解淀粉芽孢杆菌FZB42抗菌脂肽bacillomycinD对禾谷镰孢菌拮抗机制的研究

发布时间：2022-02-10 14:54

　　芽胞杆菌属生防菌（Bacillus）是植物根围促生细菌（plant growth promoting rhizobacteria,PGPR）的典型代表,该类生防菌能产生丰富的抗菌物质,还能形成适应性和抗逆性强的芽孢,是最具应用价值的生防菌。丝状真菌禾谷镰孢菌（Fusarium graminearum）可引起小麦、大麦等作物的赤霉病,玉米茎、茎基部和根部的腐烂病,小麦以及玉米幼苗的枯萎病等,严重影响作物的产量,造成巨大经济损失。该病原菌还能产生对人畜健康造成严重威胁的真菌毒素,如DON等。防治禾谷镰孢菌引起的病害一直以化学防治为主,但化学农药的长期使用也导致了严重的农药残留以及抗药性问题。因此,急需开发安全、有效的防治药剂和措施。而芽胞杆菌类生防制剂是可供研究的途径之一。本研究前期发现解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）FZB42对禾谷镰孢菌具有较强的抑制活性。在本研究中,我们对FZB42菌株抑制禾谷镰孢菌的活性物质进行了鉴定,并研究了其拮抗机理。研究发现,解淀粉芽胞杆菌FZB42活菌及其粗提物对禾谷镰孢菌都具有较强的抑制作用。为了鉴定抑菌活性物质,我们... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
绪论
上篇 文献综述
    第一章 植物根围促生细菌的防病促生机理概述
        1 植物病害生防细菌的研发概况
        2 生防细菌对植物根围微生态的影响
        3 生防芽胞杆菌与植物互作机理研究进展
        4 生防芽胞杆菌诱导植物抗病性的产生
        5 根际拮抗芽胞杆菌的促生机理
    第二章 非核糖体肽类抗生素的结构、功能与调控
        1 脂肽类抗生素的结构、功能与调控
            1.1 脂肽类化合物简介
            1.2 表面活性素(Surfactin)
            1.3 泛革素(Fengycin)
            1.4 伊枯草菌素(Iturin)
        2 聚酮类抗生素的结构、功能与调控
        3 非核糖体肽类抗生素的生物合成
下篇 研究内容
    第一章 解淀粉芽胞杆菌FZB42抑菌物质的鉴定
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 酶和引物合成
            1.3 AK1S突变体的构建
            1.4 解淀粉芽胞杆菌FZB42对禾谷镰孢菌抑菌物质的鉴定
        2 结果与分析
            2.1 AK1S突变体的构建
            2.2 解淀粉芽胞杆菌FZB42对禾谷镰孢菌抑菌物质的鉴定
        3 讨论
    第二章 脂肽化合物BACILLOMYCIN D的纯化
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 Bacillomycin D粗提取的制备
            1.3 硅胶柱层析初步纯化Bacillomycin D
            1.4 制备型液相色谱纯化bacillomycin D
        2 结果与分析
            2.1 硅胶柱层析初步纯化bacillomycin D
            2.2 制备型液相色谱纯化bacillomycin D
        3 讨论
    第三章 BACILLOMYCIN D对FUSARIUM GRAMINEARUM形态生理、新陈代谢,基因表达的影响与防效
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 Bacillomycin D EC50的测定
            1.3 普通显微镜,扫描电镜,透射电镜对禾谷镰孢菌的孢子以及菌丝进行观察
            1.4 荧光染色测定禾谷镰孢菌G细胞活性
            1.5 荧光染色测定禾谷镰孢菌细胞内ROS的含量
            1.6 bacillomycin D对禾谷镰孢菌防效的检测
            1.7 Western blot
            1.8 禾谷镰孢菌DON毒素含量测定
            1.9 禾谷镰孢菌RNA的提取以及qRT-PCR分析
        2 结果与分析
            2.1 Bacillomycin D EC50的测定以及普通显微镜下分析bacillomycin D对禾谷镰孢菌的影响
            2.2 扫描电镜与透射电镜下分析bacillomycin D对禾谷镰孢菌的影响
            2.3 bacillomycin D对禾谷镰孢菌ROS累积以及细胞活性的影响
            2.4 Bacillomycin D对禾谷镰孢菌产孢率和孢子萌发率的影响
            2.5 Bacillomycin D对禾谷镰孢菌防效的检测
            2.6 bacillomycin D对禾谷镰孢菌DON毒素的影响
            2.7 Western检测bacillomycin D对禾谷镰孢菌FgHog1和FgMgv1磷酸化水平的影响
        3 讨论
参考文献
全文结论与创新点
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]Bacillus cereus CH2对茄子黄萎病的田间防治效果研究以及对根围微生态群落结构的影响[J]. 杨威,蒋志强,郭亚辉,郭坚华.  微生物学通报. 2011(05)
[2]油菜菌核病生防芽孢杆菌的分离鉴定及其脂肽化合物分析[J]. 薛鹏琦,刘芳,乔俊卿,伍辉军,冯致科,高学文.  植物保护学报. 2011(02)
[3]生防菌Pseudomonas fluorescens 2P24对甜瓜根围土壤微生物的影响[J]. 朱伟杰,王楠,郁雪平,王伟.  中国农业科学. 2010(07)
[4]拮抗细菌B-916培养液对水稻纹枯病菌的抗生活性及其抗菌物质的研究[J]. 陈志谊,许志刚,陆凡,刘永锋,陈毓苓.  江苏农业学报. 2000(03)
[5]菜丰宁B1浓缩菌粉的防病机理、生产工艺及应用技术研究[J]. 丁中,刘跃,徐志荣,王金生,张学君.  农药. 2000(08)
[6]增产菌的应用与研究[J]. 陈延熙,陈璧,潘贞德,王淑芝.  生物防治通报. 1985(02)



本文编号：3619046