枸杞根腐病菌拮抗菌株的筛选与鉴定
发布时间：2022-01-02 11:46
枸杞病虫害是影响枸杞产业发展的重要因素,其中枸杞根腐病是发生最普遍的病害之一。本研究从发病严重的枸杞种植园中,采集健康枸杞植株根际土样,通过常规稀释分离法进行菌株分离;以枸杞根腐病主要致病菌——腐皮镰孢菌（Fusarium solani）为供试菌,采用平板对峙法筛选腐皮镰孢菌的拮抗菌株,并通过形态学和分子生物学方法对拮抗菌株进行了种类鉴定。结果表明:在健康枸杞植株根际土壤样品中分离获得的101株细菌、52株放线菌、30株霉菌和27株酵母菌中,筛选得到对枸杞根腐病菌具有抑制效果的菌株HYM-19和HYC-7,其中菌株HYM-19抑菌率为52.29%,菌株HYC-7的抑菌率为39.80%。经鉴定HYM-19为中华根瘤菌（Sinorhizobium sp.）,HYC-7为绿僵菌（Metarhizium sp.）。该研究结果可为有效利用土壤微生物防治枸杞根腐病提供理论依据。
【文章来源】：浙江农业学报. 2020,32(05)北大核心CSCD
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
HYM19(A)和HYC7(B)产生的抑菌带
表2 拮抗菌株对腐皮镰刀菌的抑制效果Table 2 Inhibitory effect of antagonistic strains on Fusarium solani 菌株编号Strainnumber 处理组菌落直径Colony diameter ofcontrol group/mm 抑菌率Inhibitionrate/% 对照Control 60.00±1.37 a — HYM19 31.24±0.74 c 52.29 HYC7 38.11±1.39 b 39.80 同列数据后没有相同小写字母表示差异显著(P<0.05)。The values in the same column followed by different letters showed the significant difference(P<0.05).16SrRNA基因序列比对结果显示,从枸杞健康土壤中分离的HYM19菌株和HYC7菌株与已知模式属的最大相似性均在98%以上,说明新分离内生菌的科学分类地位比较明确(图4、图5)。
琼脂糖凝胶电泳(图6)显示,HYM19菌株的ITS-PCR产物在1 000 bp附近处出现条带,测序后得到其ITS序列长为1 359 bp。通过BLAST进行序列比对,与中华根瘤菌属相似性最高,结合形态学分析,鉴定其为中华根瘤菌属Sinorhizobium。HYC7菌株的ITS-PCR产物在500 bp附近处出现条带,测序后得到其ITS序列长为553 bp。通过BLAST进行序列比对,与绿僵菌属相似性最高,结合形态学分析,鉴定其为绿僵菌属Metarhizium。图4 菌株HYC7的系统发育树
【参考文献】：
期刊论文
[1]火龙果溃疡病原菌拮抗菌株的筛选与生物防治效果初探[J]. 张振华,林江,王文雅,许畅,杨开样,何世伟. 河南农业科学. 2019(08)
[2]白芨病菌拮抗菌株的筛选及鉴定[J]. 毛仪楠,邓百万. 江苏农业科学. 2019(03)
[3]一株平沙绿僵菌的鉴定及生防应用潜力评价[J]. 杨帆,刘春来,王爽,刘亮,李新民. 植物保护. 2018(05)
[4]甘肃省景电灌区枸杞根腐病的发生与防治[J]. 朱会文. 现代农业科技. 2018(05)
[5]草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷特性及其对南方红豆杉的促生作用[J]. 李云玲,侯沁文,刘瑞祥,任嘉红,张易. 林业科学研究. 2017(05)
[6]几种杀菌剂对枸杞根腐病菌的室内毒力测定[J]. 陈伟,何静,多甜甜,薛润稼,徐宏江,杨焕俊. 甘肃农业大学学报. 2017(01)
[7]微生物源农药的应用现状及发展研究[J]. 杜士杰. 黑龙江科技信息. 2016(25)
[8]苹果树腐烂病菌拮抗放线菌的筛选、鉴定及防效[J]. 薛应钰,范万泽,张树武,徐秉良. 应用生态学报. 2016(10)
[9]10种杀菌剂对枸杞根腐病菌的室内毒力测定[J]. 陈伶俐,马洪福,李亚娟,李琳琳,严林. 青海大学学报(自然科学版). 2015(05)
[10]人参根腐病拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌活性[J]. 勾长龙,王雨琼,孙朋,毕彦晖,娄玉杰,高云航. 食品科学. 2015(19)
博士论文
[1]甘肃省枸杞根腐病病原及生理生化抗病机理研究[D]. 李捷.甘肃农业大学 2015
硕士论文
[1]大豆尖镰孢根腐病拮抗菌X2生防菌剂的研制与应用[D]. 黄铭慧.东北农业大学 2017
[2]枸杞根际促生细菌筛选、培养基优化及基因组测序[D]. 马锦锦.山东农业大学 2017
[3]柴达木地区枸杞根腐病病原菌生物学特性及药剂防治研究[D]. 陈伶俐.青海大学 2015
本文编号：3564118
【文章来源】：浙江农业学报. 2020,32(05)北大核心CSCD
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
HYM19(A)和HYC7(B)产生的抑菌带
表2 拮抗菌株对腐皮镰刀菌的抑制效果Table 2 Inhibitory effect of antagonistic strains on Fusarium solani 菌株编号Strainnumber 处理组菌落直径Colony diameter ofcontrol group/mm 抑菌率Inhibitionrate/% 对照Control 60.00±1.37 a — HYM19 31.24±0.74 c 52.29 HYC7 38.11±1.39 b 39.80 同列数据后没有相同小写字母表示差异显著(P<0.05)。The values in the same column followed by different letters showed the significant difference(P<0.05).16SrRNA基因序列比对结果显示,从枸杞健康土壤中分离的HYM19菌株和HYC7菌株与已知模式属的最大相似性均在98%以上,说明新分离内生菌的科学分类地位比较明确(图4、图5)。
琼脂糖凝胶电泳(图6)显示,HYM19菌株的ITS-PCR产物在1 000 bp附近处出现条带,测序后得到其ITS序列长为1 359 bp。通过BLAST进行序列比对,与中华根瘤菌属相似性最高,结合形态学分析,鉴定其为中华根瘤菌属Sinorhizobium。HYC7菌株的ITS-PCR产物在500 bp附近处出现条带,测序后得到其ITS序列长为553 bp。通过BLAST进行序列比对,与绿僵菌属相似性最高,结合形态学分析,鉴定其为绿僵菌属Metarhizium。图4 菌株HYC7的系统发育树
【参考文献】：
期刊论文
[1]火龙果溃疡病原菌拮抗菌株的筛选与生物防治效果初探[J]. 张振华,林江,王文雅,许畅,杨开样,何世伟. 河南农业科学. 2019(08)
[2]白芨病菌拮抗菌株的筛选及鉴定[J]. 毛仪楠,邓百万. 江苏农业科学. 2019(03)
[3]一株平沙绿僵菌的鉴定及生防应用潜力评价[J]. 杨帆,刘春来,王爽,刘亮,李新民. 植物保护. 2018(05)
[4]甘肃省景电灌区枸杞根腐病的发生与防治[J]. 朱会文. 现代农业科技. 2018(05)
[5]草木樨中华根瘤菌CHW10B溶磷特性及其对南方红豆杉的促生作用[J]. 李云玲,侯沁文,刘瑞祥,任嘉红,张易. 林业科学研究. 2017(05)
[6]几种杀菌剂对枸杞根腐病菌的室内毒力测定[J]. 陈伟,何静,多甜甜,薛润稼,徐宏江,杨焕俊. 甘肃农业大学学报. 2017(01)
[7]微生物源农药的应用现状及发展研究[J]. 杜士杰. 黑龙江科技信息. 2016(25)
[8]苹果树腐烂病菌拮抗放线菌的筛选、鉴定及防效[J]. 薛应钰,范万泽,张树武,徐秉良. 应用生态学报. 2016(10)
[9]10种杀菌剂对枸杞根腐病菌的室内毒力测定[J]. 陈伶俐,马洪福,李亚娟,李琳琳,严林. 青海大学学报(自然科学版). 2015(05)
[10]人参根腐病拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌活性[J]. 勾长龙,王雨琼,孙朋,毕彦晖,娄玉杰,高云航. 食品科学. 2015(19)
博士论文
[1]甘肃省枸杞根腐病病原及生理生化抗病机理研究[D]. 李捷.甘肃农业大学 2015
硕士论文
[1]大豆尖镰孢根腐病拮抗菌X2生防菌剂的研制与应用[D]. 黄铭慧.东北农业大学 2017
[2]枸杞根际促生细菌筛选、培养基优化及基因组测序[D]. 马锦锦.山东农业大学 2017
[3]柴达木地区枸杞根腐病病原菌生物学特性及药剂防治研究[D]. 陈伶俐.青海大学 2015
本文编号：3564118
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