加利利链霉菌（Streptomyces galilaeus）AF1的发酵条件优化及其代谢产物分离

发布时间：2022-01-08 03:28

　　加利利链霉菌（Streptomyces galilaeus）AF1是课题组自主分离的菌株,前期研究结果表明:该菌株代谢物对革兰氏阳性菌具有良好的杀菌和抗菌活性,但对革兰氏阴性菌不敏感,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,其最小抑菌质量浓度（MIC）为68μg/mL;同时具有一定的抗真菌活性,0.3mg/mL的发酵液提取物对香蕉枯萎病病原菌（Fusarium oxysporum f.sp.cubense）抑菌率达94.1%;能导致金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌静息细胞的细胞壁破裂,具有明显的杀菌活性,与现有抗生素的作用机理相比,具有明显的新颖性。本文在课题组前期对AF1抗菌代谢物在菌体内的分布和培养基初步优化的基础上,研究接种方式、表面活性剂对AF1菌株生长和抗菌生物活性物质代谢及其分布的影响,以期提高加利利链霉菌AF1的发酵效率;并对AF1菌株代谢产物的分离进行了初步研究。菌丝体形态特征观察、发酵液中的总糖和还原糖量的动态变化、发酵液pH值的动态变化、以及其发酵液中抑菌活性物质积累的研究结果表明:孢子、孢子·菌丝和菌丝三种接种方式对加利利链霉菌AF1发酵过程的影响不同,不同接种方式导... 

【文章来源】：华南农业大学广东省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

加利利链霉菌AF1抑菌圈直径与孢子接种量的关系

3 结果与分析3.1 孢子接种量对加利利链霉菌 AF1 发酵液抑 MRSA 活性的影响不同的孢子接种量与加利利链霉菌AF1发酵液抑菌圈直径的关系见图2、图3。图2中1、2、3、4、5分别代表接种的孢子浓度为空白对照CK、5×102个/mL、5×104个/mL、5×106个/mL、5×108个/mL；图2、3结果表明：不接种孢子的空白对照ck所得抑菌圈直径为0，同时说明用于溶解样品的丙酮不具有活性，随着孢子接种量的增加，抑菌圈直径也随之增加，待增加到5×106个/100mL后抑菌圈直径达到最大值，当再增加孢子的接种数量时，抑菌圈的直径反而会变小，这主要是因为液体培养基中初始孢子的密度取决于接种的孢子量，如果孢子密度太小，则液体培养基内菌丝体数量增长缓慢，导致发酵时间延长，不利于发酵产物的获取；孢子密度太大，则会导致液体培养基内菌丝体数量增长过于迅速，发酵的中后期出现营养不足，代谢迟缓等问题，进而导致合成次级代谢产物能力有限。所以加利利链霉菌AF1采用孢子接种进行发酵的最佳接种量为5×106个/100mL培养基。图 2 加利利链霉菌 AF1 抑菌圈直径与孢子接种量的关系注

不同接种方式的发酵液中总糖质量浓度的变化


本文编号：3575808