转hrpZ Psta 大豆株系对灰斑病的抗病性鉴定

发布时间：2023-08-11 19:25

　　试验以T₅、T₆代转基因株系JN-hrpZ_Psta-2004-30-384为试验材料,运用常规PCR、Southern杂交及qRT-PCR技术对T₅、T₆代大豆株系进行分子检测和稳定性鉴定,然后通过室内人工接灰斑病菌CsJ-1的生理小种对其进行抗病性分析。结果表明:在转基因株系的T₅、T₆代株系中均检测到转化的目的基因的启动子35S、终止子Nos、目的条带和筛选标记Bar,表明目的基因得到了稳定的遗传;Southern杂交结果显示目的基因均是以多拷贝的形式整合到大豆基因组中,且整合位点不同; qRT-PCR检测结果表明目的基因在植株的根、茎、叶中均有表达,T₅代株系的根、茎、叶相对表达量均值分别为2.871,1.363,7.743,T₆代株系的根、茎、叶相对表达量均值分别为3.577,1.664,8.589,目的基因在叶中的表达量最高,在茎中表达量最低。按照相关的标准进行抗病性鉴定,结果显示...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 供试质粒
        1.1.3 试剂和药品
        1.1.4 仪器
        1.1.5 病原菌
    1.2 方法
        1.2.1 目的基因的PCR检测
        1.2.2 目的基因的Southern blot分析
        1.2.3 目的基因的qRT-PCR检测
        1.2.4 转基因株系的抗病性鉴定
            (1)试验设计。
            (2)菌种的培养与保存。
            (3)接菌方法。
2 结果与分析
    2.1 目的基因的PCR检测结果
    2.2 Southern blot检测结果
    2.3 qRT-PCR检测结果
    2.4 抗病性鉴定结果
3 讨 论



本文编号：3841617