线粒体与三倍体湘云鲫不育的相关性研究

发布时间：2020-12-28 17:17

　　线粒体素有细胞“动力工厂”之称,是真核生物细胞内的能量转换中心和细胞程序性死亡的重要参与者,有自身的DNA即mt DNA而备受人们瞩目。三倍体湘云鲫具有3套染色体,减数分裂过程中不能完成染色体的正常配对,因此不能形成正常的配子。多年的养殖经验也证明三倍体湘云鲫是不育的。本研究旨在利用特殊的可研究对象—不育的三倍体湘云鲫、可育的改良二倍体红鲫、可育的改良异源四倍体鲫鲤、可育的同源三倍体鲫鲂,来探讨mtDNA含量与染色体倍性和鱼类育性之间的关系,并进一步探究了造成不同倍性鱼卵巢中mtDNA含量差异的原因。显微结构方面,在鱼类繁殖期利用石蜡切片法观察比较了不育三倍体湘云鲫两种类型(精巢型,卵巢型)的性腺结构。分子生物学方面,利用实时荧光定量PCR技术,测算了在不同倍性鱼性腺中mtDNA的相对含量和线粒体转录因子A(TFAM)的相对表达量。另一方面,同样利用实时荧光定量PCR方法测算了同种倍性鱼(可育的同源三倍体鲫鲂和不育三倍体湘云鲫)不同组织间mtDNA的相对含量。结果发现:对于可育的改良二倍体红鲫和改良异源四倍体鲫鲤来说,卵巢中的mtDNA含量随染色体倍性增加而增加且均明显高于相应精巢的m... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 鱼类远缘杂交概况
    1.2 鱼类多倍体化研究进展
    1.3 三倍体鱼研究概况
        1.3.1 三倍体鱼的来源
        1.3.2 三倍体鱼育性研究进展
    1.4 线粒体及mtDNA的研究进展
        1.4.1 线粒体概述
        1.4.2 mtDNA异常的相关性研究
    1.5 TFAM对线粒体调控研究进展
    1.6 本研究的主要目的和内容
第二章 繁殖期三倍体湘云鲫性腺观察
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 性腺外部形态观察
        2.2.2 性腺石蜡切片观察
    2.3 实验结果与分析
        2.3.1 性腺的外部结构形态
        2.3.2 光镜下性腺石蜡切片图
    2.4 讨论
第三章 三倍体湘云鲫及其父母本线粒体含量差异分析
    3.1 实验材料
    3.2 实验方法
        3.2.1 引物设计
        3.2.2 总DNA的提取
        3.2.3 PCR引物检测
        3.2.4 实时荧光定量PCR及数据处理
    3.3 实验结果
        3.3.1 线粒体 12S rRNA基因检测
        3.3.2 相对mtDNA拷贝数比较
    3.4 讨论
第四章 TFAM对mtDNA调控作用分析
    4.1 实验材料
    4.2 实验方法
        4.2.1 引物设计
        4.2.2 RNA的提取
        4.2.3 反转录成cDNA
        4.2.4 特异性引物检测
        4.2.5 实时荧光定量PCR和数据处理
    4.3 实验结果和分析
        4.3.1 TFAM引物检测
        4.3.2 TFAM相对表达量比较
    4.4 讨论
第五章 三倍体湘云鲫和三倍体鲫鲂mtDNA差异分析
    5.1 实验材料
    5.2 实验方法
        5.2.1 总DNA的提取
        5.2.2 各组织mtDNA相对含量测定
    5.3 实验结果和分析
        5.3.1 三倍体湘云鲫各组织间mtDNA拷贝数比较
        5.3.2 同源三倍体鲫鲂各组织间mtDNA拷贝数比较
        5.3.3 两种三倍体鱼性腺中mtDNA拷贝数比较
    5.4 讨论
第六章 总结
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]TFAM在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的作用[J]. 谷海,唐莉.  中国老年学杂志. 2015(22)
[2]大眼鳜与翘嘴鳜正反交及其正交子代自交的胚胎发育观察[J]. 卢薛,孙际佳,王海芳,罗渡,侯晓翠,刘凌志,李桂峰.  中国水产科学. 2013(05)
[3]线粒体转录因子A的研究进展[J]. 姚鹏程,张佐,彭淑红,周军.  生命科学. 2011(05)
[4]冷、热休克法诱导黄颡鱼三倍体的比较研究[J]. 宋立民,王卫民,周小云,阎里清,王玉芬.  水产学报. 2010(05)
[5]远缘杂交导致不同倍性鱼的形成[J]. 刘少军.  中国科学:生命科学. 2010(02)
[6]鱼类生殖细胞[J]. 徐红艳,李名友,桂建芳,洪云汉.  中国科学:生命科学. 2010(02)
[7]鱼类人工多倍体育种的研究进展[J]. 孙远东,谭立军,唐新科,李自君.  现代生物医学进展. 2008(09)
[8]远缘杂交形成的二倍体鱼和多倍体鱼生殖细胞染色体研究[J]. 张纯,刘少军,孙远东,肖俊,覃钦博,王静,何伟国,尤翠平,刘筠.  分子细胞生物学报. 2008(01)
[9]线粒体与细胞凋亡的关系[J]. 张新勇,王士雯.  老年医学与保健. 2007(01)
[10]奥利亚罗非鱼(♀)、鳜(♂)及其子代间遗传关系的研究[J]. 杨弘,夏德全,刘蕾,吴婷婷.  水产学报. 2004(05)

博士论文
[1]多倍体鲫鲤Piwi和piRNA的表达与育性的相关性研究[D]. 周毅.湖南师范大学 2012
[2]不同倍性鱼线粒体全基因组及肝脏转录组中线粒体相关基因分析[D]. 尤翠平.湖南师范大学 2012
[3]洞庭湖水域不同倍性野生鲫鱼生物学特性及进化关系研究[D]. 肖俊.湖南师范大学 2010
[4]不同倍性鲫鲤脑垂体细胞结构和HPG轴相关基因的表达及育性研究[D]. 龙昱.湖南师范大学 2009

硕士论文
[1]杂交三倍体泥鳅细胞遗传学研究[D]. 高养春.大连海洋大学 2014
[2]Vasa基因在不同倍性鲫鲤中的研究[D]. 刘刚.湖南师范大学 2012



本文编号：2944112