基于2b-RAD技术的家蚕BmNPV抗性遗传的研究

发布时间：2022-07-22 18:30

　　家蚕是鳞翅目模式昆虫,也是重要的经济昆虫,蚕丝具有很高的经济价值,是很多地区农民的主要收入来源。但是,家蚕病害的发生也给桑蚕业带来了极大困扰,严重制约了蚕桑产业的稳定发展。病毒病是蚕业生产上危害最大的疾病,其中家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV）引起的血液型脓病危害最大,约占蚕病损失的70%,该病目前尚无法治疗。因此从生产和安全方面来讲,家蚕核型多角体病毒抗性基因的寻找和抗性品种的培育都是一项重要工作。本课题采用抗Bm NPV蚕品种华康2号一代杂交种来源的抗性品系AN、抗Bm NPV蚕品种野三元N中的抗性亲本野BN和易感性品系C108作为研究材料,在明确供试蚕品种对BmNPV抵抗力的基础上,构建抗性遗传分离群体,利用2b-RAD分析技术,探索AN、野BN品种的BmNPV抗性遗传机制,主要实验内容和结果如下:1.家蚕AN、野BN与C108品系的BmNPV抗性鉴定抗性品系AN在2龄起蚕Bm NPV多角体添食的半数致死浓度（LC50）为2.154×109个/m L、半数致死剂量（LD50）为1.436×107个/头蚕。... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩写
第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 BmNPV的研究概况
        1.2.1 Bm NPV的侵染过程
        1.2.2 Bm NPV感染症状
    1.3 家蚕抗BmNPV的研究进展
        1.3.1 影响家蚕对Bm NPV抵抗性的因素
        1.3.2 蛋白水平上家蚕对Bm NPV抗性的研究进展
        1.3.3 基因水品上家蚕抗Bm NPV的研究进展
        1.3.4 家蚕对Bm NPV的抗性及遗传规律研究
    1.4 RAD-seq技术与 2b-RAD技术的发展及应用
        1.4.1 RAD-seq技术的发展
        1.4.2 2b-RAD技术及应用
    1.5 本课题的研究目的、意义和方法
第2章 家蚕AN品系BmNPV抗性基因的 2b-RAD分析
    2.1 引言
    2.2 主要实验仪器和试剂
        2.2.1 主要实验仪器
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 常用溶液及缓冲液
    2.3 实验材料
        2.3.1 供试蚕品种（品系）
        2.3.2 遗传材料组配方式
    2.4 实验方法
        2.4.1 Bm NPV多角体病毒制备接种及AN品系耐受检验
        2.4.2 亲本及遗传分离群体病毒接种与取材
        2.4.3 家蚕基因组DNA提取
        2.4.4 2b-RAD建库流程
        2.4.5 全基因组范围SNP筛查和分型
        2.4.6 各染色体SNP标记的BmNPV抗性关联指数（SNP-index）与抗性贡献率分析
    2.5 实验结果
        2.5.1 供试品种Bm NPV抗性鉴定与遗传模式分析
        2.5.2 2b-RAD测序结果分析
        2.5.3 AN品系各染色体BmNPV抗性相关SNP-index分布及贡献率
    2.6 讨论
第3章 家蚕野BN品系BmNPV抗性基因的 2b-RAD分析
    3.1 引言
    3.2 主要实验仪器和试剂
    3.3 实验材料
        3.3.1 供试蚕品种（品系）
        3.3.2 遗传材料组配方式
    3.4 实验方法
        3.4.1 Bm NPV多角体病毒制备接种及野BN品系耐受检验
        3.4.2 遗传分离群体病毒接种与取材
        3.4.3 家蚕基因组DNA提取
        3.4.4 2b-RAD建库流程
        3.4.5 全基因组范围SNP筛查和分型
        3.4.6 各染色体SNP标记的BmNPV抗性关联指数（SNP-index）与抗性贡献率分析
    3.5 实验结果
        3.5.1 添毒浓度选择
        3.5.2 2b-RAD测序结果分析
        3.5.3 家蚕野BN各染色体BmNPV抗性相关SNP-index分布及贡献率
    3.6 讨论
第4章 基于 2b-RAD技术的家蚕AN品系与野BN品系的抗BmNPV的差异化分析
    4.1 引言
    4.2 主要实验仪器和试剂
    4.3 实验材料
    4.4 实验方法
    4.5 实验结果
        4.5.1 基于 2b-RAD技术的各染色体抗性贡献率分析
        4.5.2 基于高值SNP-index的标记个数的差异分析
    4.6 讨论
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]家蚕AN品系的核型多角体病毒（BmNPV）抗性基因连锁与定位分析[J]. 武山山,徐晴,余俊杰,张业顺,何小柏,覃光星,徐安英,张国政.  蚕业科学. 2017(02)
[2]家蚕抗核型多角体病毒基因与蛋白的研究进展[J]. 覃吕高,屈达才,李俊,徐周徐.  南方农业学报. 2013(05)
[3]耐家蚕核型多角体病毒病蚕品种“华康2号”的育成[J]. 徐安英,林昌麒,钱荷英,孙平江,张月华,刘明珠,李龙.  蚕业科学. 2013(02)
[4]家蚕品种野三元耐微量拟除虫菊酯类农药污染新品系的筛选[J]. 吴阳春,覃光星,许平震,钱平,陶鸣,杨斌,丁志用,赵巧玲,徐安英,张国政.  蚕业科学. 2012(04)
[5]高通量测序技术及其应用[J]. 王兴春,杨致荣,王敏,李玮,李生才.  中国生物工程杂志. 2012(01)
[6]家蚕新品种野三元试养初报[J]. 匡英秋,姚金宝,彭晓虹,郑蜀云.  中国蚕业. 2009(01)
[7]野三元的品种性状及繁育要点[J]. 宋世兵,钟晓霞,李莉.  北方蚕业. 2008(04)
[8]强健性多丝量蚕品种“野三元”的育成[J]. 吴阳春,钱平,何斯美.  安徽农业科学. 2008(33)
[9]家蚕对核型多角体病的抗性及遗传规律的研究[J]. 陈克平，林昌麒，姚勤.  蚕业科学. 1996(03)
[10]家蚕对核型多角体病毒病抵抗性遗传规律的研究[J]. 孟智启.  蚕业科学. 1982(03)

硕士论文
[1]利用RAD-seq测序构建美洲黑杨×小叶杨高密度遗传连锁图谱[D]. 王莹.南京林业大学 2014



本文编号：3665115