毛竹不同截短U3启动子的克隆及表达分析

发布时间：2021-06-29 19:54

　　具有明确转录起始位点的U3和U6启动子是CRISPR/Cas9技术中驱动sgRNA转录的重要元件。从毛竹（Phyllostachys edulis）中克隆了2个PeU3启动子,均进行了3个不同长度的截短,长度分别为550、397和149 bp及561、392和152bp;并分别构建6个启动子驱动的GUS及LUC植物表达载体,再利用农杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）介导法分别转化麻竹（Dendrocalamus latiflorus）愈伤组织和烟草（Nicotiana benthamiana）叶片。结果显示,这些PeU3启动子总体都具有转录活性,不同PeU3启动子以及同一PeU3启动子不同截短时其转录活性不同,其中长度为397 bp的PeU3-1-2pro启动子活性最强,可为构建竹子CRISPR/Cas9基因组编辑体系提供更多理想的内源启动子。 

【文章来源】：植物学报. 2020,55(03)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

不同截短PeU3启动子驱动报告基因GUS/LUC的表达载体构建

将不同截短PeU3启动子序列分别与植物表达载体pCAMBIA1301及pGreenII0800-LUC进行同源重组,经PCR检测后与预期的目的片段大小相符,则表明不同截短的PeU3启动子与表达载体pCAMBIA1301及pGreenII0800-LUC构建成功。图3 PeU3启动子序列分析

PeU3启动子序列分析

【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄不同截短U3启动子的克隆及功能分析[J]. 蒲艳,刘晓东,阿尔祖古丽·塔什,魏倩,刘超.  华北农学报. 2019(01)
[2]棉花U3和U6启动子在CRISPR/Cas9基因组编辑体系中的功能鉴定[J]. 藏旭阳,代培红,李继洋,蒲艳,顾爱星,刘晓东.  棉花学报. 2019(01)
[3]毛竹快速生长期茎秆不同节间光合色素和光合酶活性的差异[J]. 孙建飞,翟建云,马元丹,傅卢成,卜柯丽,王柯杨,高岩,张汝民.  植物学报. 2018(06)
[4]基于棉花U6启动子的海岛棉CRISPR/Cas9基因组编辑体系的建立[J]. 李继洋,雷建峰,代培红,姚瑞,曲延英,陈全家,李月,刘晓东.  作物学报. 2018(02)
[5]不同截短U3启动子在棉花中的功能分析[J]. 雷建峰,徐新霞,代培红,李继洋,张巨松,刘晓东.  棉花学报. 2016(03)
[6]棉花不同GbU6启动子截短克隆及功能鉴定[J]. 雷建峰,李月,徐新霞,阿尔祖古丽·塔什,蒲艳,张巨松,刘晓东.  作物学报. 2016(05)
[7]利用番茄U3snRNA基因上游启动区构建植物表达载体及对烟草的转化[J]. 李丽莉,扈廷茂,扈会平,刘明秋,苏慧敏.  内蒙古大学学报(自然科学版). 2005(01)



本文编号：3257061