桔小实蝇雄性附腺蛋白JHBP-like的功能研究

发布时间：2022-02-15 23:09

　　桔小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendel）是一种重要的世界性农业害虫,隶属于双翅目Diptera,实蝇科Trypetidae,果实蝇属Bactrocera Macquart。桔小实蝇可危害包括柑橘、番荔枝、杨桃、芒果以及枇杷等在内的多种重要果蔬,其成虫繁殖力高,适应能力强,造成的经济损失严重,已被多个国家和地区列为检疫性害虫。交配是昆虫选择最佳配偶以及产生后代最基本的行为方式。雄虫在交配过程中将精液转移至雌虫体内,以完成世代延续。精液中除用于授精的精子外,其它主要成分为雄性附腺合成并分泌的附腺液,雄性附腺蛋白（male accessory gland proteins,Acps）是附腺液中主要的功能活性分子,与其它因子如保幼激素（Juvenile hormone,JH）等共同影响雌雄虫的交配过程。本课题组前期利用转录组—蛋白质组关联分析的方法在桔小实蝇雄性附腺中鉴定到1个新的功能未知的Acp,根据功能保守性预测其具有典型的JHBP结构域,故命名为BdJHBP-like。本学位论文运用RT-PCR技术克隆获得BdJHBP-like开放阅读框（open reading ... 

【文章来源】：西南大学重庆市211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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第一章 文献综述
    1 桔小实蝇的重要性
    2 昆虫雄性附腺蛋白
    3 昆虫保幼激素结合蛋白的研究概述
    4 本研究的目的和意义
第二章 桔小实蝇BdJHBP-like克隆及表达模式分析
    1.材料与方法
        1.1 供试虫源
        1.2 试验主要仪器和试剂
        1.3 样品收集及总RNA提取
        1.4 基因组DNA去除及c DNA合成
        1.5 引物设计和合成
        1.6 目的片段克隆
        1.7 序列分析及进化树构建
        1.8 实时定量PCR
    2 结果与分析
        2.1 BdJHBP-like生物信息学分析
        2.2 BdJHBP-like系统发育分析
        2.3 BdJHBP-like的时空表达模式分析
    3 讨论与小结
第三章 不同诱导条件对BdJHBP-like表达的影响
    1 材料和方法
        1.1 供试昆虫
        1.2 实验试剂以及仪器
        1.3 生物节律
        1.4 JH类似物烯虫脂及20E处理
        1.5 数据分析
    2 结果与分析
        2.1 BdJHBP-like响应生物节律的表达模式
        2.2 保幼激素类似物烯虫酯对BdJHBP-like表达量的影响
        2.3 外源激素20E对 BdJHBP-like表达量的影响
    3 讨论与小结
第四章 BdJHBP-like参与雄成虫生殖行为的生理功能
    1 材料和方法
        1.1 供试昆虫
        1.2 主要试剂以及仪器
        1.3 dsRNA合成
        1.4 RNAi测定
    2 结果与分析
        2.1 桔小实蝇BdJHBP-like沉默效率检测
        2.2 桔小实蝇雄成虫RNAi
    3 讨论与小结
第五章 利用CRISPR/Cas9 系统敲除桔小实蝇BdJHBP-like
    1 材料和方法
        1.1 试验材料
        1.2 主要试剂以及仪器
        1.3 试验方法
    2 结果与分析
        2.1 靶标位点选择及sgRNA的合成
        2.2 胚胎注射及突变检测
        2.3 遗传筛选
    3 讨论与小结
第六章 主要结论以及研究展望
    1 主要结论
    2 研究展望
参考文献
在读期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]桔小实蝇综合防控措施[J]. 黎东生.  福建农业科技. 2014(02)
[2]CRISPR/Cas9介导的基因组定点编辑技术[J]. 方锐,畅飞,孙照霖,李宁,孟庆勇.  生物化学与生物物理进展. 2013(08)
[3]桔小实蝇takeout基因的克隆和序列分析及时空表达[J]. 胡黎明,申建梅,宾淑英,廖泓之,林进添.  南京农业大学学报. 2012(04)
[4]灰飞虱保幼激素结合蛋白基因的克隆及表达动态[J]. 贺秀婷,张亚楠,李飞,李国清,董双林.  南京农业大学学报. 2012(02)
[5]沙蟋飞行肌中保幼激素滴度的昼夜节律[J]. 张保常,蒋成吉,张青文,赵章武.  昆虫学报. 2011(07)
[6]甲基丁香酚对桔小实蝇雄虫寿命、交配及雌虫繁殖的影响[J]. 江婷婷,周湾,孟幼青,林云彪,施祖华.  中国生物防治. 2010(04)
[7]桔小实蝇研究进展[J]. 张彬,刘映红,赵岚岚,周旭.  中国农学通报. 2008(11)
[8]保幼激素和蜕皮激素对德国小蠊聚集信息素生物合成的影响[J]. 杨惠,张金桐,邓兵,李宏.  中国媒介生物学及控制杂志. 2008(01)
[9]桔小实蝇生物学特点及其防治研究概述[J]. 谢琦,张润杰.  生态科学. 2005(01)
[10]柑桔小实蝇生物学特性及其防治研究[J]. 沈发荣,周又生,赵焕萍,施琼,李德龙.  西北林学院学报. 1997(01)



本文编号：3627440