二化螟Cry1C耐受品系的适合度及其中肠BBMV与Bt蛋白的结合能力研究
发布时间：2022-01-20 21:58
鳞翅目昆虫二化螟Chilo suppressalis（Walker）是水稻上主要的蛀茎害虫,给我国水稻生产造成了巨大的损失。转Bt基因水稻的研发为水稻鳞翅目害虫防治带来了新的策略,但也带来了靶标害虫潜在的抗性风险等问题。二化螟抗性问题是转基因水稻生态安全评价重点关注的内容之一,也是制约转基因水稻可持续应用的关键因素。目前,转Bt基因水稻靶标害虫二化螟对Bt杀虫蛋白的抗性发展及抗性机理尚不明确。通过室内筛选建立二化螟Bt抗性品系,研究其抗性演化规律,探究二化螟抗性产生后适合度变化及其抗性产生的生化机理,可为靶标害虫的抗性风险评价和抗性治理提供科学数据和理论依据,具有重要研究意义。目前,实验室已经建立了成熟的二化螟室内饲养技术,并利用Cry1C杀虫蛋白对二化螟敏感品系进行继代汰选,获得了 Cry1C耐受品系。在此基础上,通过研究二化螟Cry1C耐受和敏感品系在不含Bt杀虫蛋白的人工饲料上的适合度差异;并使用cry1C+cry14b、crylAb、cry1C三种转基因抗虫水稻及亲本MH63水稻离体叶片饲喂二化螟两个品系,比较两品系在转基因抗虫水稻上的适合度差异;利用酶联免疫吸附测定法（ELI...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２技术路线图??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏａｄｍａｐ??
经过连续４１代汰选，二化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系对ＣｒｙｌＣ杀虫蛋白的ＬＤ５０从最初??的１．８５ｕｇ／ｇ上升到１６．６１ｕｇ／ｇ，相对于敏感品系，抗性倍数达到了?４２．５９倍（表２－１）。??从图２－１可知，在１１代之前，二化螟对ＣｒｙｌＣ蛋白抗性发展缓慢，汰选１１代后，二??化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系的抗性上升速度加快。??表２－１二化娱ＣｉｙｌＣ耐受品系抗性演化??Ｔａｂｌｅ２－１?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｃ．?ｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ?ＣｒｙｌＣ?ｔｏｌｅｒａｎｔ?ｓｔｒａｉｎ??汰选世代?Ｔｎ?ｒｑ，〇／Ｆｎ?斜銮?抗性倍数??Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ?：系?｝?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ??ｓｅｌｅｃｔｅｄ?Ｓ＿Ｓ?獅社兕?ｒａｔｉｏ?（ＲＲ）??１６??
水稻（Ｐ＜０．０５），到成熟期，单价水稻ＣｒｙｌＣ蛋白表达量上升较快，显??著高于双价水稻（ＰＯ．０５）。??由图３－２－Ｂ可知，ＣｒｙｌＡｂ蛋白在必水稻秧苗期表达量最高，为３．７５?ｕｇ／ｇ，??分蘖期和拔节期表达量略有下降，分别为３．４５?ｕｇ／ｇ、３．４６?ｕｇ／ｇ。水稻拔节之后ＣｒｙｌＡｂ??表达量下降幅度增大，成熟期表达量仅为２．２５ｕｇ／ｇ。在水稻中，ＣｒｙｌＡｂ??蛋白表达量逐渐降低，由秧苗期的５?ｕｇ／ｇ下降到成熟期的１．３?ｕｇ／ｇ。就相同生育期单、??双价抗虫水稻中表达量相比，在秧苗期，水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量显著??高于水稻（Ｐ＜０．０５）。在水稻分蘖期，单、双价抗虫水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量??差异不显著（Ｐ＞０．０５）。分蘖期过后，双价抗虫水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量大幅下降，??拔节期、扬花期和成熟期这３个生育期的ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量显著低于单价水稻??（Ｐ＜０．０５）。??Ａ?＿ｃｘｙｉＣａ?水箱??１＇２?１?
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势[J]. Clive James. 中国生物工程杂志. 2016(04)
[2]2016年全国农作物重大病虫害发生趋势预报[J]. 姜玉英,刘万才,陆明红,黄冲,刘杰. 中国植保导刊. 2016(02)
[3]二化螟Cry1Ac敏感和耐受品系的适合度差异及中肠蛋白酶活性比较[J]. 周艳聪,徐杨洋,陈秀萍,韩兰芝,贾变桃,彭于发. 环境昆虫学报. 2015(05)
[4]棉铃虫中肠氨肽酶APN4与Cry1Ac、Cry2Aa结合能力的比较[J]. 袁向东,葛朝虹,肖玉涛,梁革梅. 应用昆虫学报. 2015(05)
[5]二化螟人工饲养技术[J]. 李波,韩兰芝,彭于发. 应用昆虫学报. 2015(02)
[6]抗虫转基因水稻对非靶标生物的生态安全性研究进展[J]. 傅强,赖凤香,陈洋,李凯龙. 植物生理学报. 2013(07)
[7]转基因抗虫水稻的研发与应用及在我国的发展策略[J]. 徐秀秀,韩兰芝,彭于发,侯茂林. 环境昆虫学报. 2013(02)
[8]大螟人工饲养技术的初步研究[J]. 韩超,彭于发,侯茂林,陈法军,翟保平,韩兰芝. 应用昆虫学报. 2012(01)
[9]中国大螟研究历史、现状与展望[J]. 徐丽娜,李昌春,胡本进,周子燕,李晓霞. 中国农学通报. 2011(24)
[10]转基因水稻研发进展[J]. 朱祯. 中国农业科技导报. 2010(02)
博士论文
[1]Bt-Cry1Ac棉花抗性棉铃虫对Cry2Ab的抗性风险研究[D]. 罗术东.中国农业科学院 2007
硕士论文
[1]大螟天然庇护所及人工饲料的研究[D]. 刘卓荣.中国农业科学院 2007
本文编号：3599593
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２技术路线图??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏａｄｍａｐ??
经过连续４１代汰选，二化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系对ＣｒｙｌＣ杀虫蛋白的ＬＤ５０从最初??的１．８５ｕｇ／ｇ上升到１６．６１ｕｇ／ｇ，相对于敏感品系，抗性倍数达到了?４２．５９倍（表２－１）。??从图２－１可知，在１１代之前，二化螟对ＣｒｙｌＣ蛋白抗性发展缓慢，汰选１１代后，二??化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系的抗性上升速度加快。??表２－１二化娱ＣｉｙｌＣ耐受品系抗性演化??Ｔａｂｌｅ２－１?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｃ．?ｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ?ＣｒｙｌＣ?ｔｏｌｅｒａｎｔ?ｓｔｒａｉｎ??汰选世代?Ｔｎ?ｒｑ，〇／Ｆｎ?斜銮?抗性倍数??Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ?：系?｝?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ??ｓｅｌｅｃｔｅｄ?Ｓ＿Ｓ?獅社兕?ｒａｔｉｏ?（ＲＲ）??１６??
水稻（Ｐ＜０．０５），到成熟期，单价水稻ＣｒｙｌＣ蛋白表达量上升较快，显??著高于双价水稻（ＰＯ．０５）。??由图３－２－Ｂ可知，ＣｒｙｌＡｂ蛋白在必水稻秧苗期表达量最高，为３．７５?ｕｇ／ｇ，??分蘖期和拔节期表达量略有下降，分别为３．４５?ｕｇ／ｇ、３．４６?ｕｇ／ｇ。水稻拔节之后ＣｒｙｌＡｂ??表达量下降幅度增大，成熟期表达量仅为２．２５ｕｇ／ｇ。在水稻中，ＣｒｙｌＡｂ??蛋白表达量逐渐降低，由秧苗期的５?ｕｇ／ｇ下降到成熟期的１．３?ｕｇ／ｇ。就相同生育期单、??双价抗虫水稻中表达量相比，在秧苗期，水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量显著??高于水稻（Ｐ＜０．０５）。在水稻分蘖期，单、双价抗虫水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量??差异不显著（Ｐ＞０．０５）。分蘖期过后，双价抗虫水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量大幅下降，??拔节期、扬花期和成熟期这３个生育期的ＣｒｙｌＡｂ蛋白表达量显著低于单价水稻??（Ｐ＜０．０５）。??Ａ?＿ｃｘｙｉＣａ?水箱??１＇２?１?
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势[J]. Clive James. 中国生物工程杂志. 2016(04)
[2]2016年全国农作物重大病虫害发生趋势预报[J]. 姜玉英,刘万才,陆明红,黄冲,刘杰. 中国植保导刊. 2016(02)
[3]二化螟Cry1Ac敏感和耐受品系的适合度差异及中肠蛋白酶活性比较[J]. 周艳聪,徐杨洋,陈秀萍,韩兰芝,贾变桃,彭于发. 环境昆虫学报. 2015(05)
[4]棉铃虫中肠氨肽酶APN4与Cry1Ac、Cry2Aa结合能力的比较[J]. 袁向东,葛朝虹,肖玉涛,梁革梅. 应用昆虫学报. 2015(05)
[5]二化螟人工饲养技术[J]. 李波,韩兰芝,彭于发. 应用昆虫学报. 2015(02)
[6]抗虫转基因水稻对非靶标生物的生态安全性研究进展[J]. 傅强,赖凤香,陈洋,李凯龙. 植物生理学报. 2013(07)
[7]转基因抗虫水稻的研发与应用及在我国的发展策略[J]. 徐秀秀,韩兰芝,彭于发,侯茂林. 环境昆虫学报. 2013(02)
[8]大螟人工饲养技术的初步研究[J]. 韩超,彭于发,侯茂林,陈法军,翟保平,韩兰芝. 应用昆虫学报. 2012(01)
[9]中国大螟研究历史、现状与展望[J]. 徐丽娜,李昌春,胡本进,周子燕,李晓霞. 中国农学通报. 2011(24)
[10]转基因水稻研发进展[J]. 朱祯. 中国农业科技导报. 2010(02)
博士论文
[1]Bt-Cry1Ac棉花抗性棉铃虫对Cry2Ab的抗性风险研究[D]. 罗术东.中国农业科学院 2007
硕士论文
[1]大螟天然庇护所及人工饲料的研究[D]. 刘卓荣.中国农业科学院 2007
本文编号：3599593
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3599593.html
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