超氧化物歧化酶-2在豌豆蚜免疫防御反应中的作用研究

发布时间：2024-05-13 03:36

　　蚜虫属于刺吸式昆虫,种类繁多,危害严重,是植物病毒的媒介。豌豆蚜(Acyrhosiphon pisum)基因组测序为豌豆蚜和其他蚜虫的研究提供了基础。令人惊讶的是,豌豆蚜基因组中缺失了一些在其它昆虫中保守的基因,这些缺失的基因在昆虫的免疫反应中起关键作用。活性氧(Reactive oxygen species,ROS)作为信号分子,参与多种细胞信号通路和免疫反应。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)催化超氧阴离子(O₂^-)转化为过氧化氢(H₂O₂)和分子氧(O₂),H₂O₂可与氯离子(Cl^-)生成次氯酸(HOCl)。H₂O₂和HOCl被认为是参与宿主防御反应的主要ROS,因此SOD可能也调控宿主的免疫反应。本研究利用RNA干扰技术沉默豌豆蚜超氧化物歧化酶-2(SOD-2)基因,检测豌豆蚜体内H₂O₂

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 蚜虫概述
    1.2 昆虫免疫简介
        1.2.1 细胞免疫
        1.2.2 体液免疫
    1.3 ROS防御系统
        1.3.1 ROS的来源和抗氧化系统
        1.3.2 依赖ROS的免疫反应
    1.4 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)
        1.4.1 Cu/ZnSOD结构特征与分布
        1.4.2 Cu/ZnSOD的功能
    1.5 研究内容和意义
    1.6 研究技术路线
第二章 材料和方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试昆虫
        2.1.2 实验菌株
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 设计引物
        2.2.2 实时荧光定量PCR
        2.2.3 样品总RNA的抽提及反转录
        2.2.4 合成dsRNA
        2.2.5 注射dsRNA并检测干扰效率
        2.2.6 病原菌感染豌豆蚜
        2.2.7 目的基因表达检测
        2.2.8 豌豆蚜存活率统计
        2.2.9 豌豆蚜体内细菌菌落数和真菌孢子数的统计
        2.2.10 测定H₂O₂的含量
第三章 结果与分析
    3.1 SOD-2基因序列分析
    3.2 细菌、真菌感染诱导豌豆蚜体内H₂O₂浓度升高
    3.3 细菌、真菌感染后豌豆蚜SOD-2基因表达变化
    3.4 干扰SOD-2引起豌豆蚜体内H₂O₂水平的下降
    3.5 干扰SOD-2对细菌或真菌感染的豌豆蚜体内H₂O₂水平的影响
    3.6 干扰SOD-2对感染细菌或真菌的豌豆蚜体内细菌或真菌增殖的影响
    3.7 干扰SOD-2对感染细菌或真菌的豌豆蚜存活率的影响
第四章 讨论
参考文献
致谢
个人简介



本文编号：3972322