棉花角斑病菌V8高效电转化条件的探索

发布时间：2021-12-19 09:51

　　对去甲基化氮胞苷（5-AZA）的最佳浓度以及影响棉花角斑病菌[Xanthmonas campestris pv.malvacearum（Xcm）]V8电转化效率的诸多因素进行逐一研究,以期获得高效的电转化条件。结果表明,选取100μmol/L的5-AZA驯化处于对数中期的V8制备感受态细胞;保证电压2.1 kV、50μg/mL质粒7μL、4℃预冷复苏培养基SOC、振荡复苏培养4～5 h时,V8的电转化效率高达5×102/μg DNA。 

【文章来源】：湖北农业科学. 2020,59(12)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

5-AZA浓度对V8菌株电转化效率的影响

V8培养到34 h左右，电转化效率达到最高，此时对应的菌液OD600 nm为0.6左右，说明对数中期的V8生长旺盛，种群数量多，菌体粗壮，适合制备用于电转化的感受态细胞（图2）。2.2.2 电场强度对V8电转化效率的影响

在质粒用量小于或等于7μL时，质粒量与电转化效率呈正相关，随着质粒量的提高，电转化效率逐渐升高；但当质粒量超过7μL时，二者之间的关系转变为负相关。表明7μL的质粒即可以使V8获得3.1×102/μg DNA的电转化效率（图5）。图4 质粒浓度对V8菌株电转化效率的影响

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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本文编号：3544204