白屈菜红碱的抑菌活性及其抑菌机理研究

发布时间：2022-10-09 16:03

　　白屈菜为罂粟科白屈菜属植物,是一种有着很高开发前景的新型药用植物。白屈菜中的主要活性成分为白屈菜红碱,白屈菜红碱是一种苯并菲啶型生物碱,具有抗炎、抗真菌等生物学活性。本文研究的是白屈菜红碱的抑菌活性及抑菌机理。分离筛选三种真菌,经18SrDNA鉴定分别为稻黑孢菌属、赤霉菌属和球毛壳菌属。将白屈菜红碱加入PDA培养基中制成浓度分别为5 X 10-3 mg/mL,1.0×10-2mg/mL,1.5×10-2mg/mL,2.0×10-2mg/mL的带药培养基,利用分离得到的稻黑孢菌和赤霉菌进行白屈菜红碱抑菌活性实验,结果显示随着白屈菜红碱浓度增加,其抑菌效果越明显,抑菌率越高,其中当浓度为2.0×10-2mg/mL,白屈菜红碱对稻黑孢菌的抑菌率高达95%,对赤霉菌的抑菌率为92%。本文从以下三个方面研究白屈菜红碱的抑菌机理:（1）白屈菜红碱对真菌细胞壁细胞膜的影响。（2）白屈菜红碱对孢子内ROS含量的影响。（3）白屈菜红碱对DNA的影响。根据光学显微镜、扫描电镜的结果显示白屈菜红碱可以使稻黑孢菌菌丝产生褶皱,在透射电镜下可以观察到菌丝被白屈菜红碱破坏产生的孔洞;测试水稻黑孢菌细胞壁的通透性,... 

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 白屈菜红碱的介绍
        1.1.1 白屈菜的简介
        1.1.2 白屈菜红碱的简介
    1.2 水稻黑孢菌和赤霉菌简介
        1.2.1 水稻黑孢菌简介
        1.2.2 赤霉菌简介
    1.3 白屈菜红碱的提取方法
        1.3.1 微芯片电泳分离法
        1.3.2 微波辅助萃取法
        1.3.3 大孔树脂吸附分离纯化
    1.4 白屈菜红碱的生物学活性
        1.4.1 抗炎作用
        1.4.2 抗菌作用
        1.4.3 抗癌作用
        1.4.4 对胃溃疡的保护作用
        1.4.5 生物防治
    1.5 白屈菜红碱的抑菌机理研究
        1.5.1 白屈菜红碱对细胞壁和细胞膜的作用
        1.5.2 ROS在细胞体内的积累及其检测
        1.5.3 白屈菜红碱对DNA的作用
    1.6 研究的内容与意义
2 菌种的分离筛选与鉴定
    2.1 实验材料
        2.1.1 水稻叶片
        2.1.2 试剂与仪器
        2.1.3 溶液的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株的分离筛选与纯化
        2.2.2 真菌的初步分类
        2.2.3 CTAB法提取真菌DNA
        2.2.4 真菌基因组ITS区段的获得
        2.2.5 PCR产物的测序及序列分析
        2.2.6 真菌包子的产生与收集
        2.2.7 孢子计数
    2.3 结果与分析
        2.3.1 真菌的分离纯化
        2.3.2 真菌的分子生物学鉴定
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
3 白屈菜红碱抑菌活性研究
    3.1 实验材料
        3.1.1 菌种
        3.1.2 实验试剂与仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 白屈菜红碱抑菌活性检测
    3.3 结果与分析
        3.3.1 白屈菜红碱对两种真菌的抑菌活性检测
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
4 白屈菜红碱抑菌机理研究
    4.1 实验材料
        4.1.1 供试菌株
        4.1.2 试剂与仪器
        4.1.3 培养基
    4.2 试验方法
        4.2.1 白屈菜红碱对菌丝形态的影响
        4.2.2 白屈菜红碱对孢子萌发率的影响
        4.2.3 白屈菜红碱对真菌细胞壁细胞膜通透性的影响
        4.2.4 白屈菜红碱作用后孢子内ROS检测
        4.2.5 DNA片段化分析
    4.3 结果
        4.3.1 白屈菜红碱对水稻黑孢菌菌丝及孢子形态影响
        4.3.2 白屈菜红碱对真菌细胞壁细胞膜通透性影响
        4.3.3 白屈菜红碱对孢子萌发率的影响
        4.3.4 白屈菜红碱作用后孢子内ROS检测
        4.3.5 DNA片段化分析
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]稻黑孢菌生物学特性及杀菌剂筛选[J]. 李戌清,傅鸿妃,李红斌.  长江蔬菜. 2016(06)
[2]白屈菜红碱对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用[J]. 徐香琴,黄松,杜先华,周家乐,黄火娣.  中国实验方剂学杂志. 2014(21)
[3]10种杀菌剂对水稻稻叶褐条斑病菌的室内毒力[J]. 冯爱卿,陈深,朱小源,苏菁,汪文娟,汪聪颖,杨健源,曾列先.  植物保护. 2014(04)
[4]白屈菜红碱药理活性研究进展[J]. 王培卿,尹震花,康文艺.  中国中药杂志. 2013(17)
[5]热处理对草莓品质与活性氧代谢影响的多变量解析[J]. 李健,张萌,李丽萍,罗瑶,孙沙沙,王贵禧,杨宏伟,王友升.  食品科学. 2013(16)
[6]白屈菜植株中红碱提取工艺及含量变化研究[J]. 韦庆慧,马玲,赵敏.  北京林业大学学报. 2013(02)
[7]水稻恶苗病的发生与防治[J]. 许海霞,王孝兵,赵德华,沈宝祥.  现代农业科技. 2012(24)
[8]白屈菜药理作用研究进展[J]. 才玉婷,武蕾蕾,常乐,刘娟.  牡丹江医学院学报. 2012(02)
[9]干旱胁迫对甘草幼苗生长和渗透调节物质含量的影响[J]. 刘艳,陈贵林,蔡贵芳,张中霞,岳鑫.  西北植物学报. 2011(11)
[10]白屈菜红碱对肝纤维化大鼠血清透明质酸和谷丙转氨酶的影响[J]. 汪煜华,李映菊,刘运美.  南华大学学报(医学版). 2010(03)

博士论文
[1]壳聚糖基生物质抑菌材料的制备及其应用研究[D]. 李知函.华南理工大学 2016

硕士论文
[1]Burkholderia菌磁性纳米颗粒特征及类酶活性研究[D]. 陈国龙.东北林业大学 2016
[2]飞龙掌血抑菌成分作用机制研究[D]. 王培卿.河南大学 2014
[3]壳寡糖诱导的灰霉孢子胞内活性氧动态及蛋白质差异表达研究[D]. 马增新.中国海洋大学 2013
[4]血根碱和白屈菜红碱及其衍生物的抑菌和杀螨活性[D]. 郑峰.西北农林科技大学 2011
[5]白屈菜红碱对变形链球菌形态学影响的电镜观察[D]. 徐冬雪.中国医科大学 2010
[6]血根碱及白屈菜红碱抑菌和杀螨活性构效关系[D]. 胡海军.西北农林科技大学 2008



本文编号：3688941