观赏烟草赤星病菌毒力蛋白基因AlPep1的功能研究

发布时间：2023-06-08 20:30

　　烟草是茄科烟草属,一年生或有限多年生草本植物,其成熟叶片主要用于卷烟生产,具有极高的经济价值。烟草原产于南美洲,目前在国内广泛种植,经过多年选育,品系较多,其中’红花大金元’具有适应性广、产出品质高等特点,其叶片绿色,花序集中,花冠深红色,花期较长,外观较其他烟草品种更具有观赏价值,可作为观赏烟草种植。烟草赤星病是烟草成熟时期发生的一种由烟草赤星病菌(Alternaria longipes)侵染引起的真菌病害,严重制约烟草栽培,造成巨大经济损失。烟草’红花大金元’对赤星病抗性较弱,易感性强,叶片被病菌侵染后,极易形成大面积病斑,严重降低经济价值和整体观赏效果。在前期对烟草赤星病菌致病机制研究中发现,AlPep1基因缺失型菌株致病能力降低。为了进一步探究AlPep1基因在链格孢菌(A.longipes)致病机制中的作用,本研究以该基因为切入点进行研究,为烟草赤星病菌致病机制研究及特异性抗菌剂开发提供理论基础。本研究主要结果如下:1、对A.longipes 野生型菌株C-00和组氨酸激酶AlHK1基因缺失型菌株HK△4转录组数据进行分析,发现AlPep1基因在HK△4中相对表达量高于野生型...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 烟草与烟草品种'红花大金元'
    1.2 烟草赤星病
        1.2.1 烟草赤星病的病理性状
        1.2.2 烟草赤星病菌
        1.2.3 '红花大金元'与烟草赤星病菌
        1.2.4 烟草赤星病的控制策略
    1.3 链格孢属真菌致病机制研究进展
        1.3.1 附着胞等细胞器的机械穿透作用
        1.3.2 降解酶
        1.3.3 毒素
        1.3.4 链格孢真菌致病过程中的信号转导机制
    1.4 天冬氨酸蛋白酶
        1.4.1 天冬氨酸蛋白酶的分类
        1.4.2 天冬氨酸蛋白酶的作用
    1.5 验证基因和蛋白质功能常用的试验方法
        1.5.1 基因敲除与回补
        1.5.2 RNA-seq
        1.5.3 亚细胞定位
    1.6 创新点
第二章 AlPep1基因表达及序列分析
    2.1 材料和方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 基于转录组数据AlPep1基因表达水平分析
        2.2.2 天冬氨酸蛋白酶氨序列分析
    2.3 讨论
    2.4 本章小结
第三章 烟草赤星病菌毒力蛋白基因AlPep1功能研究
    3.1 材料和方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验方法
    3.3 结果与分析
        3.3.1 目的基因克隆
        3.3.2 构建回补载体与定位载体
        3.3.3 农杆菌转化
        3.3.4 含回补载体农杆菌AGL-1介导的孢子及原生质体转化
        3.3.5 含定位载体农杆菌AGL-1介导的C-00转化孢子转化子及验证
    3.4 讨论
        3.4.1 构建回补载体及敲除载体
        3.4.2 含回补载体农杆菌介导的AlPep1缺失型菌株转化
        3.4.3 含定位载体农杆菌介导的野生型菌株C-00转化
    3.5 本章小结
第四章 实践意义与展望
    4.1 实践意义
    4.2 展望
参考文献
附录
    研究生期间发表论文
致谢



本文编号：3832440