云斑天牛嗅觉基因差异性表达及成虫寄主选择中定向信息物质研究
发布时间：2021-06-06 15:12
天牛类害虫一般具有补充营养习性,成虫自由生活历时较长,且取食及产卵具有嗜性;云斑天牛以生活隐蔽、分布广、寄主多、危害重、抗逆强和防治难等原因成为用材林、经济林和防护林的重要蛀干害虫,常对林木造成毁灭性打击;在林业无公害防治的新背景下,如何利用云斑天牛取食及产卵嗜性并对其进行绿色生态防治成为研究的迫切需要。本研究基于云斑天牛成虫寄主选择嗜性,以云斑天牛成虫、幼虫和蛹为研究对象,通过顶空固相微萃取（Headspace Solid Phase Micro-Extraction,HS-SPME）、气相色谱-质谱联用（Gas Chromatograph-Mass Spectrometry,GC-MS）、触角电位（Electroantennogram responses,EAG）、葡聚糖凝胶（Sephadex G75）层析、荧光探针（N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN）结合、反转录 PCR（Reverse Transcriptase PCR,RT-PCR）、实时荧光定量 PCR（Quantitative PCR,RT-qPCR）及转录组（Illumina HiSeq）测序...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
云斑天牛转录组Unigen.的KO‘分类田P啥.2.5KOGCViasi6cationofUnigeneafrom皿彻rsJleJditranscHptome
云斑天牛转录文库构建后，通过基因表达水平分析可明确不同处理条件下样品的??基因表达情况。结果表明：云斑天牛相同虫态（成虫、蛹、幼虫）基因表达水平不同，??不同虫态基因表达水平也不同（图２．７）；其中，成虫和踊有１４４９条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ表达水??平不同，蛹和幼虫有１７００条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ表达水平不同，成虫和幼虫有１９２条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ??表达水平不同，成虫、蛹和幼虫有３４条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ同时表达水平不同（图２．８）；此外，??差异基因表达水平类聚分析表明
＿?■?■??ｌｏｇｌＯ（ＦＰＫＭ）??图２．７云斑天牛不同虫态基因表达水平分析??Ｆｉｇ．?２．７?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｆｏｒ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ?（Ｌａｒｖａ，?Ｐｕｐａｅ?ａｎｄ?Ａｄｕｌｔ）??注：Ａ代表云斑天牛成虫；Ｐ代表云斑天牛蛹；Ｌ代表云斑天牛幼虫。下同。??Ｎｏｔｅ：?Ａ?ｗａｓ?ａｄｕｌｔ，?Ｐ?ｗａｓ?ｐｕｐａｅ，?Ｌ?ｗａｓ?ｌａｒｖａ?ｏｆ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ．??ＡｖｓＰ?ＡｖｓＬ?｜?｜?Ｉ??１４４９?１９２?＿??１３２３?４１０??１７００??Ｐｖ？Ｌ??图２．８云斑天牛差异基因维恩图（左）??Ｆｉｇ．?２．８?Ｖｅｅｎ?ｆｉｇｕｒｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?Ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ｆｏｒ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ?（Ｌｅｆｔ）??图２．９云斑天牛差异基因类聚图（右）??Ｆｉｇ．?２．９?Ｃｌｕｓｔｅｒ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?Ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ｆｏｒ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ?（Ｒｉｇｈｔ）??云斑天牛差异基因表达中存在嗅觉相关基因，且不同虫态嗅觉功能基因表达水平??差异显著。主要表现为：幼虫和蛹间有４６个Ｕｎｉｇｅｎｅｓ，包括３０个ＯＢＰｓ和１６个ＣＳＰｓ；??成虫和幼虫间有１５个Ｕｎｉｇｅｎｅｓ，包括１０个ＯＢＰｓ和５个ＣＳＰｓ；差异表达嗅觉基因??主要是ＯＢＰｓ和ＣＳＰｓ基因，而ＯＲｓ基因仅幼虫和蛹间有１个差异表达。此外，蛹相??对于幼虫
【参考文献】：
期刊论文
[1]中华蜜蜂气味结合蛋白基因AcerOBP14的克隆及时空表达[J]. 杜亚丽,张中印,潘建芳,王树杰,杨爽,赵慧婷,姜玉锁. 中国农业科学. 2016(19)
[2]小菜蛾触角结合蛋白PxylOBP31的鉴定与结合特性分析[J]. 覃江梅,蔡立君,郑丽双,程小娟,尤民生. 昆虫学报. 2016(08)
[3]孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达[J]. 潘畅,张宇宏,谢佳沁,李浩森,庞虹. 环境昆虫学报. 2016(02)
[4]西花蓟马气味结合蛋白的cDNA克隆、序列分析及时空表达[J]. 张治科,吴圣勇,雷仲仁. 中国农业科学. 2016(06)
[5]光肩星天牛对山核桃挥发性组分的触角电位分析[J]. 杜和芬,王佩星,徐华潮,张娓娓,王紫薇. 浙江农林大学学报. 2016(01)
[6]核桃举肢蛾性信息素结合蛋白2的分子克隆和免疫荧光定位[J]. 李文海,黄兴龙,王敦,冯纪年. 昆虫学报. 2015(10)
[7]槐绿虎天牛对葡萄和杏11种挥发物的EAG及行为反应[J]. 张嫣,刘强,朱耿平,李敏. 应用昆虫学报. 2015(05)
[8]几种环境因子对昆虫适应性影响的研究进展[J]. 段小凤,王晓庆,李品武,彭萍. 中国农学通报. 2015(14)
[9]西花蓟马化学感受蛋白的cDNA克隆、时空表达分析及组织定位[J]. 张治科,吴圣勇,雷仲仁. 昆虫学报. 2015(01)
[10]昆虫感受气味物质的分子机制[J]. 胡基华,李晶,张淑梅,陈静宇,孟利强,姜威,曹旭,刘宇帅,张鹏远. 安徽农业科学. 2014(35)
博士论文
[1]大豆蚜气味结合蛋白的结合特性及组织定位[D]. 王玲.东北农业大学 2014
[2]松墨天牛和天敌花绒寄甲对几种树木挥发物的电生理及行为反应[D]. 任利利.北京林业大学 2014
[3]云斑天牛触角cDNA文库的构建及相关嗅觉蛋白的表达及功能分析[D]. 李慧.华中农业大学 2012
[4]苜蓿夜蛾和大豆食心虫气味感受相关蛋白基因的克隆分析及表达[D]. 王宇.东北农业大学 2012
[5]多胺对小菜蛾嗅觉影响机制的研究[D]. 张志春.华中农业大学 2009
[6]防护林杨树天牛灾害的生态调控理论与技术研究[D]. 骆有庆.北京林业大学 2005
[7]光肩星天牛对寄主植物挥发性物质的行为反应及作用机理的研究[D]. 李建光.北京林业大学 2001
硕士论文
[1]松褐天牛肿腿蜂的寄主定位机制[D]. 周长祥.华中农业大学 2016
[2]孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白CmonOBP1和CmonOBP2基因的克隆和时空表达[D]. 潘畅.中山大学 2016
[3]褐梗天牛生物学特性和引诱剂的初步研究[D]. 张霖.北京林业大学 2016
[4]松褐天牛气味结合蛋白基因的克隆与功能分析[D]. 王娟.华中农业大学 2015
[5]学习经历对川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白表达的影响[D]. 陈春燕.四川农业大学 2015
[6]云斑天牛空间格局分析及补充营养植物对其的影响[D]. 胡瑜珩.北京林业大学 2015
[7]黄曲条跳甲化学感受基因的鉴定与表达分析[D]. 王正兵.仲恺农业工程学院 2015
[8]桔小实蝇气味结合蛋白基因的鉴定与表达分析[D]. 龚妃良.仲恺农业工程学院 2014
[9]云斑天牛性信息素分离鉴定及气味结合蛋白结合特性分析[D]. 潘翔宇.华中农业大学 2014
[10]松褐天牛OBPs基因克隆与分析[D]. 高雄.华中农业大学 2014
本文编号：3214633
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
云斑天牛转录组Unigen.的KO‘分类田P啥.2.5KOGCViasi6cationofUnigeneafrom皿彻rsJleJditranscHptome
云斑天牛转录文库构建后，通过基因表达水平分析可明确不同处理条件下样品的??基因表达情况。结果表明：云斑天牛相同虫态（成虫、蛹、幼虫）基因表达水平不同，??不同虫态基因表达水平也不同（图２．７）；其中，成虫和踊有１４４９条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ表达水??平不同，蛹和幼虫有１７００条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ表达水平不同，成虫和幼虫有１９２条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ??表达水平不同，成虫、蛹和幼虫有３４条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ同时表达水平不同（图２．８）；此外，??差异基因表达水平类聚分析表明
＿?■?■??ｌｏｇｌＯ（ＦＰＫＭ）??图２．７云斑天牛不同虫态基因表达水平分析??Ｆｉｇ．?２．７?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｆｏｒ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ?（Ｌａｒｖａ，?Ｐｕｐａｅ?ａｎｄ?Ａｄｕｌｔ）??注：Ａ代表云斑天牛成虫；Ｐ代表云斑天牛蛹；Ｌ代表云斑天牛幼虫。下同。??Ｎｏｔｅ：?Ａ?ｗａｓ?ａｄｕｌｔ，?Ｐ?ｗａｓ?ｐｕｐａｅ，?Ｌ?ｗａｓ?ｌａｒｖａ?ｏｆ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ．??ＡｖｓＰ?ＡｖｓＬ?｜?｜?Ｉ??１４４９?１９２?＿??１３２３?４１０??１７００??Ｐｖ？Ｌ??图２．８云斑天牛差异基因维恩图（左）??Ｆｉｇ．?２．８?Ｖｅｅｎ?ｆｉｇｕｒｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?Ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ｆｏｒ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ?（Ｌｅｆｔ）??图２．９云斑天牛差异基因类聚图（右）??Ｆｉｇ．?２．９?Ｃｌｕｓｔｅｒ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?Ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ｆｏｒ?Ｂ．?ｈｏｒｓｆｉｅｌｄｉ?（Ｒｉｇｈｔ）??云斑天牛差异基因表达中存在嗅觉相关基因，且不同虫态嗅觉功能基因表达水平??差异显著。主要表现为：幼虫和蛹间有４６个Ｕｎｉｇｅｎｅｓ，包括３０个ＯＢＰｓ和１６个ＣＳＰｓ；??成虫和幼虫间有１５个Ｕｎｉｇｅｎｅｓ，包括１０个ＯＢＰｓ和５个ＣＳＰｓ；差异表达嗅觉基因??主要是ＯＢＰｓ和ＣＳＰｓ基因，而ＯＲｓ基因仅幼虫和蛹间有１个差异表达。此外，蛹相??对于幼虫
【参考文献】：
期刊论文
[1]中华蜜蜂气味结合蛋白基因AcerOBP14的克隆及时空表达[J]. 杜亚丽,张中印,潘建芳,王树杰,杨爽,赵慧婷,姜玉锁. 中国农业科学. 2016(19)
[2]小菜蛾触角结合蛋白PxylOBP31的鉴定与结合特性分析[J]. 覃江梅,蔡立君,郑丽双,程小娟,尤民生. 昆虫学报. 2016(08)
[3]孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达[J]. 潘畅,张宇宏,谢佳沁,李浩森,庞虹. 环境昆虫学报. 2016(02)
[4]西花蓟马气味结合蛋白的cDNA克隆、序列分析及时空表达[J]. 张治科,吴圣勇,雷仲仁. 中国农业科学. 2016(06)
[5]光肩星天牛对山核桃挥发性组分的触角电位分析[J]. 杜和芬,王佩星,徐华潮,张娓娓,王紫薇. 浙江农林大学学报. 2016(01)
[6]核桃举肢蛾性信息素结合蛋白2的分子克隆和免疫荧光定位[J]. 李文海,黄兴龙,王敦,冯纪年. 昆虫学报. 2015(10)
[7]槐绿虎天牛对葡萄和杏11种挥发物的EAG及行为反应[J]. 张嫣,刘强,朱耿平,李敏. 应用昆虫学报. 2015(05)
[8]几种环境因子对昆虫适应性影响的研究进展[J]. 段小凤,王晓庆,李品武,彭萍. 中国农学通报. 2015(14)
[9]西花蓟马化学感受蛋白的cDNA克隆、时空表达分析及组织定位[J]. 张治科,吴圣勇,雷仲仁. 昆虫学报. 2015(01)
[10]昆虫感受气味物质的分子机制[J]. 胡基华,李晶,张淑梅,陈静宇,孟利强,姜威,曹旭,刘宇帅,张鹏远. 安徽农业科学. 2014(35)
博士论文
[1]大豆蚜气味结合蛋白的结合特性及组织定位[D]. 王玲.东北农业大学 2014
[2]松墨天牛和天敌花绒寄甲对几种树木挥发物的电生理及行为反应[D]. 任利利.北京林业大学 2014
[3]云斑天牛触角cDNA文库的构建及相关嗅觉蛋白的表达及功能分析[D]. 李慧.华中农业大学 2012
[4]苜蓿夜蛾和大豆食心虫气味感受相关蛋白基因的克隆分析及表达[D]. 王宇.东北农业大学 2012
[5]多胺对小菜蛾嗅觉影响机制的研究[D]. 张志春.华中农业大学 2009
[6]防护林杨树天牛灾害的生态调控理论与技术研究[D]. 骆有庆.北京林业大学 2005
[7]光肩星天牛对寄主植物挥发性物质的行为反应及作用机理的研究[D]. 李建光.北京林业大学 2001
硕士论文
[1]松褐天牛肿腿蜂的寄主定位机制[D]. 周长祥.华中农业大学 2016
[2]孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白CmonOBP1和CmonOBP2基因的克隆和时空表达[D]. 潘畅.中山大学 2016
[3]褐梗天牛生物学特性和引诱剂的初步研究[D]. 张霖.北京林业大学 2016
[4]松褐天牛气味结合蛋白基因的克隆与功能分析[D]. 王娟.华中农业大学 2015
[5]学习经历对川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白表达的影响[D]. 陈春燕.四川农业大学 2015
[6]云斑天牛空间格局分析及补充营养植物对其的影响[D]. 胡瑜珩.北京林业大学 2015
[7]黄曲条跳甲化学感受基因的鉴定与表达分析[D]. 王正兵.仲恺农业工程学院 2015
[8]桔小实蝇气味结合蛋白基因的鉴定与表达分析[D]. 龚妃良.仲恺农业工程学院 2014
[9]云斑天牛性信息素分离鉴定及气味结合蛋白结合特性分析[D]. 潘翔宇.华中农业大学 2014
[10]松褐天牛OBPs基因克隆与分析[D]. 高雄.华中农业大学 2014
本文编号：3214633
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