普通大蓟马对多杀菌素的抗性监测及抗性机理初探

发布时间：2022-12-09 20:24

　　普通大蓟马Megalurothrips usitatus （Bagnall）,属缨翅目Thysanoptera蓟马亚族 Thripina （Stephens） Priesner 大蓟马属 Megalurothrips Bagnall,是一种非常重要的农林业害虫。在马来西亚,普通大蓟马是为害杧果的最主要的害虫之一,危害严重,防治困难,给马来西亚芒果产业造成了巨大损失。在非洲和印度等地,普通大蓟马严重危害当地豆科作物,多年来一直未能得到有效防治。在我国海南省,普通大蓟马是重要经济作物豇豆的最主要的害虫,严重影响豇豆品质,给农户增产增收造成了很大的影响。目前针对该害虫主要的防治方法为化学防治,其中多杀菌素是当家农药品种之一。由于多杀菌素的大量使用,普通大蓟马对其抗性问题急需研究。本论文主要分为四个部分:第一部分为普通大蓟马敏感种群的建立和抗性种群的筛选;第二部分为普通大蓟马对多杀菌素的抗性监测;第三部分为普通大蓟马对多杀菌素抗性机制研究;第四部分为普通大蓟马抗性治理。主要试验结果如下:（1）本文通过室内夏威夷敏感种群的引进与筛选,采用豆管药膜法建立了普通大蓟马对多杀菌素的室内敏感毒力基线,其... 

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 普通大蓟马及其危害
    1.2 蓟马抗药性研究现状
    1.3 多杀菌素概述
        1.3.1 多杀菌素
        1.3.2 多杀菌素抗药性研究现状
    1.4 昆虫抗药性与消化道细菌多样性的关系
    1.5 试验方法简介
        1.5.1 AccQ·Tag高效液相色谱法
        1.5.2 微生物多样性测序技术
    1.6 研究内容
    1.7 目的意义
2 材料与方法
    2.1 试验药品
    2.2 仪器设备
    2.3 普通大蓟马对多杀菌素敏感毒力基线的建立
        2.3.1 供试昆虫
        2.3.2 室内生物测定方法
        2.3.3 数据处理与分析
    2.4 普通大蓟马田间种群对多杀菌素的抗性监测
        2.4.1 供试昆虫
        2.4.2 室内生物测定方法
        2.4.3 数据处理与分析
    2.5 普通大蓟马对多杀菌素抗性机理研究
        2.5.1 酶活测定
        2.5.2 普通大蓟马对多杀菌素抗性与游离氨基酸的关系
        2.5.3 普通大蓟马敏感种群及多杀菌素抗性种群消化道细菌多样性测定
    2.6 普通大蓟马不同种群亲缘关系鉴定
        2.6.1 供试昆虫
        2.6.2 DNA提取
        2.6.3 PCR扩增与测序
        2.6.4 PCR产物回收与纯化
        2.6.5 质粒连接
        2.6.6 质粒转化及白斑筛选
        2.6.7 转化子检测
        2.6.8 测序
        2.6.9 数据处理
    2.7 替代药剂研究与筛选
        2.7.1 普通大蓟马对乙基多杀菌素敏感毒力基线建立及抗性监测
        2.7.2 5种挥发性小分子化合物室内筛选
        2.7.3 田间药效试验
3 结果与分析
    3.1 普通大蓟马敏感种群的建立
        3.1.1 不同龄期的形态观察
        3.1.2 敏感毒力基线的建立
    3.2 普通大蓟马田间种群对多杀菌素的抗性监测结果
        3.2.1 2015年抗性监测结果
        3.2.2 2016年抗性监测结果
    3.3 普通大蓟马对多杀菌素抗性与酶活的关系
        3.3.1 普通大蓟马敏感种群及多杀菌素抗性种群体内SOD活力变化
        3.3.2 普通大蓟马敏感种群及多杀菌素抗性种群体内CAT活力变化
        3.3.3 普通大蓟马敏感种群及多杀菌素抗性种群体内GST活力变化
    3.4 游离氨基酸检测结果
        3.4.1 不同种群体内氨基酸丰度与抗性的关系
        3.4.2 氨基酸含量与抗性的关系
    3.5 普通大蓟马消化道细菌多样性结果
        3.5.1 消化道细菌总DNA提取及检测结果
        3.5.2 消化道细菌16sRNA基因PCR扩增结果
        3.5.3 OTU分析
        3.5.4 Alpha多样性分析
        3.5.5 Beta多样性分析
        3.5.6 不同种群消化道细菌群落物种组成分析
        3.5.7 消化道细菌多样性与抗性相关性分析
        3.5.8 部分细菌(以属为分类单位)与普通大蓟马对多杀菌素抗性的关系
    3.6 不同种群亲缘关系鉴定
        3.6.1 PCR产物检测
        3.6.2 遗传距离计算及系统发育树构建
    3.7 替代药剂筛选
        3.7.1 普通大蓟马对乙基多杀菌素的敏感毒力基线的建立及抗性监测
        3.7.2 5种挥发性小分子化合物对普通大蓟马室内生测结果
        3.7.3 田间药效试验结果分析
4 讨论
    4.1 普通大蓟马对多杀菌素敏感毒力基线建立与抗性监测
    4.2 普通大蓟马对多杀菌素的抗性机理研究
        4.2.1 普通大蓟马对多杀菌素抗性与酶活的关系
        4.2.2 普通大蓟马对多杀菌素抗性与游离氨基酸的关系
        4.2.3 普通大蓟马对多杀菌素抗性与消化道细菌多样性的关系
        4.2.4 解毒酶、游离氨基酸及消化道细菌互作与抗性的关系
    4.3 普通大蓟马不同种群亲缘关系
    4.4 普通大蓟马防治替代药剂的研究与筛选
5 结论
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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本文编号：3715315