基于单克隆抗体的番茄黑环病毒血清学检测技术

发布时间：2022-12-17 20:01

　　番茄黑环病毒（Tomato black ring virus, TBRV）是严重危害多种草本及木本植物的口岸检疫性有害生物,加强口岸检验检疫是防止其入侵我国的关键。本研究以制备的抗TBRV特异性单克隆抗体（monoclonal antibody, MAb）建立TBRV的血清学检测技术,旨在为该病毒的检测和口岸检验检疫提供技术支持。以提纯的TBRV粒子为免疫抗原,利用杂交瘤细胞技术制备4株能分泌抗TBRV单抗的杂交瘤细胞（10A8, 21A8, 21B8和8D3）及其单抗腹水。4株单抗腹水的间接酶联免疫吸附试验（indirect enzymelinked immunosorbent assay, indirect-ELISA）效价达到10-7。Western blot分析单抗特异性表明,4株单抗均与感染植物中的TBRV外壳蛋白亚基发生特异性免疫反应,而不与健康植物组织发生反应。利用制备的单抗建立检测TBRV的斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA）和组织印迹酶联免疫吸附试验（Tissue printELISA） 2种血清学方法。建立的Dot-ELISA和Tissue print-ELI... 

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 番茄黑环病毒的提纯
        1.2.2 杂交瘤细胞和单克隆抗体制备
        1.2.3 Western blot分析单克隆抗体的特异性
        1.2.4 检测TBRV的Dot-ELISA方法及其灵敏度和特异性分析
        1.2.5 检测TBRV的Tissue print-ELISA方法及其特异性分析
2 结果与分析
    2.1 TBRV病毒粒子的提纯与形态观察
    2.2 杂交瘤细胞的筛选和克隆
    2.3 单克隆抗体腹水制备及抗体类型和效价鉴定
    2.4 单克隆抗体特异性的Western blot分析
    2.5 Dot-ELISA方法的建立及其特异性和灵敏度鉴定
    2.6 Tissue print-ELISA方法的建立及其特异性鉴定
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3720556