蜜蜂工蜂和雄蜂胚胎期发育蛋白质组及磷酸化蛋白质组研究

发布时间:2023-04-03 04:53
  在蜜蜂社会里,工蜂和雄蜂是对蜂群社会组织和种群繁衍具有重要贡献的两个级型。工蜂和雄蜂分别是二倍体和单倍体,二者在遗传上的差异决定了其生理发育和社会行为存在诸多生物学不同。胚胎发育期是蜜蜂生命周期中的关键时期,成年蜂的各种器官雏形都在胚胎期形成。虽然利用基于双向电泳(2-DE)的蛋白质组学技术对工蜂和雄蜂胚胎期发育的分子基础进行初步探索,但只鉴定到105个蛋白质,仅覆盖了7%的蜜蜂蛋白质组(15323个蛋白质),这在一定程度上限制了对胚胎发育分子基础的客观认识。随着质谱分辨率、灵敏度和精确度技术的快速发展,其蛋白质鉴定能力至少是2-DE蛋白质组的20倍以上。蛋白质组覆盖深度对全面深入解析蜜蜂胚胎发育分子基础至关重要。磷酸化是最为重要的蛋白质翻译后修饰之一,对蛋白质功能具有重要调节作用,已被广泛应用到生命科学研究的各个领域。但利用基于高分辨质谱的蛋白质组和磷酸化蛋白质组技术对工蜂和雄蜂胚胎发育分子基础的研究还尚未进行。本研究利用基于高分辨质谱为主的shotgun蛋白质组学研究方法、非标定量技术、IMAC(固相金属离子亲和色谱)和TiO2磷酸化蛋白富集等技术以及蛋白质相...

【文章页数】:138 页

【学位级别】:博士

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摘要
abstract
英文缩略表
第一章 绪论
    1.1 工蜂和雄蜂的研究进展
    1.2 蜜蜂的胚胎期发育
    1.3 蜜蜂蛋白质组学的研究进展
        1.3.1 蜜蜂级型分化
        1.3.2 工蜂劳动分工
        1.3.3 蜜蜂组织器官
        1.3.4 蜜蜂分泌物
    1.4 研究目的及主要研究内容
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 主要研究内容
第二章 蜜蜂工蜂胚胎发育期蛋白质组分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 仪器设备
        2.1.2 实验材料
        2.1.3 实验流程
        2.1.4 实验方法
    2.2 实验结果
    2.3 讨论
        2.3.1 胚胎 24hr主要是提供能量促进细胞增殖形成胚盘
        2.3.2 胚胎 48hr的主要任务是构建器官的雏形
        2.3.3 胚胎 72hr进一步完善器官雏形并完成背索闭合
    2.4 结论
第三章 蜜蜂雄蜂胚胎发育期蛋白质组及其与工蜂的比较分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 仪器设备
        3.1.2 实验材料
        3.1.3 实验流程
        3.1.4 实验方法
    3.2 实验结果
        3.2.1 雄蜂胚胎的蛋白质组
        3.2.2 工蜂和雄蜂胚胎在 24hr的差异
        3.2.3 工蜂和雄蜂胚胎在 48hr的差异
        3.2.4 工蜂和雄蜂胚胎在 72hr的差异
        3.2.5 验证
        3.2.6 RNAi体系的构建
    3.3 讨论
        3.3.1 雄蜂胚胎发育过程与工蜂的模式基本类似
        3.3.2 工蜂和雄蜂不同的胚胎转录和翻译机制
        3.3.3 工蜂和雄蜂胚胎形态结构构建的时间差异
        3.3.4 雄蜂胚胎提高骨架蛋白的表达以满足其体型较大的需求
        3.3.5 工蜂和雄蜂胚胎采取了不同的抗氧化机制
    3.4 结论
第四章 蜜蜂工蜂胚胎发育期磷酸化蛋白质组分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 仪器设备
        4.1.2 实验材料
        4.1.3 实验流程
        4.1.4 实验方法
    4.2 实验结果
    4.3 讨论
        4.3.1 工蜂胚胎发育的核心磷酸化蛋白质
        4.3.2 工蜂胚胎发育各日龄特异表达的磷酸化蛋白质
    4.4 结论
第五章 蜜蜂雄蜂胚胎发育期磷酸化蛋白质组及其与工蜂的比较分析
    5.1 材料与方法
        5.1.1 仪器设备
        5.1.2 实验材料
        5.1.3 实验流程
        5.1.4 实验方法
    5.2 实验结果
        5.2.1 雄蜂胚胎发育磷酸化蛋白组
        5.2.2 雄蜂与工蜂胚胎发育磷酸化蛋白质组的差异
    5.3 讨论
        5.3.1 雄蜂的胚胎发育
        5.3.2 工蜂和雄蜂胚胎发育的差异
    5.4 结论
第六章 结论及展望
    6.1 全文结论
    6.2 创新之处及新发现
    6.3 展望
参考文献
致谢
作者简历



本文编号:3780698

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