球孢白僵菌高毒力菌株的筛选及其与小菜蛾互作相关基因的转录组分析

发布时间：2023-01-08 18:44

　　小菜蛾（Plutella xylostella）是一种世界性害虫,主要危害十字花科植物。不仅危害严重,而且由于化学农药的大量使用,已发现该虫对多种化学农药产生了较强的抗药性。开发新型有效的生物农药是解决当前小菜蛾防治难题的有效途径之一。球孢白僵菌（Beauveria bassiana）是当前研究和应用最广泛的真菌类生物农药之一,筛选对小菜蛾具有高毒力的球孢白僵菌菌株,并分析球孢白僵菌与小菜蛾之间的互作相关基因,是进一步提高球孢白僵菌对小菜蛾防治效果的重要基础。本研究首先通过对不同地区采集的球孢白僵菌菌株进行初步筛选,获得对小菜蛾致病力最强的高毒力菌株。其次,以此高毒力菌株为研究对象,将纯培养的球孢白僵菌、未受感染的小菜蛾幼虫和球孢白僵菌侵染小菜蛾48h的虫菌混合样品分别进行转录组测序,筛选侵染及致病过程中真菌和昆虫差异表达的基因,并分析相关基因的功能,探讨球孢白僵菌与小菜蛾之间互作的相关基因,为球孢白僵菌菌株的基因改良奠定基础。主要研究结果如下:1.球孢白僵菌对小菜蛾高毒力菌株的筛选:选择分离自鳞翅目昆虫的球孢白僵菌菌株20株,对小菜蛾2龄幼虫进行生物测定,初步筛选出对小菜蛾2龄幼虫毒... 

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
缩写和符号清单
1 文献综述
    1.1 小菜蛾的生物学特性及防控措施
        1.1.1 形态特征
        1.1.2 生活史及习性
        1.1.3 小菜蛾的发生及危害特点
        1.1.4 小菜蛾的防控措施
    1.2 球孢白僵菌的研究现状
        1.2.1 球孢白僵菌的生物学特性
        1.2.2 球孢白僵菌的安全性
        1.2.3 球孢白僵菌的致病性
        1.2.4 温度和湿度对球孢白僵菌的致病性影响
    1.3 昆虫病原真菌致病机理及相关基因研究进展
        1.3.1 昆虫病原真菌对昆虫致病机理
        1.3.2 昆虫病原真菌致病相关基因研究进展
    1.4 昆虫对病原真菌的免疫应答机制及免疫应答相关基因研究进展..
        1.4.1 昆虫对病原真菌的免疫反应机制
        1.4.2 昆虫对病原真菌的免疫应答相关基因研究进展
2 引言
    2.1 研究的目的和意义
    2.2 研究内容
    2.3 技术路线图
3 材料与方法
    3.1 供试菌株和昆虫
        3.1.1 供试菌株
        3.1.2 供试昆虫
        3.1.3 培养基
        3.1.4 试验仪器
    3.2 试验方法
        3.2.1 供试菌株培养
        3.2.2 孢子悬浮液制备
        3.2.3 同浓度条件下高致病力菌株的初步筛选
        3.2.4 球孢白僵菌与小菜蛾互作相关基因转录组分析
4 结果与分析
    4.1 小菜蛾的孵化率、化蛹率、羽化率及全周期与温度的关系
    4.2 室内致病力测定
        4.2.1 感染菌株的症状
        4.2.2 相同浓度条件下高致病力菌株的初步筛选
        4.2.3 不同浓度条件下高毒力菌株对小菜蛾幼虫的毒力测定
        4.2.4 高毒力菌株在不同温度下对小菜蛾2龄幼虫的毒力测定.
    4.3 侵染小菜蛾48h的球孢白僵菌转录组分析
        4.3.1 数字基因表达谱文库
        4.3.2 显著差异表达基因的筛选
        4.3.3 差异基因的GO功能显著性富集分析
        4.3.4 差异基因的Pathway显著性富集分析
        4.3.5 差异表达基因中与侵染相关基因的分析
        4.3.6 荧光定量PCR结果分析
    4.4 感染球孢白僵菌的小菜蛾幼虫免疫应答转录组分析
        4.4.1 数字基因表达谱文库
        4.4.2 显著差异表达基因的筛选
        4.4.3 差异基因的GO功能显著性富集分析
        4.4.4 差异基因的Pathway显著性富集分析
        4.4.5 差异表达基因中与免疫应答相关基因分析
        4.4.6 荧光定量PCR结果分析
5 讨论
    5.1 温度对小菜蛾生长发育的影响
    5.2 小菜蛾高致病力球孢白僵菌菌株的筛选
    5.3 侵染小菜蛾48h的球孢白僵菌的相关基因分析
    5.4 感染球孢球孢白僵菌48h的小菜蛾免疫应答相关基因分析
6 结论
参考文献
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]球孢白僵菌对烟粉虱和小菜蛾的致病力及其侵染差异分析[J]. 周哲宇,张航航,吴昊,朱虹.  中国生物防治学报. 2016(06)
[2]感染球孢白僵菌的烟粉虱若虫免疫应答转录组分析[J]. 王登杰,吴圣勇,雷仲仁,王海鸿.  应用昆虫学报. 2015(01)
[3]球孢白僵菌生物学特性研究进展及其杀虫效果展望[J]. 李嘉,任佳慧,刘艳微,王冰,关兵兵,张航,冯树丹.  哈尔滨师范大学自然科学学报. 2014(04)
[4]感染球孢白僵菌的家蚕免疫应答差异表达基因分析[J]. 侯成香,覃光星,耿涛,高坤,潘中华,钱荷英,郭锡杰.  昆虫学报. 2014(01)
[5]球孢白僵菌生物学特性与其对不同昆虫侵染差异相关性分析[J]. 曹伟平,宋健,甄伟,王金耀,冯书亮,杜立新.  中国生物防治学报. 2013(04)
[6]一株小菜蛾高致病性球孢白僵菌菌株的筛选及其可湿性粉剂的田间药效试验[J]. 徐延平,仇飞,黄勃,王滨,李增智.  中国生物防治学报. 2013(03)
[7]烟粉虱血细胞对白僵菌的防御反应[J]. 任洁,韩雪梅,刘昭,雷仲仁.  中国蔬菜. 2013(12)
[8]小菜蛾的生物学特性与防治技术[J]. 李明桃.  中国瓜菜. 2013(02)
[9]小菜蛾抗药性研究现状及防治措施[J]. 刘霞,牛芳,王开运.  农药科学与管理. 2013(02)
[10]昆虫海藻糖酶的基因特性及功能研究进展[J]. 唐斌,魏苹,陈洁,王世贵,张文庆.  昆虫学报. 2012(11)

博士论文
[1]对褐飞虱高毒力的真菌菌株筛选及其应用研究[D]. 李茂业.安徽农业大学 2012

硕士论文
[1]东亚飞蝗免疫与繁殖相关基因表达分析[D]. 刘晓君.杭州师范大学 2015
[2]赤拟谷盗海藻糖酶基因调控几丁质合成及能量代谢的功能研究[D]. 魏苹.杭州师范大学 2013
[3]家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin6基因转录特异性分析及多克隆抗体制备[D]. 王彦云.苏州大学 2013
[4]不同寄主饲养的小菜蛾对菜蛾啮小蜂生物学和适应性的影响[D]. 李先伟.西北农林科技大学 2013
[5]家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin5多克隆抗体制备及组织表达分析[D]. 李国胜.苏州大学 2013



本文编号：3728989