EoNPV感染两近缘种茶尺蠖的差异研究

发布时间：2023-02-19 08:00

　　小茶尺蠖Ectropis obliqua和灰茶尺蛾Ectropis grisescens为茶尺蠖两近缘种,是茶园中最主要的食叶类害虫。由于二者在外观形态、生物学习性方面极其相似,一直以来作为茶尺蠖一个种进行田间防治。近年来,在茶园使用茶尺蠖核型多角体病毒(E.obliqua nucleopolyhedrovirus,EoNPV)进行防治时出现不同地区防治效果差异性较大的现象,进而研究明确茶尺蠖存在两近缘种。本文使用三种不同浓度EoNPV处理小茶尺蠖和灰茶尺蛾,比较分析EoNPV对两近缘种茶尺蠖致死率的差异,进一步验证田间防治中EoNPV对小茶尺蠖和灰茶尺蛾的防治效果差异。同时,采用浓度为1×10⁷ PIB/mL的EoNPV喂饲小茶尺蠖和灰茶尺蛾,检测病毒粒子在两近缘种茶尺蠖体内增殖动态的差异,以期探索EoNPV对两近缘种茶尺蠖致死率差异原因。结合灰茶尺蛾感染EoNPV后的转录组数据分析,筛选免疫相关的抗菌肽基因,采用qPCR检测两近缘种茶尺蠖体内抗菌肽基因表达差异,进一步从抗菌肽基因表达的角度解释EoNPV对两近缘种茶尺蠖产生致死率差异的机理。通过以上实验本研究得...

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 昆虫病毒入侵
    1.2 昆虫的免疫机制
        1.2.1 细胞免疫
        1.2.2 体液免疫
    1.3 抗菌肽基因研究进展
        1.3.1 抗菌肽分类
        1.3.2 抗菌功能研究
        1.3.3 昆虫抗菌肽调控途径研究
        1.3.4 果蝇和烟草天蛾体内抗菌肽基因调控途径
    1.4 转录组测序技术在昆虫免疫研究中的应用
        1.4.1 转录组测序在昆虫研究中的应用
        1.4.2 转录组在病毒与宿主互作之间的研究应用
    1.5 两近缘种茶尺蠖的研究概况
        1.5.1 两近缘种茶尺蠖的发现与确定
        1.5.2 病毒与两近缘种茶尺蠖互作研究
    1.6 研究目的与意义
    1.7 技术路线
第二章 EoNPV感染两近缘种茶尺蠖的致死率差异
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料与试剂
        2.1.2 EoNPV室内感染两近缘种茶尺蠖的方法
        2.1.3 死亡率统计分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 不同浓度EoNPV对小茶尺蠖的致死率
        2.2.2 不同浓度EoNPV对灰茶尺蛾致死率
        2.2.3 EoNPV对两近缘种茶尺蠖致死率的差异
        2.2.4 不同浓度EoNPV对两近缘种茶尺蠖致死中时间
    2.3 结论与讨论
        2.3.1 不同浓度EoNPV对小茶尺蠖致死率的差异
        2.3.2 不同浓度EoNPV对灰茶尺蛾致死率的差异
        2.3.3 同种浓度EoNPV对两近缘种茶尺蠖致死率的差异
第三章 EoNPV感染两近缘种茶尺蠖的体内增殖动态
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料与试剂
        3.1.2 病毒处理两近缘种茶尺蠖方法
        3.1.3 样本组织总DNA提取
        3.1.4 定量PCR检测病毒拷贝数
    3.2 结果与分析
        3.2.1 两近缘种茶尺蠖基因组DNA提取结果
        3.2.2 EoNPV在两近缘种茶尺蠖体内的增殖动态
    3.3 结论与讨论
第四章 EoNPV感染后两近缘种茶尺蠖抗菌肽基因表达分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料与试剂
        4.1.2 抗菌肽基因克隆
        4.1.3 进化树构建与序列分析
        4.1.4 定量PCR
        4.1.5 数据统计与分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 抗菌肽基因克隆
        4.2.2 系统发育树分析
        4.2.3 抗菌肽基因在两近缘种茶尺蠖体内表达差异
    4.3 结论与讨论
第五章 结论
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3745841