两个Zn2Cys6锌指蛋白对球孢白僵菌生长及抗逆性的影响

发布时间：2021-12-29 23:08

　　昆虫病原真菌是自然界中调节害虫种群数量的一类重要生物防治资源,具有寄主范围较广、寄主不易产生抗性及容易人工培养等特点,其研究开发已得到越来越多的重视。但在实际应用过程中,真菌生防制剂存在致死害虫速度慢、防治效果不稳定等问题。昆虫病原真菌感染宿主昆虫是一个复杂的过程,易受到环境因素如温度、湿度、紫外照射等影响。因此,昆虫病原真菌在感染宿主过程中抵御外界环境胁迫的能力是影响杀虫效果的重要要素。研究发现,锌指蛋白在真菌生长发育过程和抗逆性等方面发挥重要作用。全局调控因子LaeA调节了球孢白僵菌致死昆虫后菌丝生长及孢子发育。转录组分析显示,两个Zn2Cys6转录因子（命名为Bbstr1与Bbstr2）在laeA敲除菌株中高水平表达。因此,为分析这两个基因是否参与球孢白僵菌的生长发育及抗逆性,构建了两个基因的敲除突变株、超量表达菌株及互补菌株,比较了不同菌株在生长发育及逆境胁迫等方面的差异。得到的主要结果如下:1.球孢白僵菌Bbstr1、Bbstr2基因序列分析与表达特性分析Bbstr1开放阅读框全长2250 bp,编码749个氨基酸。Bbstr2开放阅读框全长2013 bp,编码670个氨基酸... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

昆虫病原真菌侵染过程示意图（Wangetal,2017）

各种影响昆虫病原真菌致病性的非生物因素和生物因素，不论寄主本身的免疫防御体系，都将影响球孢白僵菌正常的生理活蛋白研究进展蛋白蛋白最初是从非洲爪蟾卵母细胞中发现的（Miller et al, 1985）构域的转录因子。锌指结构域含有若干半胱氨酸（Cys）和组氨残基与锌离子形成的稳定的手指状结构（图 1.2），其稳定性主维持（Frankel et al, 1988）。锌指蛋白在真核生物中分布十分、大豆等植物及稻瘟病菌、酿酒酵母等真菌中都有发现（Mu; Kim et al, 2006; Yuan et al, 2018; Hirayama et al, 2003; Cao, H. e因子的锌指蛋白，主要通过与 DNA、RNA 或蛋白质的结合在发挥不同的功能。据报道锌指蛋白参与调控基因表达、细胞分胁迫等生命过程（Crook et al, 1993; Nakashima et al, 2002; Jangt al, 2017）。

第四章 结果与分析第四章 结果与分析4.1 Bbstr1 与 Bbstr2 基因序列分析全局调控因子 LaeA 调节了球孢白僵菌致死昆虫后菌丝生长及孢子发育。转录组分析显示，laeA 突变株中两个 Zn2Cys6 转录因子（命名为 Bbstr1 与 Bbstr2）高水平表达。Bbstr1 开放阅读框全长 2250 bp，编码 749 个氨基酸。Bbstr2 的开放阅读框全长 2013 bp，编码 670 个氨基酸。Bbstr1 与 Bbstr2 蛋白在 NCBI 中注释为氮源吸收转录因子，N端都含有一个保守的Zn(2)-Cys(6) 结构域（4.1.A）。用MEGA6.0软件对 Bbstr1 与 Bbstr2 蛋白与多种真菌的同源蛋白进化树分析，发现 Bbstr1 和Bbstr2 蛋白均与冬虫夏草中同源蛋白的亲缘关系较近，而与尖孢镰刀菌亲缘关系较远（4.1.B, 4.1.C）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫病原真菌的生态适应性及其生物防治应用策略[J]. 农向群,张泽华.  中国生物防治学报. 2013(01)
[2]防治假眼小绿叶蝉的虫生真菌高毒菌株的筛选及田间防治效果[J]. 展茂魁,何玲敏,陈名,王滨,李增智.  中国生物防治学报. 2012(01)
[3]虫生真菌分子致病机理及基因工程改造研究进展[J]. 吕丁丁,李增智,王成树.  微生物学通报. 2008(03)
[4]环境因子对球孢白僵菌侵染桔小实蝇致病力的影响[J]. 潘志萍,李敦松,曾玲.  环境昆虫学报. 2008(01)
[5]不同温、湿度和光照对白僵菌孢子活力的影响[J]. 杨敏芝,谭云峰,田志来.  吉林农业科学. 2005(03)
[6]十种常用农药与球孢白僵菌的生物学相容性[J]. 许寿涛,应盛华,冯明光.  植物保护学报. 2002(02)
[7]不同温、湿度下白僵菌对棉铃虫幼虫的致病力[J]. 孙鲁娟,吴孔明,郭予元.  昆虫学报. 2001(04)
[8]不同温湿度下白僵菌对松毛虫的侵染致病效应[J]. 林华峰,樊美珍,李增智,胡萃.  应用生态学报. 1998(02)



本文编号：3557014