建立了检测植物中SBMV的ACP-ELISA和dotELISA两种血清学方法。3个单抗中19H9单抗的检测灵敏度最高,以其建立的ACP-ELISA和dot-ELISA方法检测大豆病叶粗提液的灵敏度分别达到1∶163 840和1∶10 240稀释浓度。利用建立的dot-ELISA方法可从上海口岸截获的大豆种子中检测出SBMV,且该检测结果得到RT-PCR方法验证。表明制备的SBMV单抗及建立的SBMV血清学检测技术可有效用于我国SBMV的口岸... 

【文章来源】：植物保护学报. 2020,47(02)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 SBMV的提纯和鉴定
        1.2.2 杂交瘤细胞和单克隆抗体制备
        1.2.3 ACP-ELISA方法建立及其灵敏度和特异性分析
        1.2.4 dot-ELISA方法建立及其灵敏度和特异性分析
        1.2.5 血清学方法在口岸检测中的应用
2 结果与分析
    2.1 SBMV抗原的制备
    2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆
    2.3 单抗腹水的制备与特性鉴定
    2.4 ACP-ELISA方法建立及其灵敏度和特异性分析
    2.5 SBMV的dot-ELISA方法的建立
    2.6 SBMV的dot-ELISA方法的应用
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3518247