硫营养影响水稻与PXO99互作机理的分析

发布时间：2022-12-06 03:20

　　水稻白叶枯病是由革兰氏阴性黄单孢菌水稻变种（Xantgomonas oryzae pv.Oryzae,Xoo）所引起的一种细菌性病害,细菌通常从水孔或伤口侵入水稻,沿叶脉维管束产生灰白色病斑。水稻遭受白叶枯病后,一般减产10%以上,严重时甚至绝收,是仅次于稻瘟病的水稻第二大病害。许多含硫化合物参与了植物抵抗各种病虫害的过程,并且在水稻苗期施用硫酸铵较硝铵、尿素和碳铵更能提高稻苗的抗病能力,因此推测水稻硫代谢与其抗病能力密切相关。Xa21为水稻白叶枯病PXO99的抗性基因,PXO99中含Ax21无毒因子,其与Xa21互作诱导水稻产生抗性。本文中,我们主要以CX621B（转入Xa21基因的转基因水稻）和D62B（未转入Xa21基因）两种不同的水稻作为材料研究水稻的抗PXO99情况。通过不同硫营养梯度处理水稻,用PXO99进行侵染接种叶片,测量叶片的病斑长度,发现在0-0.5mM时,随着硫浓度的升高,病斑长度逐渐升高;在3.3-10mM时,随着硫浓度的进一步升高,病斑长度逐渐降低。而在外源茉莉酸或其生物合成抑制剂存在下,对于CX621B,高浓度硫酸盐下的病斑长度降低至0.5mM病斑长度的50... 

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文献综述
    第一章 硫对植物抗病性的研究进展
        1 硫营养与植物抗病性的关系
        2 Xa21与白叶枯菌(Xoo)之间的关系
        3 含硫化合物与植物抗病性的关系
    第二章 植物激素对植物抗病性的研究进展
        1 植物激素研究进展
            1.1 JA(茉莉酸)/SA(水杨酸)/ET(乙烯)信号途径
            1.2 ABA(脱落酸)
    第三章 本课题研究目的及意义
    技术路线
第二部分 研究内容
    第一章 硫营养在Xa21转基因水稻抗PX099中的生理作用分析
        1 前言
        2 材料与方法
            2.1 分子生物学试剂与生化试剂
            2.2 菌株与载体
            2.3 实验方法
                2.3.1 水稻白叶枯菌PX099培养和洗涤
            2.4 转基因水稻CX621B与野生型水稻D62B培养和生理分析
                2.4.1 转基因水稻CX621B与野生型水稻D62B萌发与培养
            2.5 转基因水稻(CX621B)和野生型水稻(D62B)的生理检测
                2.5.1 水稻叶片中叶绿素的提取
                2.5.2 水稻叶片中木质素的提取
                2.5.3 水稻叶片中谷胱甘肽(GSH)的提取
        3 实验结果
            3.1 两种水稻(CX621B和D62B)病斑长度的测量
            3.2 两种水稻(CX621B和D62B)生理测定
                3.2.1 不同的硫酸盐浓度对叶绿素含量的检测
                3.2.3 不同的硫酸盐浓度对水稻木质素含量的检测
                3.2.5 不同硫酸盐梯度处理对水稻叶片中GSH含量的影响
        4 讨论
    第二章 硫营养在Xa21转基因水稻抗PX099中相关激素表达分析
        1 前言
        2 材料与方法
            2.1 酶与试剂
            2.2 实验材料
            2.3 水稻叶片总RNA的提取
            2.4 反转录
            2.5 RT-PCR引物构建与筛选
            2.6 RT-PCR扩增条件及程序
            2.7 水稻内源JA、ABA响应基因的筛选与SA的检测
                2.7.1 外源JA(茉莉酸)和ABA(脱落酸)处理水稻
                2.7.2 水稻内源SA(水杨酸)含量检测
        3 实验结果
            3.1 脱落酸响应基因的筛选
                3.1.1 蛋白质同源性比对
                3.1.2 OsRD22转录表达分析
                3.1.3 OsLEA7转录表达分析
                3.1.4 OsLTP4转录表达分析
            3.2 茉莉酸响应基因的筛选
            3.3 CX621B和D62B叶片中激素水平的分析
                3.3.1 CX621B和D62B中OsJAZ8相对转录水平的测定
                3.3.2 CX621B和D62B中OsRD22相对转录水平的测定
            3.4 不同的硫浓度条件下处理CX621B与D62B中SA的含量
            3.5 不同的硫浓度条件Xa21的表达量
        4 讨论
结论与展望
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢



本文编号：3710952