家蚕微粒子诱导型Cas9编辑系统的构建

发布时间：2024-04-13 05:17

　　微孢子虫(Microsporidia)作为一类单细胞的专性寄生真菌,广泛存在于自然界中,具有广阔的宿主域,能够感染脊椎动物和无脊椎动物。家蚕微粒子(Nosema bombycis)作为第一种被人类所熟知的微孢子虫,引起家蚕微粒子病(Pébrine)是蚕丝产业的毁灭性病害,严重威胁蚕丝业的可持续发展。因此,迫切需要创制家蚕微粒子病抗性素材,培育抗性品种,为家蚕微粒子病的绿色防控提供重要保障。当前家蚕微粒子病防控还是沿用巴斯德博士提出的母蛾镜检法对蚕种进行检疫,控制病原垂直传播;用严格的环境消毒、桑叶消毒等措施控制病原水平传播。这些防控措施不仅费时费力,劳动强度大,而且大量漂白粉等消毒药剂的使用,环境污染严重,严重制约了蚕丝产业的可持续发展,迫切需要家蚕微粒子病抗性品种。目前家蚕资源中未发现家蚕微粒子病的抗性素材,创制家蚕微粒子病抗性素材尤为迫切。由于家蚕微粒子特异性诱导型启动子是创制家蚕微粒子病抗性素材的必要条件,而目前又未筛选到该类启动子。根据家蚕微粒子的生活史特征,家蚕微粒子的分泌蛋白可作为构建家蚕微粒子诱导型启动子的核心元件。因此,基于分泌型蛋白构建一套家蚕微粒子诱导型基因编辑系统...

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【部分图文】：

图1.1微孢子虫超微结构示意图

图1.1微孢子虫超微结构示意图[45]Figure1.1Diagramofamicrosporidiansporeultrastructure[45].e）；孢子内壁（Endospore）；原生质膜（Plasmamembrane）；极管（Pol定盘（Ancho....

图1.2微孢子虫侵染宿主方式假说[52]

而是将宿主细胞膜向内挤压出一个内陷结构，将孢原质释放于内陷结构内部，进而形成侵染泡[46]（图1.2）。脑炎微孢子虫的极管可利用宿主细胞的吞噬作用进入其体内，此外发现一些极管在进入宿主细胞时，细胞表面相应部位形成了内陷结构。但目前仍未有直接证据表明极管是否可以通过细胞吞噬进入宿主....

图1.3微孢子虫生活史示意图

图1.3微孢子虫生活史示意图[52]Figure1.3Thelifecycleofmicrosporidian[52].外感染阶段；Proliferativephase：裂殖增殖阶段（前体阶泌蛋白种胞内寄生单细胞真核生物，其在获取宿定程度上还会抵抗逃避宿主的免疫....

图1.4CRISPR/Cas9基因编辑原理示意图

细菌等微生物可将相关外源基因切除，这是细菌中，CRISPR系统共分成3类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需白）共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋泛应用提供了便利条件[62-63]。两个核酸酶结构域，包括N端的类Ruc核酸酶[62]。通过一段RNA碱基互补配对识别DNA，....

本文编号：3952537