视黄酸调控长牡蛎酪氨酸酶基因表达的研究
发布时间：2020-12-17 15:34
黑壳长牡蛎的育种工作已取得一定的进展,但长牡蛎黑色素的生成机制尚不明确。视黄酸作为生物体内一种重要的活性物质,除了在早期调控胚胎发育和分化外,还对发育过程中的体色变化有重要影响。关于这方面在长牡蛎的前期工作中,没有发现酪氨酸酶基因的编码区变异与壳色形成有关,但发现视黄醛脱氢酶和酪氨酸酶基因在黑壳牡蛎外套膜中的转录水平显著高于白壳牡蛎,基于前期工作和前人成果,我们提出假设:视黄醛脱氢酶基因表达上调后,能催化产生更多的视黄酸,视黄酸将与视黄酸受体结合,形成"视黄酸-视黄酸受体"复合物,复合物会与酪氨酸酶基因调控区的视黄酸反应元件结合,上调酪氨酸酶基因表达,然后生成更多的黑色素。本文的主要研究内容和结果如下:1长牡蛎的视黄酸暴露生理实验研究以活体长牡蛎为实验材料从生理生化角度,将外源视黄酸进行体表注射暴露,同时控制视黄酸为变量设置溶剂对照实验,暴露结束后分别取外套膜组织和外壳等,利用光学分析仪器进行表观色素差异分析。结果发现视黄酸的注射暴露会使长牡蛎内壳颜色加深,且外套膜黑色素的相对含量变化差异显著,可分析原因为高视黄酸含量的体内环境可能会促使黑色素的含量升高。利用软体动物专用酶联免疫试剂盒...
【文章来源】：鲁东大学山东省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
视黄酸注射组A和对照组B的长牡蛎Figure2.1PacificoysterofRetinoicacidinjectiongroupAandcontrolgroupBAB
蛎（A 组）的外套膜外边缘的腔道中如图 2.2，注射量为 50μl（可，如用 10μl 的进样器注射 5 次），另 组长牡蛎（B 组）作为溶剂等量的 DMSO 进行注射，注射完成后放回原养殖环境继续饲养，以旋藻为饵料每天投喂，该注射操作每 2 天进行 次，共 5 次，10 天射。利用解剖工具对 A、B 两组长牡蛎外套膜进行取样备存，取样过程上进行操作，将两组长牡蛎的外套膜利用液氮取样保存。其中，0mg 外套膜样品用于实验检测，剩余外套膜组织同样取出备份冻存壳剔除其他组织后完整保留，以做观察。将取样的外套膜每组每只样品取 100mg（湿重）置于 1.5ml 离心管 Xing 等[108]的方法加入 1ml 的 1.0M 氢氧化钠溶液，置于 80℃水浴 30min，10000g 离心 5min，弃沉淀取上清，利用紫外可见分光光0nm 波长下检测吸光值（同浓度的氢氧化钠溶液调零），将数据整理作表并分析结果，以此说明视黄酸注射对黑色素含量的影响。
视黄酸调控长牡蛎酪氨酸酶基因表达的研究2.3 结果2.3.1 外壳表征变化自两组长牡蛎在进行视黄酸注射对比实验开始起，观察并记录外壳颜色变化外壳的变化，将有颜色沉积变化者用相机记录如图 2.3 所示。其中 A 组表壳内表面颜色沉着相比 B 组较为明显，然而 B 组样品也并非没有沉色，只是相对 A 组较浅。该结果与预期实验结果相符，能够反映出视黄酸的存在与长牡蛎的色素沉着有 定的关系。
【参考文献】：
期刊论文
[1]粤东海产经济贝类重金属含量与暴露风险评价[J]. 郑清梅,刘兴隆,郭江山,钟艳梅,韩春艳. 农业资源与环境学报. 2019(01)
[2]不同粒径塑料微颗粒在斑马鱼腮组织中的积累及其对蒽毒性的影响[J]. 蔡亚云,赵佳玥,李文锋,宋文娟,张道勇,潘响亮. 应用与环境生物学报. 2017(06)
[3]视黄酸在免疫调节中的研究进展[J]. 王慧,陈永,管剑龙. 实用药物与临床. 2017(09)
[4]视黄醛脱氢酶1在胆囊癌中的表达及其临床意义[J]. 黄海林,陈超,甘泉,杜哲明. 武警医学. 2017(04)
[5]海洋酸化对水生动物免疫系统的影响及机理[J]. 许友卿,刘永强,丁兆坤. 水产科学. 2017(02)
[6]栉孔扇贝几丁质酶基因的克隆及功能鉴定[J]. 王俊,高静,谢军,郑向南,谢莉萍,张荣庆. 水产学报. 2017(02)
[7]海洋酸化背景下铅胁迫对近江牡蛎溶菌酶活性的影响[J]. 李晓梅,郭体环,张来军,李由明. 江苏农业科学. 2016(12)
[8]牡蛎育种研究进展[J]. 宁岳,郭香,曾志南,祁剑飞,巫旗生. 厦门大学学报(自然科学版). 2016(05)
[9]牡蛎壳土壤调理剂在江西红壤旱地花生上的应用效果[J]. 黄燕燕,贺琦,张龙华. 中国农技推广. 2015(08)
[10]长牡蛎(Crassostrea gigas)贝壳与外套膜中黑色素的提取和鉴定[J]. 于文超,何成,武长路,王娇,李壮,郭婷,李永川,王晓通. 海洋与湖沼. 2015(04)
博士论文
[1]67kD层粘连蛋白受体及其调控通路在文蛤（Meretrix meretrix）细胞生长和幼虫发育中的功能解析[D]. 游雅楠.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[2]黑木耳黑色素对细菌群体感应调控行为的抑制及其抗氧化活性的研究[D]. 李斌.南京农业大学 2011
[3]栉孔扇贝Cf-dmrt4-like基因的克隆、表达及功能分析[D]. 冯政夫.中国海洋大学 2010
[4]鱿鱼墨黑色素及黑色素铁生物活性的研究[D]. 雷敏.中国海洋大学 2008
[5]视黄酸缺乏对斑马鱼心脏发育影响的机制研究[D]. 侯佳.复旦大学 2008
[6]抑制剂对酪氨酸酶的效应及其对黑色素生成调控的研究[D]. 宋康康.厦门大学 2007
[7]视黄酸受体基因在儿童胸腺中的表达与T淋巴细胞发育的研究[D]. 周小建.复旦大学 2003
硕士论文
[1]黑曲霉黑色素辐射防护作用的研究[D]. 宋缘.兰州大学 2017
[2]长牡蛎Caspase家族蛋白调控细胞凋亡的机制研究[D]. 徐家超.中国科学院研究生院(海洋研究所) 2016
[3]三角帆蚌贝壳珍珠层颜色形成相关基因的克隆与表达分析[D]. 罗红瑞.上海海洋大学 2015
[4]长牡蛎酪氨酸酶基因家族的克隆、表达和系统发生分析[D]. 于雪.中国海洋大学 2014
[5]尼罗罗非鱼dnd和aldhla2基因在生殖细胞发育过程中的功能研究[D]. 方玲玲.西南大学 2014
[6]BMP/Smad通路分子及酪氨酸酶在长牡蛎（Crassostrea gigas）早期发育中的作用研究[D]. 刘刚.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[7]泰和乌鸡抗疲劳功能及黑色素抗氧化功能研究[D]. 朱方.浙江大学 2012
[8]长牡蛎Calbin和Tyrosinase基因的克隆及其在幼虫生长发育中的表达分析[D]. 王晓菲.河北大学 2011
[9]全反式视黄酸对兔视网膜色素上皮细胞的影响[D]. 王媛.郑州大学 2009
[10]长牡蛎SNP标记的开发及多态性检测[D]. 王绍宗.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2009
本文编号：2922278
【文章来源】：鲁东大学山东省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
视黄酸注射组A和对照组B的长牡蛎Figure2.1PacificoysterofRetinoicacidinjectiongroupAandcontrolgroupBAB
蛎（A 组）的外套膜外边缘的腔道中如图 2.2，注射量为 50μl（可，如用 10μl 的进样器注射 5 次），另 组长牡蛎（B 组）作为溶剂等量的 DMSO 进行注射，注射完成后放回原养殖环境继续饲养，以旋藻为饵料每天投喂，该注射操作每 2 天进行 次，共 5 次，10 天射。利用解剖工具对 A、B 两组长牡蛎外套膜进行取样备存，取样过程上进行操作，将两组长牡蛎的外套膜利用液氮取样保存。其中，0mg 外套膜样品用于实验检测，剩余外套膜组织同样取出备份冻存壳剔除其他组织后完整保留，以做观察。将取样的外套膜每组每只样品取 100mg（湿重）置于 1.5ml 离心管 Xing 等[108]的方法加入 1ml 的 1.0M 氢氧化钠溶液，置于 80℃水浴 30min，10000g 离心 5min，弃沉淀取上清，利用紫外可见分光光0nm 波长下检测吸光值（同浓度的氢氧化钠溶液调零），将数据整理作表并分析结果，以此说明视黄酸注射对黑色素含量的影响。
视黄酸调控长牡蛎酪氨酸酶基因表达的研究2.3 结果2.3.1 外壳表征变化自两组长牡蛎在进行视黄酸注射对比实验开始起，观察并记录外壳颜色变化外壳的变化，将有颜色沉积变化者用相机记录如图 2.3 所示。其中 A 组表壳内表面颜色沉着相比 B 组较为明显，然而 B 组样品也并非没有沉色，只是相对 A 组较浅。该结果与预期实验结果相符，能够反映出视黄酸的存在与长牡蛎的色素沉着有 定的关系。
【参考文献】：
期刊论文
[1]粤东海产经济贝类重金属含量与暴露风险评价[J]. 郑清梅,刘兴隆,郭江山,钟艳梅,韩春艳. 农业资源与环境学报. 2019(01)
[2]不同粒径塑料微颗粒在斑马鱼腮组织中的积累及其对蒽毒性的影响[J]. 蔡亚云,赵佳玥,李文锋,宋文娟,张道勇,潘响亮. 应用与环境生物学报. 2017(06)
[3]视黄酸在免疫调节中的研究进展[J]. 王慧,陈永,管剑龙. 实用药物与临床. 2017(09)
[4]视黄醛脱氢酶1在胆囊癌中的表达及其临床意义[J]. 黄海林,陈超,甘泉,杜哲明. 武警医学. 2017(04)
[5]海洋酸化对水生动物免疫系统的影响及机理[J]. 许友卿,刘永强,丁兆坤. 水产科学. 2017(02)
[6]栉孔扇贝几丁质酶基因的克隆及功能鉴定[J]. 王俊,高静,谢军,郑向南,谢莉萍,张荣庆. 水产学报. 2017(02)
[7]海洋酸化背景下铅胁迫对近江牡蛎溶菌酶活性的影响[J]. 李晓梅,郭体环,张来军,李由明. 江苏农业科学. 2016(12)
[8]牡蛎育种研究进展[J]. 宁岳,郭香,曾志南,祁剑飞,巫旗生. 厦门大学学报(自然科学版). 2016(05)
[9]牡蛎壳土壤调理剂在江西红壤旱地花生上的应用效果[J]. 黄燕燕,贺琦,张龙华. 中国农技推广. 2015(08)
[10]长牡蛎(Crassostrea gigas)贝壳与外套膜中黑色素的提取和鉴定[J]. 于文超,何成,武长路,王娇,李壮,郭婷,李永川,王晓通. 海洋与湖沼. 2015(04)
博士论文
[1]67kD层粘连蛋白受体及其调控通路在文蛤（Meretrix meretrix）细胞生长和幼虫发育中的功能解析[D]. 游雅楠.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[2]黑木耳黑色素对细菌群体感应调控行为的抑制及其抗氧化活性的研究[D]. 李斌.南京农业大学 2011
[3]栉孔扇贝Cf-dmrt4-like基因的克隆、表达及功能分析[D]. 冯政夫.中国海洋大学 2010
[4]鱿鱼墨黑色素及黑色素铁生物活性的研究[D]. 雷敏.中国海洋大学 2008
[5]视黄酸缺乏对斑马鱼心脏发育影响的机制研究[D]. 侯佳.复旦大学 2008
[6]抑制剂对酪氨酸酶的效应及其对黑色素生成调控的研究[D]. 宋康康.厦门大学 2007
[7]视黄酸受体基因在儿童胸腺中的表达与T淋巴细胞发育的研究[D]. 周小建.复旦大学 2003
硕士论文
[1]黑曲霉黑色素辐射防护作用的研究[D]. 宋缘.兰州大学 2017
[2]长牡蛎Caspase家族蛋白调控细胞凋亡的机制研究[D]. 徐家超.中国科学院研究生院(海洋研究所) 2016
[3]三角帆蚌贝壳珍珠层颜色形成相关基因的克隆与表达分析[D]. 罗红瑞.上海海洋大学 2015
[4]长牡蛎酪氨酸酶基因家族的克隆、表达和系统发生分析[D]. 于雪.中国海洋大学 2014
[5]尼罗罗非鱼dnd和aldhla2基因在生殖细胞发育过程中的功能研究[D]. 方玲玲.西南大学 2014
[6]BMP/Smad通路分子及酪氨酸酶在长牡蛎（Crassostrea gigas）早期发育中的作用研究[D]. 刘刚.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[7]泰和乌鸡抗疲劳功能及黑色素抗氧化功能研究[D]. 朱方.浙江大学 2012
[8]长牡蛎Calbin和Tyrosinase基因的克隆及其在幼虫生长发育中的表达分析[D]. 王晓菲.河北大学 2011
[9]全反式视黄酸对兔视网膜色素上皮细胞的影响[D]. 王媛.郑州大学 2009
[10]长牡蛎SNP标记的开发及多态性检测[D]. 王绍宗.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2009
本文编号：2922278
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