中华绒螯蟹组蛋白H1基因的克隆及其在精巢发育中的表达特征

发布时间：2020-05-28 05:37

【摘要】：中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis),是我国重要的经济蟹类之一。为了研究组蛋白H1在中华绒螯蟹非浓缩核形成中的作用及在其精子发生过程中的动态变化,本文采用PCR和RACE技术获得了中华绒螯蟹组蛋白H1基因的全长c DNA序列。通过生物信息学方法对该基因进行了分析,其中包括:组蛋白H1的氨基酸分析,三级结构分析和比较,同源性分析,系统树分析和基因组结构特征分析。同时采用实时定量PCR技术分析了组蛋白H1及H1-delta在中华绒螯蟹精巢发育不同时期的表达特征。研究结果如下:中华绒螯蟹组蛋白H1基因的全长c DNA序列为804 bp,包括79 bp的5′非编码区(5′UTR)、185 bp的3′非编码区(3′UTR)和540 bp的开放阅读框(ORF),共编码179个氨基酸,所编码多肽的相对分子量为18.28 k Da,理论等电点p I为10.93。此研究首次成功确定、克隆并测序了中华绒螯蟹H1基因的全长c DNA序列。对比中华绒螯蟹、家鼠和鲫鱼的H1结构域的三级结构,证明H1的结构域在进化上是保守的。氨基酸序列同源性分析发现,组蛋白H1在同一属间的保守性很高(90%以上),但在不同属间的保守性却较低(50%左右),尤其是C末端结构差异很大。实时定量PCR技术的结果显示,H1及H1-delta在中华绒螯蟹精巢不同发育期均具有表达,且表达量均在精母细胞时期达到最大,之后逐渐下降,到精子期时下降至最低。H1在精原细胞期、精母细胞期、精细胞期的表达量与精子期相比均呈现出显著差异(P0.05),而H1-delta的表达量只有精母细胞期与精子期有显著差异。这些研究将为探讨组蛋白在中华绒螯蟹精子发生中的动态变化及进一步探究中华绒螯蟹精子核的非浓缩成因提供依据。
【图文】：

图 1 精子发生过程中核碱性蛋白的替代过程Fig.1 Replacement of the basic nuclear proteins during spermatogenesis上述碱性蛋白的替换现象外，在精子形成过程中碱性蛋白的修饰作用对染

图 2 中华绒螯蟹雄性生殖系统（胡自强，，1997）精小管；3.输精管；4.贮精囊；5.副性腺；6.射精Male reproductive system in E. sinensis (Hu Ziqiangl sperm duct; 3. ductus deferens; 4. seminal vesicle;
【学位授予单位】：河北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S917.4

【参考文献】

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本文编号：2684796