葡萄蚕豆萎蔫病毒荧光定量PCR检测及对寄主的影响研究

发布时间：2021-12-23 02:54

　　我国葡萄面积达1 080余万亩,居世界第二位。葡萄病毒病发生普遍,严重影响葡萄产量和品质。葡萄蚕豆萎蔫病毒（grapevine fabavirus,GFabV）是2016年新报道的葡萄病毒,普遍发生于各个葡萄产区。本研究针对GFabV分子检测方法欠缺、危害性不清等问题,扩增获得了我国首个GFabV全基因组序列,在此基础上,建立了高灵敏的荧光定量PCR检测技术,并初步明确了GFab V对葡萄的危害性,主要结果如下:采用小RNA测序方法从‘香妃’葡萄中鉴定出GFabV,并通过PCR和RACE方法扩增获得GFabV XF分离株基因组RNA1和RNA2的完整核苷酸序列。XF分离株基因组RNA1和RNA2的大小分别为5 822和3 134个核苷酸（nt）,与其他GFabV分离物同源性进行比对,结果表明,RNA1的核苷酸（nt）和氨基酸（aa）同源性分别为81.7?82.8%和92.0?94.2%,RNA2分别为76.4?82.8%和89.2?96.1%。对国内外GFabV分离物序列进行系统进化分析,显示XF形成一个独立的进化分支。此外,分析了来源于GFabV小干扰RNA（vsiRNA）的长度及在... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

侵染葡萄的DNA病毒Fig1-1DNAvirusesinfectinggrapes

中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论2图1-2侵染葡萄的单链RNA病毒Fig1-2Single-strandedRNAvirusesinfectinggrapes

中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论3图1-3侵染葡萄的双链RNA病毒Fig1-3Double-strandedRNAvirusesinfectinggrapes1.2葡萄蚕豆萎蔫病毒Fabavirus属的病毒种类多、寄主范围广，能侵染莴苣、菠菜、辣椒、豌豆等一些蔬菜和经济作物，造成严重危害（FERRERetal.,2008）。洪健等（2014）报道称Fabavirus属已有5个确定种，分别被命名为蚕豆萎蔫病毒1号（BBWV-1）、蚕豆萎蔫病毒2号（BBWV-2）、葫芦轻型花叶病毒（CuMMV）、龙胆属花叶病毒（GeMV）和野芝麻轻型花叶病毒（LMMV）。最近，在表现病毒病症状的樱桃和桃树上也报道了两种新的Fabavirus病毒，分别被命名为李属病毒F（PrunusvirusF，PrVF）和桃裂果伴随病毒（Peachcrackingfruitassociatedvirus，PCFaV）（VILLAMORetal.,2017;HEetal.,2017）。葡萄蚕豆萎蔫病毒（Grapevinefabavirus，GFabV）是AlRWAHNIHetal.（2016）从两个日本鲜食葡萄‘黑色甜菜’（Vitisviniferacv.BlackBeet）和‘长野紫峰’（Vitisviniferacv.NaganoPurple）上鉴定出的一种新的葡萄病毒，被归类为Secoviridae家族中Fabavirus的新成员。迄今为止，该病毒已在北美、印度、中国、韩国和日本发现（FANetal.,2017;JOetal.,2017;CHIAKIetal.,2020）。先前的研究表明，感染GFabV的‘贝达’葡萄和‘阳光玫瑰’葡萄表现叶片褪绿畸形的症状（FANetal.,2019）。日本学者CHIAKIetal（2019）报道了“阳光玫瑰”母本树携带葡萄蚕豆萎蔫病毒、葡萄双生病毒A、啤酒花矮化类病毒和葡萄黄斑类病毒1等病毒和类病毒。由于生产中阳光玫瑰繁殖材料均来源于母本树，因此导致了田间栽植的阳光玫瑰普遍带毒。最近，对中国不同葡萄品种和地区的GFabV分离株的检测和遗传多样性的研究表明，中国22个省和地区的11个省存在GFabV，感染率达19.1％，不同来

【参考文献】：
期刊论文
[1]Prevalence and genetic diversity of grapevine fabavirus isolates from different grapevine cultivars and regions in China[J]. FAN Xu-dong,ZHANG meng-yan,ZHANG Zun-ping,REN Fang,HU Guo-jun,DONG Ya-feng.  Journal of Integrative Agriculture. 2020(03)
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[4]葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用[J]. 任芳,董雅凤,张尊平,范旭东,胡国君.  园艺学报. 2018(11)
[5]葡萄扇叶病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 周俊,范旭东,董雅凤,张尊平,胡国君,任芳,李正男.  园艺学报. 2016(03)
[6]一种高效的苹果褪绿叶斑病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法[J]. 秦子禹,孙建设,王娜,邵建柱.  植物保护学报. 2015(04)
[7]ICTV第九次报告以来的植物病毒分类系统[J]. 洪健,周雪平.  植物病理学报. 2014(06)
[8]葡萄病毒E分子检测及基因序列分析[J]. 范旭东,董雅凤,张尊平,任芳,胡国君,朱红娟.  植物病理学报. 2014(05)
[9]葡萄病毒分子检测技术研究进展[J]. 范旭东,董雅凤,张尊平,任芳,胡国君,朱红娟.  园艺学报. 2014(05)
[10]我国部分地区沙地葡萄茎痘相关病毒分离物外壳蛋白序列变异分析[J]. 朱红娟,胡国君,范旭东,张尊平,任芳,董雅凤.  植物保护学报. 2014(02)

博士论文
[1]引起葡萄卷叶及环斑症状的病毒种类鉴定及其分子特性研究[D]. 范旭东.华中农业大学 2016

硕士论文
[1]沙地葡萄茎痘相关病毒PCR检测及外壳蛋白基因变异分析[D]. 朱红娟.中国农业科学院 2014
[2]我国葡萄卷叶病病原分子检测技术研究[D]. 裴光前.中国农业科学院 2010
[3]葡萄病毒种类调查及葡萄斑点病毒检测[D]. 刘永清.华中农业大学 2003



本文编号：3547633