生防菌GZ-34对青枯菌的作用效果和机理研究

发布时间：2024-04-03 02:04

　　青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)侵染寄主植株的维管束,导致青枯病的发生,进而造成植株的死亡,俗称“植物瘟病”,是全球热带和亚热带地区的重要植物病害,青枯菌可以侵染54个科的数百种植物。到目前为止还没有一种能够有效防治青枯病的农业措施、物理措施或者化学措施,因此生物防治日益受到人们的重视。本研究分为三个部分:1、青枯菌GMI1000菌株的eGFP标记;2、青枯拮抗菌的筛选鉴定和温室接种实验;3、拮抗菌GZ-34活性物质的提取分离鉴定和发酵条件优化,拮抗菌GZ-34对黑粉菌和稻瘟菌的抑制作用。主要研究结果如下:1、构建PBBR1-2-eGFP质粒,转入青枯菌,获得eGFP标记的青枯菌菌株。2、从广东广州、河南永城、湖南永州等30地共采集土样30份,采用土壤稀释悬浮液分离法,涂布LB平板,挑取单菌落,在青枯菌平板上通过对峙生长筛选得到384株有明显拮抗效果的菌株,然后对初筛的拮抗菌摇菌发酵进行复筛,得到有稳定拮抗效果的菌株56株。3、对筛选得到的拮抗菌菌株进行鉴定,结果为:菌株GZ-27为单不动杆菌(Acinetobacter soli),保藏编号为CCTCC N...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1青枯菌致病性调控网络（Peetersetal.,2013）

10（Aldonetal.,2000）。PrhA是一种外模受体蛋白，感知该信号并传递至膜结合蛋白PrhI和PrhR，通过连续诱导转录调控因子PrhJ、PrhG和PrhB，从而引起Hrp/Hrc的表达（Britoetal.,2002）。在体外转录组学研究表明，Hrp调节子控制除了T....

图1-2青枯菌的群体感应调控系统（VonBodmanetal.,2003）

11的群体感应调控系统，两个系统协同调控青枯菌的致病性（Maddocksetal.,2008）（图1-2）。图1-2青枯菌的群体感应调控系统（VonBodmanetal.,2003）1.8本论文的研究目的和意义目前，在农业生产中主要采用化学农药进行青枯病的防治，但无法有效防止该病....

图2-1PCR目的片段电泳图

18（3）将上述感受态细胞小心转移到电击杯中，放入电击仪。设定电击仪的电压。0.2cm的电击杯对应的电压为2.5KV。（4）电击，结束后迅速取出电击杯，加入500μL不加抗性的LB培养基，并转移到灭过菌的离心管中。（5）转化后的菌液置于28℃摇床复苏1小时。（6）复苏过后，取10....

图2-2eGFP标记青枯菌菌液

192.2.2连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α连接产物转入大肠杆菌，在体式荧光显微镜下观察，挑取发荧光的菌落，用菌落PCR方法筛选鉴定阳性克隆，提取质粒并保存菌种。2.2.3青枯菌eGFP标记菌株的鉴定转化青枯菌后，在含Kan抗性的TTC平板长出单菌落，在荧光体式显微镜下观察有....

本文编号：3946550