小麦麸皮水浸提液中抑藻物质分离与鉴定

发布时间：2021-12-24 23:10

　　前期研究表明小麦麸皮水浸提液（WBL）具有很好的抑藻作用。但是,由于小麦麸皮中含有丰富的氮、磷,直接投入水体会加重水体富营养化。因此,将小麦麸皮中的有效抑藻物质进行分离尤其重要。本文针对小麦麸皮水浸提液中有效抑藻物质的分离与鉴定展开研究,主要研究结果归纳如下：通过用萃取、大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶逐步对小麦麸皮水浸提液有效抑藻组分进行分离,逐步缩小有效抑藻组分的范围。通过用三氯甲烷萃取并进行抑藻试验,初步分离的有效抑藻组分分别存在于水相和有机相中。再将水相部分用大孔吸附树脂进行分离,用乙醇进行梯度洗脱并进行抑藻实验,结果表明有效抑藻组分存在于水洗溶液部分。进一步将水洗溶液部分用葡聚糖凝胶进行分离,30%乙醇进行洗脱并进行抑藻实验,确定有效抑藻组分存在于样品NO.5、样品NO.7和样品NO.8中。将分离的各个有效抑藻组分进行HPLC-MS检测,并将检测结果与已知物质进行比对,查阅文献,用标准物质进行抑藻实验,现已确定了油酸酰胺和L-缬氨酸的抑藻效果,两者的EC50浓度分别为6.00mg/L和19.25mg/L。对油酸酰胺的抑藻机理进行初步探讨后发现,油酸酰胺胁迫能显著降低细胞中Chla的含... 

【文章来源】：湖南农业大学湖南省

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
第一章 前言
    1.1 水体富营养化的现状和危害
    1.2 蓝藻和蓝藻水华
    1.3 微囊藻属及其主要种类
    1.4 蓝藻水华的控制
    1.5 生化除藻的应用
    1.6 生物源抑藻物质国内外研究进展
    1.7 研究目的和意义
第二章 小麦麸皮水浸提液中有效抑藻组分的分离与鉴定
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 主要仪器设备
        2.1.3 小麦麸皮水浸提液(WBL)的制备
        2.1.4 小麦麸皮水浸提液(WBL)的萃取
        2.1.5 藻种培养液的配制
        2.1.6 D101大孔吸附树脂洗脱样品
        2.1.7 葡聚糖凝胶洗脱样品
        2.1.8 藻种培养与实验处理
        2.1.9 HPLC洗脱条件
        2.1.10 MS检测条件
        2.1.11 对M aeruginosa NIES-843生长的影响
        2.1.12 叶绿素a(Chla)和类胡萝卜素(Car)含量的测定
        2.1.13 相对抑制率的计算
        2.1.14 统计与分析
    2.2 结果
        2.2.1 WBL萃取各相抑藻实验结果
        2.2.2 大孔吸附树脂分离样品抑藻实验结果
        2.2.3 葡聚糖凝胶分离样品抑藻实验结果
        2.2.4 HPLC-MS鉴定结果
    2.3 讨论
第三章 两种从WBL中分离物质的抑藻效果研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 油酸酰胺和L-缬氨酸母液的制备
        3.1.3 藻种培养与实验处理
        3.1.4 对M.aeruginosa NIES-843生长的影响
        3.1.5 Chla和Car含量的测定
        3.1.6 相对抑制率的计算
        3.1.7 叶绿素光诱导荧光多相瞬态上升动力学的测定
        3.1.8 叶绿素荧光多相瞬态上升动力学参数分析
        3.1.9 油酸酰胺对M.aeruginosa NIES-843超微结构的影响
        3.1.10 RNA提取
        3.1.11 统计与分析
    3.2 结果
        3.2.1 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843生长的影响
        3.2.2 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843细胞色素含量的影响
        3.2.3 油酸酰胺胁迫下M.aeruginosa NIES-843叶绿素光诱导荧光动力学特
        3.2.4 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843叶绿素最小荧光F_0值的影响
        3.2.5 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843 PS Ⅱ单位反应中心能量流比活性能参数的影响
        3.2.6 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843 PS Ⅱ能量流动分配比率的影响
        3.2.7 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843超微结构的影响
        3.2.8 RNA抽提及逆转录
        3.2.9 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843脂肪酸合成基因表达的影响
        3.2.10 油酸酰胺胁迫对M.aeruginosa NIES-843不饱和脂肪酸合成基因表达的影响
        3.2.11 L-缬氨酸对M.aeruginosa NIES-843的抑制效果
    3.3 讨论
        3.3.1 油酸酰胺抑藻实验结果讨论
        3.3.2 L-缬氨酸抑藻实验结果讨论
第四章 几种物质的抑藻效果研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 母液的制备
        4.1.3 藻种培养与实验处理
        4.1.4 Chla和Car含量的测定方法
        4.1.5 槲皮素对M.aeruginosa NIES-843生长的影响
        4.1.6 相对抑制率的计算
        4.1.7 统计与分析
    4.2 结果
        4.2.1 丁香酸抑藻实验结果
        4.2.2 丹宁酸抑藻实验结果
        4.2.3 槲皮素抑藻实验结果
        4.2.4 L-苯丙氨酸抑藻实验结果
    4.3 讨论
        4.3.1 丁香酸抑藻实验结果讨论
        4.3.2 丹宁酸抑藻实验结果讨论
        4.3.3 槲皮素抑藻实验结果讨论
        4.3.4 L-苯丙氨酸抑藻实验结果讨论
第五章 结语
    5.1 总结
    5.2 主要创新点
    5.3 研究展望
参考文献
致谢
在读期间科研学术成果目录


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3551362