利用杜仲几丁质酶基因EuCHIT1创制抗锈病小麦新种质的研究

发布时间：2023-12-10 17:41

　　普通小麦(Triticum aestivum)是世界上总产量和栽培面积最大的三大粮食作物之一。小麦锈病是由担子菌亚门真菌引起的真菌性气传病害,是一种世界性重要病害。小麦感染锈病后,产量和品质均会下降。目前,小麦抗锈病品种的选育已经成为减少病害损失的主要途径,探索利用外源基因提高锈病抗性对小麦生产具有重要意义。本研究利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化法将杜仲几丁质酶基因(Eucommia ulmoides chitodextrinase gene,EuCHIT1)遗传转化小麦品种“贵紫3”、“AVS”、“铭贤169”和“SY95-71”,通过?葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)组织化学染色和PCR鉴定筛选转基因植株,对转基因植株和野生型的农艺性状、几丁质酶活性、保护性酶活性、锈病抗性和病程相关蛋白基因相对表达量比较分析,取得以下研究结果:1、农杆菌介导小麦遗传转化本研究利用农杆菌介导小麦茎尖遗传转化法,将杜仲几丁质酶基因35S:EuCHIT1导入4个小麦品种(“贵紫3号”、“SY95-71”、“铭贤169”和“AVS”),筛选鉴定出...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 小麦锈病研究进展
        1.1 小麦锈菌生理学特性
        1.2 小麦条锈病
        1.3 小麦叶锈病
        1.4 小麦锈病的防治措施
    2 小麦转基因技术研究进展
        2.1 小麦遗传转化法研究进展
        2.2 农杆菌介导遗传转化的分子机制
        2.3 农杆菌介导小麦遗传转化的研究进展
    3 植物几丁质酶基因及其在植物抗病基因工程中的应用
        3.1 几丁质酶分子特性及分类
        3.2 几丁质酶的酶特异性
        3.3 几丁质酶的生物功能
        3.4 几丁质酶在植物抗真菌病害基因工程中的应用
    4 杜仲抗真菌蛋白
    5 本研究的目的和意义
第二章 EuCHIT1基因对小麦的遗传转化
    1 材料
        1.1 实验材料
        1.2 主要试剂及配方
        1.3 主要仪器及设备
    2 方法
        2.1 质粒提取
        2.2 农杆菌感受态制备及转化
        2.3 农杆菌菌液PCR鉴定及菌种保存
        2.4 农杆菌的培养及活化
        2.5 受体材料的准备获得
        2.6 小麦茎尖遗传转化法
        2.7 转基因植株筛选鉴定
        2.8 转基因植株农艺性状测定
    3 结果与分析
        3.1 农杆菌介导小麦茎尖遗传转化及鉴定
        3.2 EuCHIT1基因的表达对小麦农艺性状的影响
    4 讨论
第三章 转EuCHIT1小麦抗病性检测
    1 材料
        1.1 主要试剂及配方
        1.2 主要仪器及设备
    2 方法
        2.1 转基因植株几丁质酶活性的测定
        2.2 转基因植株条锈菌接种及抗性鉴定
        2.3 转基因植株保护性酶活性的测定
        2.4 病程相关蛋白基因表达分析
        2.5 转基因植株叶锈菌接种及抗性鉴定
    3 结果与分析
        3.1 EuCHIT1基因表达对小麦几丁质酶活性的影响
        3.2 EuCHIT1基因表达对小麦条锈病抗性的影响
        3.3 EuCHIT1基因表达对小麦保护性酶活性的影响
        3.4 EuCHIT1基因表达对小麦病程相关蛋白基因表达的影响
        3.5 EuCHIT1基因表达对小麦叶锈病抗性的影响
    4 讨论
第四章 结论、创新与展望
    1 研究结论
    2 研究创新
    3 研究展望
参考文献
缩略词
附录
致谢



本文编号：3872834