BpmiR156对白桦生长发育的影响及抗逆性分析

发布时间：2022-01-04 23:30

　　MicroRNA（miRNA）是一类非编码的小RNA（Small RNA）,通过调节其靶基因的表达来影响植物的生长发育进程。一些miRNA在植物逆境胁迫的适应方面发挥着重要的作用。本试验通过对获得的8个转miR156过表达白桦株系为对象,探讨miR156对白桦生长发育及抗性的影响。主要研究包括:1.对已获得的8个转基因株系进行分子检测,确认其已经整合到白桦基因组中并正常表达;转基因叶片变小,叶缘锯齿变浅,叶基角变大,苗高变低,地径变细,侧枝增多且变粗,IAA和GA3含量升高。2.抗病试验中发现:转基因株系叶片的病斑数明显小于非转基因对照株系,转基因株系SOD、POD、PPO、PAL、CAT的活性都显著高于非转基因对照株系的活性,同时测定了相关抗病基因的表达量,转基因株系中MYB106、MYB61、RPP13、RPM1的表达量与非转基因对照株系相比均上调表达。3.0.4%NaCl处理12 d后,转基因株系的盐害指数达到60%,而对照株系仅19%,且复水后的相对生长量小于对照株系;并对胁迫处理过程中各株系的SOD活性、MDA含量及H202含量进行了测定,发现:随着胁迫开始后,转基因株系中S... 

【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１转ｍ／Ｗ５６植株的ＰＣＲ检测??Ｍ：?ＭａｒｋｅｒＤＬ２０００；?１：?ｐＧＷＢ２－ｍｉＲ１５６；?２：?ＷＴ；?３－１０：转化子??

５〇〇ｂｐ??ｉ〇°＾??图２－１转ｍ／Ｗ５６植株的ＰＣＲ检测??Ｍ：?ＭａｒｋｅｒＤＬ２０００；?１：?ｐＧＷＢ２－ｍｉＲ１５６；?２：?ＷＴ；?３－１０：转化子??２．３．２转基因白桦的定量分析??以转基因及非转基因对照株系的叶片为材料，选取非转基因株系为对照，按照－??ＡＡＣｔ计算分析过表达株系中ｗ／７？／５６的相对表达量。结果如图２－２?：?８个超表达株系中??ｗ／ｉ？７５（５的相对表达量均显著高于对照株系（ＷＴ），尤其是０ｘ１５６－２和０ｘ１５６－４株系中??／ｍ７？／５６的表达量最高，分别比对照株系上调了?２４．２５和７．４６倍。??６?ｒ??ｆ??５?？?丄??由??４?■??＿?｜｜?ｅ??刼３?－?．?Ｔ??懈?ｉ?￥?ｃｄ?ｃｄ??苌２?＿?”?ｒｆｌ?＆?ｒ４?丄??要?＾?１?＇?Ｔ?ｂ?１??１?－?丄?ｒｎ?．??０?３?Ｊ?Ｉ?．?Ｉ?Ｉ?．?Ｉ?Ｉ?．?Ｍ?．?Ｈ?．?Ｎ?．?ｆｌ?．?Ｍ?．??ＷＴ?０ｘ１５６－１?ｏｘ１５６－２?０ｘ１５６－３?０ｘ１５６－４?０ｘ１５６－５?０ｘ１５６－６?０ｘ１５６－７?ｏｘ１５６＾??？１?Ｌ??图２－２不同转化子中ｍ；７？７５６的定量分析??２．３．３?ｍ／／？／５６对白桦叶片发育的影响??２．３．３．１转基因白桦叶片的长、宽测定??测定办《？７？／５６过表达白桦与非转基因对照白桦的叶片的长和宽，计算长宽比，并??用ＳＰＳＳ软件进行数据的多重比较和方差分析，结果如图２－３，?２－４，?２－５，?２－６所示：转??基因株系的叶片与非转基因对照株系的叶片长、宽差异达到极显著

图２－５?ｏｔ；７Ｗ５６过表达白桦的叶宽?图２－６?０Ｘ１５６白桦与ＷＴ的叶长宽比??２．３．３．２转基因白桦叶片形态??通过对叶片形态及叶基角的测量，发现转基因株系与对照相比叶缘锯齿变浅（图２－??７）、叶基角变大（图２－８），其中对照株系叶基角为１８０度，转基因株系平均叶基角为??２４２．５?度。??Ｄ?■［?????：二．?ＷＴ?ＯＸ１５６－４?ＯＸ１５６－６??图２－７转基因白桦与对照株系叶片?图２－８转基因白桦与对照株系叶片叶基角??２．３．３．３转基因白桦叶片的叶绿素含量测定??

【参考文献】：
期刊论文
[1]植物microRNA与逆境响应研究进展[J]. 许振华,谢传晓.  遗传. 2010(10)



本文编号：3569266