拟轮枝镰孢、黄色镰孢、雪松疫霉、栗黑水疫霉及大豆种传病原菌的LAMP检测

发布时间：2025-04-14 23:39

　　水稻恶苗病是水稻的重要病害,影响水稻的生长发育,目前在我国分布非常广泛,经常造成严重的产量损失。大豆镰孢根腐病是大豆根腐病害,常由一种或多种镰孢菌引起,主要症状表现为大豆根部及茎基部的腐烂,该病害目前已严重影响我国东北及黄淮海等大豆主要产区。雪松疫霉(Phyto0phthora lateralis Tucker&Mibrath)与栗黑水疫霉[P.cambivor.(Petri)Buisman]是我国进境植物检疫性病菌,常引起多种植物的毁灭性病害,造成经济损失。种传病原菌是许多农作物病害的重要传染源。它是作物种子贮藏期的主要隐患,也是苗期和生育期作物病害的主要风险。大豆种子上种传病原菌的快速检测是保障大豆种子质量,从而预防种传病害的首要措施。为了提高对两种病害病原菌的快速检测水平,并在病菌侵染初期对病害进行诊断,降低经济损失,这项研究基于 LAMP(loop-mediated isothermal amplification,环介导等温扩增)技术,对引起水稻恶苗病的拟轮枝镰孢(Fusariumverticillioides)以及引起大豆镰孢根腐病的黄色镰孢(F.culmorum)建...

【文章页数】：122 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文献综述
    第一章 大豆种传病原菌的研究现状
        1 大豆种传病原菌的为害
        2 常见的大豆种传病原菌
        3 大豆种传病原菌的检测鉴定方法
            3.1 传统检测技术
            3.2 分子生物学技术
        参考文献
    第二章 环介导等温扩增技术的应用
        1 应用LAMP检测细菌
            1.1 分支杆菌属的检测
            1.2 大肠杆菌0157: H7的检测
            1.3 沙门菌的检测
            1.4 副溶血弧菌的检测
            1.5 志贺菌属的检测
            1.6 其它细菌的检测
        2 应用LAMP检测病毒
            2.1 流感病毒的检测
            2.2 SARS冠状病毒的检测
            2.3 伪狂犬病毒的检测
            2.4 猪类病毒的检测
            2.5 其它病毒的检测
        3 应用LAMP检测寄生虫
        4 应用LAMP检测真菌和卵菌
        参考文献
第二部分 研究内容
    第一章 基于环介导等温扩增技术快速诊断由拟轮枝镰孢引起的水稻恶苗病
        1 材料与方法
            1.1 供试菌株
            1.2 菌株培养与基因组DNA的提取
            1.3 引物设计与筛选
            1.4 LAMP反应体系和结果判断
            1.5 特异性试验
            1.6 灵敏度试验
            1.7 人工接种水稻发病组织中拟轮枝镰孢的检测
            1.8 水稻恶苗病样本中拟轮枝镰孢的检测
        2 结果与分析
            2.1 拟轮枝镰孢LAMP检测的特异性
            2.2 拟轮枝镰孢LAMP体系的灵敏度
            2.3 LAMP技术检测人工接种发病的水稻病组织中的拟轮枝镰孢
            2.4 LAMP技术检测田间发病的水稻病组织中的拟轮枝镰孢
        3 讨论
        参考文献
    第二章 基于环介导等温扩增技术快速诊断由黄色镰孢引起的大豆镰孢根腐病
        1 材料与方法
            1.1 供试菌株
            1.2 菌株培养与基因组DNA的提取
            1.3 引物设计与筛选
            1.4 LAMP反应体系和结果判断
            1.5 特异性试验
            1.6 灵敏度试验
            1.7 土壤中黄色镰孢的检测灵敏度
            1.8 人工接种大豆发病组织中黄色镰孢的检测
            1.9 大豆镰孢根腐病样本中黄色镰孢的检测
        2 结果与分析
            2.1 黄色镰孢LAMP检测的特异性
            2.2 黄色镰孢LAMP体系的灵敏度
            2.3 土壤中人工添加黄色镰孢分生孢子的检测
            2.4 LAMP技术检测人工接种发病的大豆病组织中的黄色镰孢
            2.5 LAMP技术检测田间发病的大豆病组织中的黄色镰孢
        3 讨论
        参考文献
    第三章 环介导等温扩增技术快速检测两种疫霉
        1 材料与方法
            1.1 供试菌株
            1.2 菌株培养与基因组DNA的提取
            1.3 引物设计与筛选
            1.4 LAMP反应体系与产物判断
            1.5 特异性试验
            1.6 灵敏度试验
        2 结果与分析
            2.1 LAMP检测的特异性
            2.2 LAMP体系的灵敏度
        3 讨论
        参考文献
    第四章 黄淮地区大豆主栽品种种子上种传病原菌的LAMP检测
        1 材料与方法
            1.1 供试种子材料
            1.2 检测的目标病原菌
            1.3 大豆种子携带病原菌基因组的提取
            1.4 大豆种子携带病原菌的LAMP检测
            1.5 大豆种子携带病原菌的分离验证
        2 结果与分析
            2.1 大豆种子携带13种病原菌的LAMP检测结果
            2.2 大豆种子携带病原菌的分离与鉴定
        3 结论与讨论
        参考文献
附录 黄淮地区大豆根部病害的快速诊断
    1 材料与方法
        1.1 供试样本
        1.2 检测的目标病原菌
        1.3 病组织总DNA的提取方法
        1.4 病组织中病原菌的LAMP检测
        1.5 病组织中病原菌的分离与鉴定
        1.6 病组织中分离菌的致病力测定
    2 结果与分析
        2.1 大豆15种重要根部病原菌的LAMP检测
        2.2 大豆分离菌株对大豆的致病力
        2.3 山东济宁、江苏徐州、安徽宿州地区15种大豆主要根部病害病原菌的检出率分析
        2.4 复合侵染引起黄淮地区大豆根部病害的状况分析
    3 讨论
    参考文献
攻读硕士期间发表的论文及专利
致谢



本文编号：4039723