发酵豆粕替代鱼粉及添加晶体精氨酸和蛋氨酸对凡纳滨对虾生长和抗应激能力的免疫调节

发布时间：2020-04-14 02:40

【摘要】：1.发酵豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾生长,免疫相关酶活及免疫相关基因表达的影响近年来发酵豆粕作为鱼粉替代物的研究已受到越来越多关注,但有关其影响水产动物生长的健康及免疫机能机制尚不明确。免疫相关酶、基因与水产动物健康、免疫机能密切相关。本实验拟从免疫相关酶活及基因转录水平探讨发酵豆粕替代鱼粉对凡纳滨对虾生长影响的健康及免疫机能机制。设置5种实用饲料,以30%鱼粉组(FM)为对照组,分别设置用4%(FSM4)、8%(FSM8)、12%(FSM12)和16%(FSM16)的发酵豆粕,相应替代9.7%、19.4%、29.1%和38.8%的鱼粉饲料组,饲养体重为(7.62±0.23)g的凡纳滨对虾60天后,统计生长性能,检测肌肉营养成分、血清及肝胰腺免疫酶活性,肝胰腺HSP70mRNA和鳃Toll受体mRNA、IMDmRNA、溶菌酶(LZM)mRNA免疫相关基因的表达水平。结果表明:1)发酵豆粕替代鱼粉在凡纳滨对虾成活率上与对照组相比无显著影响(P0.05);过低和过高的发酵豆粕添加量皆会影响凡纳滨对虾的特定生长率(P0.05)。2)肌肉粗蛋白含量在发酵豆粕添加组都低于对照组,除FSM12外差异不显著(P0.05);粗脂肪含量随着发酵豆粕添加量的升高而降低,FSM16组表现最低。3)免疫指标中,FSM4和FSM16组血清谷丙转氨酶(ALT)活性显著高于对照组(P0.05),碱性磷酸酶(ALP)活性除FSM12组外其余发酵豆粕组显著高于对照组(P0.05),谷草转氨酶(AST)活性分别在FSM4组和FSM8组出现最高值和最低值,血清总蛋白(TP)含量与肝胰腺丙二醛(MDA)含量除FSM16组外其余发酵豆粕组与对照组无显著性差异(P0.05)。4)鳃Toll受体(TLR)mRNA随着发酵豆粕添加量的增大有上升趋势,鳃IMDmRNA表达量随发酵豆粕添加量的增加呈先增后减趋势,过高的添加量会降低鳃LZMmRNA表达量,而肝胰腺HSP70mRNA表达量则随着发酵豆粕添加量的增加不断上升。综上所述,发酵豆粕适量替代鱼粉对凡纳滨对虾生长性能无明显影响,并可提高免疫相关酶活,上调免疫相关基因的表达,具有改善机体免疫机能的效果。本实验条件下适宜替代鱼粉比例以8%-12%为宜;发酵豆粕替代鱼粉过高会引起机体不同程度的应激反应2.大豆抗原蛋白对凡纳滨对虾的生长,免疫酶活及免疫相关基因表达的影响设置两组实验,实验一为两种实用饲料,含24.9%的豆粕(SBM),8%的发酵豆粕和16.95%的豆粕(FSBM);实验2为两种半纯化饲料,为高抗原蛋白(SPD1)组和低抗原蛋白(SPD2)组,其中的抗原蛋白含量(大豆球蛋白和β球蛋白)分别与实验一豆粕组和发酵豆粕组相同,旨在比较发酵豆粕(FSBM)和豆粕(SBM)对凡纳滨对虾生长性能、基因表达、氧化状态和非特异性免疫反应的影响,及其中的抗原蛋白对凡纳滨生长,免疫健康等影响机制。实验对虾初重为7.62±0.23g,每组饲料设4平行,投喂60天。结果显示,在实验一中,对虾体增重和特定生长率在两组实用饲料组中无显著性差异(P0.05),但在SBM组中,血清ALP、AST、ALT和肝胰腺SOD、LZM的活性显著高于FSBM组(P0.05),而MDA的含量上无显著差异(P0.05),而对于对虾鳃中TLR、LZM、IMD和肝胰腺HSP70的基因表达水平上同样SBM组显著高于FSBM组(P0.05);实验二,SPD2组的增重率和特定生长率显著高于SPD1组(P0.05),免疫相关指标中,SPD1组与SPD2组相比具有更高的ALP,ALT和LZM活性,而TLRmRNA,LZMmRNA和IMDmRNA的表达水平低于SPD2组,HSP70mRNA的表达水平SPD1组显著高于SPD2组(P0.05)。总结,在凡纳滨对虾饲料中,豆粕比发酵豆粕更有可能诱发非特异性免疫反应和氧化应激。豆粕中的抗原蛋白是降低对虾的免疫力,损害肝脏腺健康的主要原因。3.发酵豆粕替代鱼粉时添加不同水平晶体精氨酸对凡纳滨对虾生长和抗应激能力的免疫调控发酵豆粕作为鱼粉替代物已广泛应用于水产动物饲料中,但在替代时会出现氨基酸平衡性问题,精氨酸作为一种必需氨基酸,在水产动物的新陈代谢中起着重要的作用,为了探讨发酵豆粕替代鱼粉时精氨酸的重要性,本实验以凡纳滨对虾为研究对象(初重0.62±0.1g),在以鱼粉(22.5%)和发酵豆粕(10%)为主要蛋白源,精氨酸含量为1.98%的基础饲料中,分别添加0,0.2%,0.4%,0.6%,0.8%的晶体精氨酸。养殖60天后,统计对虾生长情况,检测体成分,肝胰腺氧化、血清免疫指标和基因表达水平,并进行耐低氧和抗弧菌实验,结果显示:5组饲料在对虾成活率上无显著性差异(P0.05),0.2%组和0.8%组增重率和特定生长率显著高于其它组(P0.05)。血清MDA各组间无显著性差异(P0.05),血清AST、ALT活性在0.2%组最高,0.8%组最低且与其他组差异显著(P0.05);肝胰腺MDA含量在0.2%组最低。耐低氧和抗弧菌能力皆在0.2%组出现最高值,其次为0.8%组。检测低(0.0%)中(0.4%)高(0.8%)水平相关基因表达量发现0.4%添加组在IMD、LZM、MyD88基因表达上皆为最低(P0.05),ATF4基因在0.0%组表达量最高且显著高于另两组(P0.05)。综合生长、肝胰腺健康、抗应激能力和基因表达水平,在鱼粉用量为22.5%,发酵豆粕用量为10%时,添加0.4%的晶体精基酸能有效调控凡纳滨对虾的免疫系统,增强机体的抗应激能力,保护肝胰腺健康,降低肝胰腺氧化应激且不影响对虾的生长性能。4.发酵豆粕替代鱼粉时添加不同水平晶体蛋氨酸对凡纳滨对虾生长和抗应激能力的免疫调控发酵豆粕作为鱼粉替代物已广泛应用于水产动物当中,但在替代时会出现氨基酸平衡性问题。蛋氨酸作为常见的第一限制性氨基酸,在鱼粉替代时的添加显得比其他必需氨基酸更为重要。为此,本实验以凡纳滨对虾为研究对象(初重0.62±0.1g),在前期研究的基础上,以含有22.5%鱼粉和10%发酵豆粕为主要蛋白源,蛋氨酸含量为0.81%的饲料作为基础饲料,配制5组不同晶体蛋氨酸添加量(0.00%,0.12%,0.24%,0.36%,0.48%)的饲料,养殖60天探讨其对凡纳滨对虾生长、血清和肝胰腺指标、相关基因表达水平、耐低氧和抗弧菌能力的影响。结果显示:5组饲料在对虾成活率,增重率和特定生长率上无显著性差异(P0.05)。血清MDA五组之间无显著性差异(P0.05),血清AST,ALT活性在0.00%和0.48%组显著高于其他组(P0.05);肝胰腺MDA含量在0.24%组最低。耐低氧能力,0.00%组显著高于其他组,抗弧菌能力在0.12%和0.24%组出现最高值,选取了低(0.00%)、中(0.24%)、高(0.48%)三种水平蛋氨酸饲料组进行对虾基因表达量的检测,发现0.24%组TLR基因相对表达量显著高于其他组,IMD基因0.00%组显著低于另两组,LZM基因表达量随着蛋氨酸量增加而降低,ATF4基因0.00%组显著高于0.24%组,综上可知,在鱼粉用量为22.5%,发酵豆粕用量为10%时,添加0.24%的晶体蛋基酸能更有效,增强凡纳滨对虾抗弧菌能力,降低对虾肝胰腺氧化程度,保护肝胰腺健康,且不影响其生长性能。
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对虾养殖,产量,对虾病害,海洋大学

上海海洋大学硕士学位论文导致水质环境的污染进一步严重，水产品安全问题也随之而出[2-5]，科主要从对虾饲料配方的优化来提高对虾免疫抗病力以解决对虾病害爆发用等问题[6-9]。

对虾养殖,成功率,对虾病害,抗病力

主要从对虾饲料配方的优化来提高对虾免疫抗病力以解决对虾病害爆用等问题[6-9]。图 1-1.近几年我国对虾养殖产量Fig1-1.The production of shrimp aquaculture in China in recent years.
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S968.22

【参考文献】