蝗绿僵菌微循环产孢调控通路的初步研究
发布时间：2022-01-03 10:14
蝗绿僵菌（Metarhizium acridum）作为一种昆虫病原真菌,以孢子作为主要侵染单元感染蝗虫,因此研究其产孢机制对生物农药的开发与应用具有重要作用。丝状真菌的产孢方式包括:正常产孢和微循环产孢,正常产孢是丝状真菌最普遍的产孢方式,其产孢机制已阐明清楚。微循环产孢是真菌绕过菌丝阶段的一种无性产孢方式,蝗绿僵菌可以诱导进行微循环产孢,与正常产孢相比具有产孢速度快、产孢量大、孢子大小更为均一等优点。近年来,关于环境因素及相关基因对微循环产孢方式的影响进行了研究,但相关基因之间的调控关系以及调控机制尚未报道。因此,本文从以下两方面进行研究:1.蝗绿僵菌微循环产孢相关基因之间调控关系的研究本实验室前期筛选了微循环产孢培养基（SYA）,构建了蝗绿僵菌微循环产孢时期的均一化全长cDNA文库和富集微循环产孢相关基因的差减文库,鉴定出7个基因（MaH1、MaCreA、MaAGA、MaPPT5、MaCpp、MaMmc、MaRcp）参与蝗绿僵菌正常产孢与微循环产孢的相互转换,并筛选得到敲除菌株。本研究分别在正常产孢培养基（1/4 SDAY）和微循环产孢培养基（SYA）上培养并观察各敲除菌株与WT菌...
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MaH1、MaPPT5、MaRcp对蝗绿僵菌产孢方式的影响
图 2.3 各敲除菌株中的相对表达量分析（A）在 ΔMaPPT5（B）ΔMaRcp（C）ΔMaH1 菌株中各基因表达量的倍数变化。所有试验重复三次。**：差异极显著，p < 0.01，*：差异显著，p < 0.05。Fig.2.3 Fold changes of relative expression in mutant strains. (A) The Fold change inΔMaPPT5 (B) in ΔMaH1 and (C) in ΔMaRcp. Each trial repeated three times. Error bars arestandard deviations of three trials. **: extremely significant difference, p < 0.01, *:significantdifference, p < 0.05.② MaCreA、Macpp、MaAGA、MaMmc 之间的相互调控关系在 SYA 培养基上（Fig.2.2），ΔMaCreA、ΔMaCpp、ΔMaMmc、ΔMaAGA 菌株与 WT 菌株的产孢方式出现差异，WT 为微循环产孢，在 12h 开始长出产孢器官，而 ΔMacpp、ΔMaMmc 菌株为正常产孢，ΔMaCreA 长有长菌丝且不产孢，因此收集 WT、ΔMacpp、ΔMaMmc 菌株 12 h 时的孢子或菌丝，提取 RNA。ΔMaAGA 菌株在前期产孢方式与 WT 一致，均为微循环产孢，在 60 h 时开始出现菌丝，与WT 产孢方式开始出现差异，因此收集 ΔMaAGA 菌株 60 h 时的孢子或菌丝，提取RNA。
18图 2.4 各敲除菌株中的相对表达量分析）在 ΔMaCreA（B）ΔMaCpp（C）ΔMaAGA（D）ΔMaMmc 菌株中各基因表达量的倍数变化。所有试验重复三次。**：差异极显著，p < 0.01；*：差异显著，p < 0.05。g.2.4 Fold changes of relative expression in mutant strains. (A) The Fold change in ΔMaCreA(B) ΔMaCpp (C) in ΔMaAGA and（D）in ΔMaMmc. Each trial repeated three times. Error bars arestandard deviations of three trials . **: extremely significant difference, p < 0.01, *: significantdifference, p < 0.05.
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国的蝗灾及防控对策[J]. 任炳忠,张雪. 吉林农业大学学报. 2013(02)
[2]生物农药的应用现状及前景展望[J]. 马俊义,李尽哲,叶兆伟. 江苏农业科学. 2011(04)
[3]国内外蝗害治理技术现状与展望[J]. 张龙. 应用昆虫学报. 2011(04)
[4]绿僵菌微循环产孢基因Pyk的克隆及RNA干扰分析[J]. 徐飞,彭国雄,夏玉先. 微生物学通报. 2011(06)
[5]金龟子绿僵菌致病的分子机理研究进展[J]. 刘颖,殷从松. 贵州农业科学. 2010(10)
[6]绿僵菌的研究进展[J]. 代鹏,宋妍,许天委,谢玉平,黄俊生. 热带农业科学. 2005(02)
[7]飞蝗研究进展[J]. 李春选,马恩波. 昆虫知识. 2003(01)
[8]蝗虫与蝗灾[J]. 林森. 科技致富向导. 2002(09)
[9]国际蝗虫灾害的防治策略和技术 :现状与展望[J]. 郝树广,秦启联,王正军,康乐,李鸿昌,陈永林,李典谟. 昆虫学报. 2002(04)
[10]我国蝗虫暴发成灾的现状及其持续控制对策[J]. 王正军,秦启联,郝树广,陈永林,李鸿昌,李典谟. 昆虫知识. 2002(03)
本文编号：3566092
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MaH1、MaPPT5、MaRcp对蝗绿僵菌产孢方式的影响
图 2.3 各敲除菌株中的相对表达量分析（A）在 ΔMaPPT5（B）ΔMaRcp（C）ΔMaH1 菌株中各基因表达量的倍数变化。所有试验重复三次。**：差异极显著，p < 0.01，*：差异显著，p < 0.05。Fig.2.3 Fold changes of relative expression in mutant strains. (A) The Fold change inΔMaPPT5 (B) in ΔMaH1 and (C) in ΔMaRcp. Each trial repeated three times. Error bars arestandard deviations of three trials. **: extremely significant difference, p < 0.01, *:significantdifference, p < 0.05.② MaCreA、Macpp、MaAGA、MaMmc 之间的相互调控关系在 SYA 培养基上（Fig.2.2），ΔMaCreA、ΔMaCpp、ΔMaMmc、ΔMaAGA 菌株与 WT 菌株的产孢方式出现差异，WT 为微循环产孢，在 12h 开始长出产孢器官，而 ΔMacpp、ΔMaMmc 菌株为正常产孢，ΔMaCreA 长有长菌丝且不产孢，因此收集 WT、ΔMacpp、ΔMaMmc 菌株 12 h 时的孢子或菌丝，提取 RNA。ΔMaAGA 菌株在前期产孢方式与 WT 一致，均为微循环产孢，在 60 h 时开始出现菌丝，与WT 产孢方式开始出现差异，因此收集 ΔMaAGA 菌株 60 h 时的孢子或菌丝，提取RNA。
18图 2.4 各敲除菌株中的相对表达量分析）在 ΔMaCreA（B）ΔMaCpp（C）ΔMaAGA（D）ΔMaMmc 菌株中各基因表达量的倍数变化。所有试验重复三次。**：差异极显著，p < 0.01；*：差异显著，p < 0.05。g.2.4 Fold changes of relative expression in mutant strains. (A) The Fold change in ΔMaCreA(B) ΔMaCpp (C) in ΔMaAGA and（D）in ΔMaMmc. Each trial repeated three times. Error bars arestandard deviations of three trials . **: extremely significant difference, p < 0.01, *: significantdifference, p < 0.05.
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国的蝗灾及防控对策[J]. 任炳忠,张雪. 吉林农业大学学报. 2013(02)
[2]生物农药的应用现状及前景展望[J]. 马俊义,李尽哲,叶兆伟. 江苏农业科学. 2011(04)
[3]国内外蝗害治理技术现状与展望[J]. 张龙. 应用昆虫学报. 2011(04)
[4]绿僵菌微循环产孢基因Pyk的克隆及RNA干扰分析[J]. 徐飞,彭国雄,夏玉先. 微生物学通报. 2011(06)
[5]金龟子绿僵菌致病的分子机理研究进展[J]. 刘颖,殷从松. 贵州农业科学. 2010(10)
[6]绿僵菌的研究进展[J]. 代鹏,宋妍,许天委,谢玉平,黄俊生. 热带农业科学. 2005(02)
[7]飞蝗研究进展[J]. 李春选,马恩波. 昆虫知识. 2003(01)
[8]蝗虫与蝗灾[J]. 林森. 科技致富向导. 2002(09)
[9]国际蝗虫灾害的防治策略和技术 :现状与展望[J]. 郝树广,秦启联,王正军,康乐,李鸿昌,陈永林,李典谟. 昆虫学报. 2002(04)
[10]我国蝗虫暴发成灾的现状及其持续控制对策[J]. 王正军,秦启联,郝树广,陈永林,李鸿昌,李典谟. 昆虫知识. 2002(03)
本文编号：3566092
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