稻瘟菌附着胞发育过程的分泌蛋白质组研究

发布时间:2022-01-25 04:57
  由稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是水稻的重要病害之一,给水稻生产造成了严重威胁。附着胞是稻瘟菌侵染水稻的关键结构,其形成是稻瘟菌侵染水稻的必要条件之一。分泌蛋白作为一类重要的致病因子,在植物病原真菌的致病过程中起着重要作用。但目前关于稻瘟菌分泌蛋白,尤其是附着胞发育过程中分泌蛋白的组成等均缺乏整体的了解。因此,开展稻瘟菌附着胞分泌蛋白质组的研究将丰富稻瘟菌的致病分子机理。本研究采用体外模拟稻瘟菌与水稻互作的研究策略,应用高通量的Shotgun技术,对稻瘟菌附着胞的分泌蛋白进行了高通量鉴定。应用Label-free技术和生物信息学技术,开展稻瘟菌附着胞发育不同阶段的分泌蛋白质组研究,并对其分泌蛋白的差异表达进行了分析。取得的结果如下:1、以PVDF膜为介质,对稻瘟菌分生孢子的萌发情况进行了研究;结果表明分生孢子在PVDF膜上可以正常萌发产生芽管和形成附着胞。采用超滤法,制备了高质量的稻瘟菌附着胞分泌蛋白;表明以PVDF膜作为介质可以模拟开展稻瘟菌早期侵染阶段的分泌蛋白质组研究。2、以附着胞形态建成过程中附着胞发育期(8 h)和附着胞成熟期(24 h)为时间点,... 

【文章来源】:华南农业大学广东省

【文章页数】:93 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

稻瘟菌附着胞发育过程的分泌蛋白质组研究


稻瘟菌侵染循环(引自Ribotetal.,2008)

示意图,稻瘟菌,信号通路,示意图


图 3 稻瘟菌信号通路示意图(引自 Rebollar et al.,2013)促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)对植物病应外界刺激有着关键作用,外界信号分子通过膜受体转换为膜内信号后,启 级联反应,引起靶蛋白和转录因子的磷酸化,实现对细胞的调控(Boudsocq。MK1 是稻瘟菌首次克隆到的 MAPK 基因,该基因敲除突变体附着胞和孢子的,但孢子的萌发不受影响(Nishidaetal.,1993)。MoMSB2 和 MoSHO1 调控 PM,MoMSB2 敲除突变体=附着胞形成明显受阻,对水稻致病性减弱;这两个敲除突变体在人工模拟的疏水表面几乎不能形成附着胞,PMK1 磷酸化水平低(Liuetal.,2011)。研究发现,MST50、MST11 和 MST7 都是 PMK1-MA的重要组分,参与了稻瘟菌附着胞的形成(Jin et al.,2013)。MPS1 作为稻

稻瘟菌,经典,锚定位,信号肽


用软件 WoLF PSORT(https://wolfpsort.hgc.jp/)和 TargetP 1.cbs.dtu.dk/services/TargetP/)对稻瘟菌中含有 N-端信号肽的蛋白析(Horton et al.,2007)。用软件 TMHMM Server v2.0(http://www.cbs.dtu.dk/services/TM有 N-端信号肽且定位于胞外的蛋白质进行跨膜结构预测,排除(Kroghet al.,2001)。用软件 big-PIPredictor(http://mendel.imp.ac.at/sat/gpi/gpi_se et al.,2004)对稻瘟菌中含有 N-端信号肽、定位于胞外、且不质进行 GPI 锚定位点分析,保留不含有锚定位点的蛋白,最终蛋白。

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本文编号:3607933

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