Ⅰ、稻曲病菌效应蛋白Uv2169参与致病机理研究 Ⅱ、稻曲病菌的糖类偏好性研究

发布时间：2024-01-31 18:17

　　稻曲病是由Ustilaginoidea virens引起的水稻穗部真菌性病害,目前该病害在世界各大水稻产区发病严重。稻曲病菌不仅影响稻米产量,人畜误食稻曲球污染的粮食还会产生中毒反应。虽然最近水稻稻曲病相关报道日益增多,但大多围绕稻曲病菌病害循环、生物学特性、侵入水稻方式等展开,目前对于稻曲病菌侵染水稻的分子机制尚不明确,稻曲球的形成也还是一个谜,大量的研究亟待展开。前期我们通过对稻曲病菌侵染水稻前后差异转录组数据分析发现,Uv2169在侵染水稻后上调表达,并通过实验证明其编码的蛋白是一个典型的效应蛋白,能诱导细胞死亡、抑制活性氧爆发等。本研究在此基础上对Uv2169基因功能进行更为深入的研究。同时稻曲球的形成需要大量的营养物质,为了解开稻曲球形成之谜,本文还对稻曲病菌的糖类偏好性进行了研究,主要取得了以下几点研究结果:(1)通过外源添加Uv2169 siRNA培养稻曲病菌表明,Uv2169受到干涉后菌丝湿重约为对照的一半,稻曲病菌致病力也明显降低。同时利用农杆菌介导的稻曲病菌遗传转化体系,成功得到Uv2169干涉及过表达转化子,结果表明Uv2169被干涉或过表达后,菌丝形态会出现较大...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１?ＺｉｇＺａｇ模型??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?ＺｉｇＺａｇ?ｍｏｄｅｌ??注：图片来自Ｊｏｎｅｓ及Ｄａｎｇｌ提出的ＺｉｇＺａｇ模型［８Ｇ］??

图１．１?ＺｉｇＺａｇ模型??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?ＺｉｇＺａｇ?ｍｏｄｅｌ??注：图片来自Ｊｏｎｅｓ及Ｄａｎｇｌ提出的ＺｉｇＺａｇ模型［８Ｇ］??．２?效应蛋白??针对植物的ＰＴＩ反应，细菌、真菌、卵菌等都能分泌效应蛋白来扰乱植物的防号或提高植物对病菌的敏感性ｔ７３＿８１，８２....

图２－１?Ｐｚｐ－ｂａｒ－Ｅｘ载体图谱??Ｆｉｇｕｒｅ．２－１?Ｖｅｃｔｏｒ?ｍａｐ?ｏｆ?Ｐｚｐ－ｂａｒ－Ｅｘ??

胶回收使用ＯＭＥＧＡ试剂盒Ｅ．Ｚ．Ｎ．Ａ．？?Ｇｅｌ?Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?Ｋｉｔ步骤如下：??①使用新鲜的ＴＡＥ电泳缓冲液及１％的琼脂糖凝胶９０?Ｖ电泳２５?ｍｉｎ。??②在切胶台上快速切下目的条带，并转移到１．５?ｍＬ的ＥＰ管中。??③加入３００吣的Ｂｉｎｄｉｎｇ?Ｂｕｆｆｅ....

图２－４过表达［／ｖ２７＜５９转化子表型??Ｆｉｇ．２－４?Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｆｏｎｎａｎｔｓ?ｏｖｅｒ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ?Ｕｖ２１６９??注：（ａ）?Ｃ／ｖ２Ｍ９过表达转化子摇培后的表型；（ｂ）图（ａ）中摇培后的转化子单粒菌落表型；ＷＴ：??

?ＣＫ?＇?ＳｉＲＮＡ?ＣＫ?ＳｊＲＮＡ??图２－３外源添加ｔ／ｖ２７砂ｓｉＲＮＡ影响稻曲病菌发育与致病力??Ｆｉｇ．２－３?Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ?ａｄｄｅｄ?Ｕｖ２１６９?ｓｉＲＮＡ?ａｆｆｅｃｔｓ?Ｕ．?ｖｉｒｅｎｓ?ｇｒｏｗｔｈ?ａｎｄ?ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ??注：（ａ....

图２－９：?ｃＤＮＡ文库在ＳＤ／－Ｌｅｕ平板上的生长情况??Ｆｉｇ．２－９?Ｔｈｅ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?ｃＤＮＡ?ｌｉｂｒａｒｙ?ｙｅａｓｔ?ｏｎ?ＳＤ／－Ｌｅｕ?ｍｅｄｉｕｍ??

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本文编号：3891320