家蚕微孢子虫水通道蛋白及其NPA基序的功能特征研究

发布时间：2024-01-23 13:10

　　微孢子虫(Microsporidia)是一类专营寄生的的真核微生物,从脊椎动物到无脊椎动物都能被感染。到目前为止,虽然在微孢子虫孢子发芽及侵染宿主细胞的研究上已取得了很大的进展,但对于微孢子虫的发芽侵染机制仍没有明确的解释。家蚕微孢子虫水通道蛋白(NbAQP)具有传统水通道蛋白的两个保守NPA基序(天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸),对称分布的两个NPA基序可以在通道中形成狭窄的口径,形成沙漏的形状。通常认为这种保守结构决定了底物选择的特异性。这两个保守的NPA基序是水通道蛋白水渗透中起关键作用的重要的结构域。所以,本研究希望通过对水通道蛋白的功能及其NPA基序的研究,来探究微孢子虫孢子的发芽机制,为家蚕微粒子病的防治打下基础。1.家蚕微孢子虫水通道蛋白系统发育使用MEGA6绘制水通道蛋白(包括NbAQP蛋白)的系统发生树,分析发现NbAQP和兔脑炎微孢子虫水通道蛋白(EcAQP)聚在同一分支上,具有较近的亲缘关系,表明这两种蛋白可能在功能上相似。2.NbAQP及其突变体NbAQP_NPAs表达研究利用间接免疫荧光技术(IFA),经多克隆抗体孵育成熟微孢子虫,在家蚕微孢子虫...

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【学位级别】：硕士

图1.1微孢子虫侵染模式图(图片引用文献[1])

图2.1家蚕微孢子虫NbAQP和其他水通道蛋白的进化树

图2.3带有不同酶切位点的家蚕微孢子虫NbAQP及EGFP的PCR产物M:Marker；泳道1-3:带有不同酶切位点的NbAQP产物；泳道4-6:带有不同酶切位点的EGFP

图2.4重组质粒PCR鉴定

本文编号：3882718