白桦BpZFP3基因抗逆功能研究
发布时间：2021-08-11 22:57
锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,因其具有指状结构特征且能结合Zn2+而得名。锌指蛋白是个庞大的家族,根据Cys和His残基的数目和位置可将锌指转录因子分为C2H2、C8、C6、C3HC4、C2HC、C2HC5、C4、CCCH和C4HC3九种类型,其中C2H2型是生物中发现的种类最多的一类锌指蛋白。研究表明,植物体中的锌指蛋白在植物生长发育和耐逆性等多种生物学过程中发挥作用。本研究以白桦的锌指蛋白转录因子基因为研究对象,对基因的表达和功能进行了初步研究,主要研究结论如下：（1）利用qRT-PCR技术,对不同胁迫条件下14个BpZFPs基因在白桦根组织中的时序表达进行了分析,结果表明,BpZFP3、BpZFP4和BpZFP12均能够对高盐、干旱胁迫作出应答,并且在不同胁迫条件下基因的表达模式各不相同。（2）利用PCR技术,克隆得到BpZFP3全长基因,蛋白保守结构域分析表明,BpZFP3属于C2H2-Type锌指蛋白。（3）将BpZFP3构建到植物表达载体pGWB5质粒中,采用农杆菌介导法进行拟南芥的遗传转化,获得3个表达量显著高于对照的转基因株系,PCR检测表明基因整合到拟南芥...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
图１－１巧指域结构示意图??梓指蛋白广泛分布在真核生物体中组成了一个庞大的家族，因此对于巧指蛋白的分??类方法也有多种
又称为ＴＦＩＩＩＡ类型梓指或经典巧指，它是生物中发现的种类最多、研究较为透彻。??Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白的巧指区一般为ＣＸ２＿４ＣＸ３ＦＸｓＬＸ２ＨＸ３＿５Ｈ?（Ｃ表示半脱氨酸，Ｈ表示氨酸，Ｘ表示任意氨基酸，Ｐ表示苯丙氨酸，Ｌ表示亮氨酸），其中两个Ｃｙｓ和两个Ｈｉ与Ｚｎ２＋形成配位键，进而形成一个包含片发夹和一个ａ螺旋的紧密指状结构。植Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白除了含有巧指结构外，一般还含有一个核定位信号区ＮＬＳ（也称Ｂｂｏｘ）：是与亚细胞定位相关的功能区；一个Ｌｂｏｘ：富含Ｌｅｕ的而且可能与蛋白质相作用有关的功能区；一个ＤＬＮ－ｂｏｘ：靠近Ｃ端的与转录抑制活性相关的区域（图２）。而并不是所有的植物Ｃ２Ｈ２型蛋白都有这些功能保守区域，有些没有ＮＬＳ，有些没ＤＬＮ－ｂｏｘ，而有些则是没有心６〇＾１１９１。??植物Ｃ２Ｈ２型锋指蛋白的结构与其他真核生物相比有两个明显的特征：一是植物指蛋白相邻巧指结构间的间隔比较长，而且变化较大，而多数动物Ｃ２Ｈ２型梓指蛋白指间的距离很短，一般只有７个氨基酸，称为ＨＣ连接肤；二是植物Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白ａ螺旋区一般都含有ＱＡＬＧＧＨ保守序列，这是植物锋指蛋白所特有的，在已发现的有动物锋指蛋白中都没有这一段序列，送表明植物Ｃ２Ｈ２巧指蛋白家族可能涉及到控植物所特有的生命过程ｔｕＤｌ。??
２．３．３不同处理后ＢｐＺＦＰ耐盐基因在白梓不同组织中的表达模式分析??进一步对可能参与白巧盐胁迫应答反应的Ｈ个基因（曲ＺＦ／ｙ、邸ＺＦ／Ｖ和??卸巧Ｐ／２）进行各胁迫处理不同时间后在不同组织中的表达模式分析（图２－２、图２－３??和图２－４）。结果显示，ＮａＣｌ处理后：卸ＺｆＰｊ基因在白巧根和叶（除６ｈ和１２ｈ）中均??上调表达，但叶中表达量上调趋势明显低于根中，而邸ＺＦ／ｙ基因在白枠茎中的相对表??达量在处理的各个时间点均呈下调趋势；卸基因的变化趋势与邸ＺＦｆｊ基因相??似，只是在ＮａＣｌ处理４８ｈ后在茎中的相对表达量有所上调，但幅度很小；邱巧乎基??因在白梢的各组织中的表达量均上调，且上调幅度随着处理的时间延长而升高；ＰＥＧ处??理后：邱巧基因在白梓根（除１２ｈ、４化和７２ｈ）和叶中的相对表达量均呈明显上调??趋势，而茎中只在处理短时间内（６ｈ）稍有上调，之后便转为下调模式；卸ＺＦ／Ｖ基因??只是在叶中表达量上调趋势明显高于根中，其余变化趋势与辟记八ｙ基因相似：??邸ＺＦ尸。基因的表达趋势与公的护八／正相反，邸ＺＦ尸。在白巧根（除１２ｈ、４化和??７化）和叶中均下调表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物转录因子与作物抗逆胁迫关系的研究进展[J]. 李红霞,汪妤,张战凤,彭惠茹,倪中福. 麦类作物学报. 2013(03)
[2]干旱胁迫下外源脱落酸对大豆花期生理特性的影响[J]. 阮英慧,董守坤,刘丽君,孙聪姝,王立彬,郭茜茜,盖志佳. 大豆科学. 2012(03)
[3]十字花科植物C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20同源序列克隆与进化分析[J]. 韩莹琰,张爱红,范双喜,曹家树. 核农学报. 2011(05)
[4]植物bZIP转录因子的生物学功能[J]. 张计育,渠慎春,郭忠仁,杜小丽,都贝贝,章镇. 西北植物学报. 2011(05)
[5]植物非生物胁迫诱导启动子顺式元件及转录因子研究进展[J]. 郭晋艳,郑晓瑜,邹翠霞,李秋莉. 生物技术通报. 2011(04)
[6]脱落酸对甜椒幼苗抗寒性的诱导效应及其机理研究[J]. 罗立津,徐福乐,翁华钦,洪淑珠,段留生,李召虎. 西北植物学报. 2011(01)
[7]盐旱互作对不同生境盐地碱蓬种子萌发和幼苗生长的影响[J]. 刘金萍,高奔,李欣,宋杰,范海,王宝山,赵可夫. 生态学报. 2010(20)
[8]植物抗逆反应中的转录因子网络研究进展[J]. 陈儒钢,巩振辉,逯明辉,李大伟,黄炜. 农业生物技术学报. 2010(01)
[9]菠萝锌指蛋白基因AcRCHY1的克隆与表达分析[J]. 杨祥燕,蔡元保,吴青松,孙光明. 园艺学报. 2009(11)
[10]脱落酸在植物逆境胁迫研究中的进展[J]. 郝格格,孙忠富,张录强,杜克明. 中国农学通报. 2009(18)
博士论文
[1]水稻锌指蛋白基因RZF5和RZF71的克隆与功能分析[D]. 郭书巧.南京农业大学 2006
本文编号：3337059
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
图１－１巧指域结构示意图??梓指蛋白广泛分布在真核生物体中组成了一个庞大的家族，因此对于巧指蛋白的分??类方法也有多种
又称为ＴＦＩＩＩＡ类型梓指或经典巧指，它是生物中发现的种类最多、研究较为透彻。??Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白的巧指区一般为ＣＸ２＿４ＣＸ３ＦＸｓＬＸ２ＨＸ３＿５Ｈ?（Ｃ表示半脱氨酸，Ｈ表示氨酸，Ｘ表示任意氨基酸，Ｐ表示苯丙氨酸，Ｌ表示亮氨酸），其中两个Ｃｙｓ和两个Ｈｉ与Ｚｎ２＋形成配位键，进而形成一个包含片发夹和一个ａ螺旋的紧密指状结构。植Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白除了含有巧指结构外，一般还含有一个核定位信号区ＮＬＳ（也称Ｂｂｏｘ）：是与亚细胞定位相关的功能区；一个Ｌｂｏｘ：富含Ｌｅｕ的而且可能与蛋白质相作用有关的功能区；一个ＤＬＮ－ｂｏｘ：靠近Ｃ端的与转录抑制活性相关的区域（图２）。而并不是所有的植物Ｃ２Ｈ２型蛋白都有这些功能保守区域，有些没有ＮＬＳ，有些没ＤＬＮ－ｂｏｘ，而有些则是没有心６〇＾１１９１。??植物Ｃ２Ｈ２型锋指蛋白的结构与其他真核生物相比有两个明显的特征：一是植物指蛋白相邻巧指结构间的间隔比较长，而且变化较大，而多数动物Ｃ２Ｈ２型梓指蛋白指间的距离很短，一般只有７个氨基酸，称为ＨＣ连接肤；二是植物Ｃ２Ｈ２型巧指蛋白ａ螺旋区一般都含有ＱＡＬＧＧＨ保守序列，这是植物锋指蛋白所特有的，在已发现的有动物锋指蛋白中都没有这一段序列，送表明植物Ｃ２Ｈ２巧指蛋白家族可能涉及到控植物所特有的生命过程ｔｕＤｌ。??
２．３．３不同处理后ＢｐＺＦＰ耐盐基因在白梓不同组织中的表达模式分析??进一步对可能参与白巧盐胁迫应答反应的Ｈ个基因（曲ＺＦ／ｙ、邸ＺＦ／Ｖ和??卸巧Ｐ／２）进行各胁迫处理不同时间后在不同组织中的表达模式分析（图２－２、图２－３??和图２－４）。结果显示，ＮａＣｌ处理后：卸ＺｆＰｊ基因在白巧根和叶（除６ｈ和１２ｈ）中均??上调表达，但叶中表达量上调趋势明显低于根中，而邸ＺＦ／ｙ基因在白枠茎中的相对表??达量在处理的各个时间点均呈下调趋势；卸基因的变化趋势与邸ＺＦｆｊ基因相??似，只是在ＮａＣｌ处理４８ｈ后在茎中的相对表达量有所上调，但幅度很小；邱巧乎基??因在白梢的各组织中的表达量均上调，且上调幅度随着处理的时间延长而升高；ＰＥＧ处??理后：邱巧基因在白梓根（除１２ｈ、４化和７２ｈ）和叶中的相对表达量均呈明显上调??趋势，而茎中只在处理短时间内（６ｈ）稍有上调，之后便转为下调模式；卸ＺＦ／Ｖ基因??只是在叶中表达量上调趋势明显高于根中，其余变化趋势与辟记八ｙ基因相似：??邸ＺＦ尸。基因的表达趋势与公的护八／正相反，邸ＺＦ尸。在白巧根（除１２ｈ、４化和??７化）和叶中均下调表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物转录因子与作物抗逆胁迫关系的研究进展[J]. 李红霞,汪妤,张战凤,彭惠茹,倪中福. 麦类作物学报. 2013(03)
[2]干旱胁迫下外源脱落酸对大豆花期生理特性的影响[J]. 阮英慧,董守坤,刘丽君,孙聪姝,王立彬,郭茜茜,盖志佳. 大豆科学. 2012(03)
[3]十字花科植物C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20同源序列克隆与进化分析[J]. 韩莹琰,张爱红,范双喜,曹家树. 核农学报. 2011(05)
[4]植物bZIP转录因子的生物学功能[J]. 张计育,渠慎春,郭忠仁,杜小丽,都贝贝,章镇. 西北植物学报. 2011(05)
[5]植物非生物胁迫诱导启动子顺式元件及转录因子研究进展[J]. 郭晋艳,郑晓瑜,邹翠霞,李秋莉. 生物技术通报. 2011(04)
[6]脱落酸对甜椒幼苗抗寒性的诱导效应及其机理研究[J]. 罗立津,徐福乐,翁华钦,洪淑珠,段留生,李召虎. 西北植物学报. 2011(01)
[7]盐旱互作对不同生境盐地碱蓬种子萌发和幼苗生长的影响[J]. 刘金萍,高奔,李欣,宋杰,范海,王宝山,赵可夫. 生态学报. 2010(20)
[8]植物抗逆反应中的转录因子网络研究进展[J]. 陈儒钢,巩振辉,逯明辉,李大伟,黄炜. 农业生物技术学报. 2010(01)
[9]菠萝锌指蛋白基因AcRCHY1的克隆与表达分析[J]. 杨祥燕,蔡元保,吴青松,孙光明. 园艺学报. 2009(11)
[10]脱落酸在植物逆境胁迫研究中的进展[J]. 郝格格,孙忠富,张录强,杜克明. 中国农学通报. 2009(18)
博士论文
[1]水稻锌指蛋白基因RZF5和RZF71的克隆与功能分析[D]. 郭书巧.南京农业大学 2006
本文编号：3337059
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