水中添加维生素C缓解鲤鱼运输应激的研究

发布时间：2020-07-09 21:07

【摘要】：本课题针对鱼类运输过程中出现的应激问题,综合分析了运输应激的作用机制,并通过向水体中添加维生素C(Vc)获得了缓解氨氮和运输应激的效果,为解决水产动物氨氮和运输应激问题提供了新的思路和研究方向,具有重要的应用意义。主要研究内容和结果如下:1.水中添加Vc对鲤鱼氨氮急性毒性的缓解作用的研究。选取鲤鱼运输和养殖过程中的重要应激源氨氮,建立急性氧化应激模型,并研究水中添加Vc对模型中鲤鱼氧化应激的缓解作用。首先进行鲤鱼的氨氮急性毒性研究,得到氨氮对鲤鱼的96 h全致死最低浓度为145.00 mg/L,对应非离子氨浓度为3.00 mg/L;96 h LC50为79.75 mg/L,对应非离子氨浓度为1.65 mg/L。其次,在氨氮致死145.00 mg/L浓度下,添加不同浓度Vc,得到30 mg/L浓度下,96 h胁迫时间内,实验鱼全部存活。并且发现Vc浓度可以在该实验环境下6 h内维持稳定,并测得鲤鱼血清中Vc浓度显著升高。2.水中添加Vc缓解鲤鱼氧化应激反应的机理研究。利用氨氮胁迫建立鲤鱼氧化应激模型,在50%96 h LC50氨氮(40 mg/L TA-N,0.83 mg/L NH3-N)浓度下添加Vc,分别设置对照组(0 mg/L TA-N)、模型组(40 mg/L TA-N)和缓解组(40 mg/L TA-N+25 mg/L Vc),进行96 h氨氮胁迫实验。结果显示,与对照组相比,经12、24、48和96 h氨氮胁迫后,模型组鲤鱼血清生化指标,如皮质醇和血糖含量,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)活性,抗氧化指标,如超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)含量,肝脏热休克蛋白70(HSP70)表达量均不同程度的升高,出现显著性变化,并且随着胁迫时间的延长,鲤鱼鳃组织结构受到的损伤逐渐加重。上述指标的变化,说明氨氮胁迫成功诱导鱼体内产生氧化应激反应,影响鲤鱼的正常生理状态,本实验氧化应激模型建立成功。与模型组相比,添加Vc的缓解组鲤鱼中的上述指标在不同的胁迫时间下表现出不同程度的下降趋势,变化显著。缓解组鲤鱼鳃组织结构较模型组受到的损伤较轻。这说明水中添加的Vc可以有效缓解由氨氮胁迫引起的鲤鱼体内的氧化应激反应,减轻氧化损伤。3.水中添加Vc缓解鲤鱼运输应激的研究。分为对照组、模型组和缓解组(25 mg/L Vc),模型组和缓解组设置为200 g/L拥挤密度下汽车以60 km/h速度运输5 h。与对照组相比,经5 h的运输应激后,模型组鲤鱼血清生化指标,如皮质醇和血糖含量,ALT、AST和AKP活性,抗氧化指标,如SOD、CAT和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,MDA含量,肝脏HSP70和热休克蛋白90(HSP90)表达量均不同程度的升高,出现显著性变化。肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达量未出现显著性变化。模型组鲤鱼鳃组织结构受到损伤,肌肉氨基酸组成和质构特性也出现显著性变化。这说明运输应激诱导鱼体产生氧化应激反应,对机体产生不利影响,造成氧化损伤,运输应激模型成功建立。与模型组相比,缓解组鲤鱼血清中皮质醇和血糖含量,ALT、AST和AKP活性均显著降低。SOD、CAT活性和MDA含量也显著低于模型组。缓解组鲤鱼肝脏中HSP70表达量也显著降低,HSP90表达量变化不显著,TNF-α表达量显著升高。缓解组鳃组织结构并未受损,结构功能完整。以上结果表明运输应激对鲤鱼产生了不利影响,诱导体内产生氧化应激反应,而水中添加的Vc可以进入鱼体内,在一定程度上缓解氧化应激,减轻或避免氧化损伤。
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S965.116

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本文编号：2747981